。 附录F【  洁净《。室生物学《评，价方法 ！ ： F．1  回】、排风高效过滤【风口微？生物透？过率 》 F．1．！1 ： 仪器设备和材料】应符合以下》要求 【。 ，1  仪器设—备， Φ【90：玻璃平皿(或塑【料平皿？)； 《 ： 空气微生物【采样器(固》体撞击式采样器、】离心式采样》器、液体冲击式【采样器等均可使用】。常用：的为安德逊(A【nders》。en)采《样器隶属于固—体撞击？式采样器)；— 》 微生物气溶胶发生！器(由气泵、油【水分离器、流量计】、，高效过滤器、喷雾器！、缓冲瓶等》组成)； — 各种玻璃移！液管、吸管、试管】、容器瓶等； 【 计时器(！如秒表)； 】 恒温培养箱；！ ， ？。 洁净工作—台； 【 高压蒸汽》消毒：锅 2 ！ 材料 】 胰蛋白酶》大豆琼脂培养基【； 生理！盐水； ！。。75％酒精； 【 》 菌种(《宜选：用毒性小《或没：有毒性？。且便于区《别大气？杂菌的？特定：菌种常用的有枯草】芽孢杆菌、黏质沙】雷氏菌、大肠—。噬菌体等)； ！ ， ：采样介质可选—用硅：酮类、石油胨类、醇！类、糖类、纤维素】类、蛋白类、混合类！、组织培养液等；】 《 套筒(》。测，定，回、：排风高效过滤风口时！需要使用罩》住整个入口》使检：漏范：围包括？边框长度应使—通过气流《时间为0．5s【～1s见图F．1】．1：) 》 ： 《 F？．1．2《。 ， 透过率应》按以下方法评价【 在【回、排风高效过【滤风口进《风端加设套筒在套】筒口部发生微生【物气溶胶在过滤【器出风面用》浮游菌法《。采样由回、排—风高：效过滤风口前后的】微生：物，气溶胶？浓度可计算得—出微：生物透过率 — 《 F．1．3 【 检：测步骤应符合下【列要求 》 1  【制定方案明确评价任！务制定详《细的评价方》案包括确定》微生物气溶》胶、发生器所需的菌！液浓度、洁》净压缩空气流量确】定在回、排风—高效过滤《风口出风《端的：微，生物采样周期、【采样次数等》一般可根据》回、排风高效过滤】风口：的尘埃？。颗粒物过滤效—率进行？计算 ？ ，。 2 — ，实验准备《根据预先制定的【评价方案准备所需】材料、仪器》。设，备制作采样培—养皿一般而言采样细！菌用营？养，琼脂培养基采集真菌！用沙氏或真菌选择】。培，养基采？样病：毒用根据病毒特性】配制的采样介质【 ， 》3  发生》。微生物气溶胶将培育！好的高浓度微生物】。溶液一？般为(1《0，8～101》。0)c？fu／m《L利用生理盐水按1！0倍稀释法逐次稀】。释，至需要的低浓度【(步骤1确定的浓度！)然后？。由移液管《、吸管量取一定【容积：的低浓？度微生物溶液至气】溶胶发？生装：置的溶液瓶由微生物！气溶：胶，发生器在《回、排风《高效过滤风口的进风！。端将微生物》溶液雾？化发生微生物气溶】胶 4 ！ 采样对《于回、排风高效【过滤风口可在其【后的出风《管道中？采样：离排风高效过滤风】门的距离根》据实际工程而定原则！上出：。风，后有所混《合能近则好采样点沿！风管宽度《。。方向均匀布置3点】采样周期、采样次】数按预先制》。定的评价方案执【。行采样过《程中不能中断微生】物气溶胶《的发生采样结—束后才能停止发生微！生物气溶胶》此后喷雾器中必须】尚存：不少于一半的—微生：物溶液且需对剩余】菌液活性《进行涂布法》验证以？。修正菌液《。浓度 》 ： 5 ？。 培养将采好的平皿！立，即盖上盖细菌—类在(35》。～37)℃培养(】。1～2)d结核【菌培养3周》真菌：在28℃培养3d】上述培养时间可【根据所采样微—生物：特性而适当调—整培养的过程中应定！期观察培养箱—内菌落的生长情况】。避，免培养箱内干燥菌落！不生长？或培养皿内菌落过】多充分生长汇—合等情况《的发生 】 6  计数可【。以目测？、电子显微镜、菌】。落计数器等对采集】到且培？。养好的菌落》进行计数当采到【的菌落很多时在【。它们未生长汇合前用！显微镜及早观—察将平皿划成许多】相等的部分》抽，。出一部分数菌然后乘！以所划份数即可【得出每皿总菌数计】。数完毕？后可根据《式(F．《1．31)计—算浓：度，。 》 ：。。 ， ， ！8  ？消毒灭菌实验结【束后：。需对剩？余菌液以及所—用各种仪器、设【备、平皿等进行消】毒灭：菌、酒精擦》洗处理 】 F．？1．4？  在进《行洁：净室生物学评价时】应符合以下要求【 1【  正式试验前应进！行预备试验并—对各种仪器进—行调试和标定 ！ 2《  应？进行阳性对》照，试验 3！。  应进行》阴性对照试验— 4  ！应在阳性试验中长】菌阴性试验》组不长菌 】 ， 5 ？ 实验过程中应注】意实验人员的安全】防护实？验结：束后应？做好各种仪》器，、设备、衣物等的】消毒灭菌处理 】 6  试】验结束后需对微生】物气溶胶发》生器：内的剩？余菌：液活：性，进行涂布《法验证？修正式？(F．？1．33)中的菌】液浓度 《 ： 7  —采样周期应设计【合理：当确定采样》周期存在一》。定困难时宜增加【采样次数《每次：采样使用不同的采】。样周期 》