附》录F  《洁净室生《物学评价方法 ！ ： ？ ：F．1 《 回、排《风高效过滤风口微】生物透过率 — F】。．1．？1  ？仪，器设备和材料应符】合以下要求 】 ， ：1  仪器设—。备 【Φ，90：玻璃平皿(或—塑料平皿《。)； 《 空气微【生物采样器(固体】撞击式？采样器、离心式采样！器、液？体冲击式采样—器等均可使》用常：用，的，为安德逊(A—。。nd：er：sen)采样—器隶属于固体撞【击，式采样器)； 】 ：。 微生《物气溶胶《发生器(由气泵、】油水分离器》、，流量计、高》效过滤器、喷—雾器、？缓冲瓶等组成)【； 》 各种玻璃移液管！、吸：管、试管、容器瓶等！； 【计时器(如秒表)；！ ： 恒温培养箱！； 【洁净工作台； 【 高压【蒸汽消毒锅 】 2  —材料 — 胰蛋白》酶大：豆琼脂培养基—； 【生理盐水《； 《 75》％酒精； 》 —菌种(宜选用毒【性小或？没有：毒性且？便于区别《大气杂？菌，。的特定菌种常用的有！枯草芽孢杆菌、黏质！沙雷氏菌《、大肠噬菌体—等)； — 采样介质【可，选用硅酮类》、石：油胨类？、醇类、糖类、纤】维素类？。、蛋白类、》混，合类、组织培养液】等； 【 套筒？(测：定回、排《风高效过滤风口时】需，要使用罩住整个入】口使：。检漏范？围包括边框》长度应使通过—气流时间《为0．5s》～1s见图F．【1．1) 》 》 —F．1．2  【透过率应按以下方法！评，。价 在】回、排风高》效过滤风口》进，风端：。加设套筒在套筒【口，部发生微生》物，气，溶胶在过《滤器出风面用—浮，游，菌法采样由回、【排，风高效过滤风口【。前后：的微生物气》溶胶浓？度可：计算得出微》生，物透过率 — F．—1．：3  检测步骤应】符合下列《要求 【 1：  制定方案—明确评价任务制【定详细的《评价方案包括确【定微生物气溶胶、发！生器所需的菌—液浓度、洁净压缩空！气流量确定在回【、排风高《效过滤风口出风端的！微生物采样周期、】采样次？数等一般《。可根据回、排风高效！过滤风口的》尘埃颗？粒物过滤效率进行】计算 《 2  实验！准备根据预先制定的！评价方案准备所需材！料、仪器《设备制作采》样培：。。养皿一般而》言采样细《菌用营养《琼脂：。培养基？采集真菌用沙氏或真！菌选择培养基采【样病毒用根据病毒】特性配制的采—样介质？ 3【  发生微》生物气溶胶将培育】好的高？浓度微生物溶液【一般为(1》08～1《010)cfu／m！。。L利用生理盐水【。按10倍稀释法逐次！稀释至需要的低浓度！(步骤1确定的浓度！)然后由移液管、】吸管量？取一定容积的低【浓度：微生物溶液至气溶胶！发生装置的》溶液瓶由微生物气溶！胶发生器在回—、排风高《效过：。滤风口的进风—端将微生物溶液【雾化发生微生物气溶！胶 《 ： ，4  采样对于回】、排风高效过滤风口！可，在其后的出风管道中！采，样离排风高》效，过滤风门的距离根据！。实际工？程而定原则上出风后！有所混合能近则好采！样点沿风管宽度方】向均匀？布置3点《采样：周，期、采样次》数按预先制定—。的评价方案》执行采样过程中【不能中断微生物气】溶胶的发生采样【结束后才能停止发】生微生物《。气溶胶此后喷雾【器中必须尚存不少】于一半的微生物【。溶液且需对》剩余菌液活性进行】涂布法验证》以，修正菌液浓度 ！ 5  培养】将采好的平皿立即盖！上盖细菌类在—(35～37)【℃培养(1》～2)？d结核菌培养3周真！菌在：。28℃培养3—d上述培养时—间可根据所采样微生！物特性而适》当调整？培养的过程》中应定？期观察培养箱内菌】落，的生长情况》避，免，培养箱？内，干燥菌落不生长【或培养皿内》菌落过多《。充分：生长汇？合等情？。况的：发，生 》 6 《 计：数可以目测、电子显！微镜、菌落计数器】等对采集《到且：培养好的菌落进行】计数当采到的—菌落很多时在它【们，未生长汇合前用【显，微，镜及早观察》将，平皿划成许多—相等的部分抽出【一部分数菌然—后乘以所划份数即可！。得出每皿总菌数计】数完毕后《可根据式(F．1】．31)计算浓度 ！ ： ， ？ — 8  消！毒灭菌实验结—束后需对剩》余菌液？以及所用各种仪【。器、设备、平皿等进！行消毒？灭菌、酒《精擦洗处理 ！ F．1．—4  ？在进行？洁净室生《物学评价时应—符合以下要求 ！ 1  正式试！验前应？进行预？备试验并对》。各种仪器进行—调试和标定 — 《 2： ， 应进行阳性对【照试验 ！3  应《进行阴性对照试验 ！ 4—  应？在阳性试验中长菌】阴，性试验组不长菌【 ， 5—  实？验过程中《应，注意实验人》员的安全防护实验】结束：后应做好各种仪器】、设备、衣物等的消！毒灭菌处理》 —6  ？试验结束后需对微】生物气溶胶发生器】内的剩余菌液活性进！行涂布法验证修正】式(F．1．33】)中的菌液浓度 】 》7 ：。 ，采，样周期应设》计合：。理当确定采样周期】存在一定《困难：时宜增？加采样次数》每，次采样使用不同【的采样周期》 ：