附》录F ？。 洁净室生物学【评价方？法 】 F．1—  回、排风高效过！滤风口微生物透过】率 ！F，．1．？1 ： 仪器设《备和：材，料，应符合？以下要求 ！ 1  仪》器设备 ！Φ90玻璃平皿(或！塑料平皿《)； 》 ？空气微生物采样器】(固体撞击》式采样器、》离心式采样器—、液体冲击式采样器！等均可使用常用的为！安德逊(An—d，ersen)采样】器隶属于固体撞【。。击式采样器)； ！ 微生物气】溶胶发生器(由气】泵，、油水分离器、流】量计、高效》过滤器、喷雾—。。。器、缓冲瓶等组【成)：； — ，各种玻璃移》液管、吸《管，、试管、容器瓶等】； 》 计时器(如秒】表)； 《 《 恒温培《养箱：；， ？ 洁净工作台】。； 》 ， 高压蒸《汽消毒锅 【 ，。 ：2  材《料， ？ ， 胰蛋《白酶大豆琼脂培养】基； 》 ？生理盐水； 】 75％酒精】；  ？。 菌种(】宜选用？毒，。性小或没有毒性且便！于，区，别大气杂菌的—特定菌种《常用的有《枯草芽孢杆菌—。、黏质沙雷》氏菌、大肠噬—菌体等)；》 》 采样介质可选用】硅酮类、石》。。油胨类、醇》类、糖类、纤维素】类，、蛋白？类、混合类、组【织培养液等； 【 ，。 套筒(测定！回，、排风高效》过滤风？口时需要使用罩住】整个：入口使检漏范围包括！边框长度应使通【过气流时《。间为0．5》s～1s见》。图F．1《．1) 【。 》 ？F．1．2》  透过率应按【以下：方法评价 ！ 在回、《排风：高效过滤风口进风】端加：设套筒在《。套，筒口部发生微生【物气：溶，。胶，在过滤器出风—面用浮？游菌法采样由回、】排风：高，效过滤？风口前后的微生【物气溶胶浓度可计】算，得出微生物透过【。率 《。。 ，。 F．1．3 】 检测？步骤：应符合？下列要求 【。 1  —制定方？案明确评价》任务制定详》细的评价方案包【括确定微生物气溶胶！、发生器所》需的菌液浓度—、洁净压缩空气流】量确定？在回、排风》高效过滤风口出风】端的微生物采样周】期、采？样，次数：等，一般：。可根据回《、排风高效过滤【风口的尘埃颗—粒物：过滤效？率进：行计算 《 2  】实，验准备根据预先制】定的评价方案准备】所需材料、仪器设备！制作采样培养—皿一般？而言采样细菌—用营养琼脂培—养基采集真》菌用沙氏或真—菌选择培养基—采样病毒用》根据病毒特性配【制的：采样介质《 3  ！发生微生物气—溶胶将培育好的高】浓，度微：生物溶液一般为【(108～1010！)cfu／m—L利：。用生理？盐水按？10：倍稀释法逐次稀释至！。需要：的低：浓度(？。步骤1确《定的浓度)然后由】移液管、吸管量取一！定容积的《低浓度微生物溶液至！气溶胶发生》装置：的溶液瓶由微—生物气溶胶发—生器在回、排—风高效过《滤风口的进风—端将：微生：物溶：液雾化发生微生【物气溶胶 》 》4， ， ，采样：对于：回、排风高效—过滤风口可在其后的！出风管？道中采样离排风高效！过滤风？门的距离根据—实际工程《而定原则《上出风后《有，所混合能近则好【采样点沿风管宽【度方向均匀布—。置3：点采样周期、采样次！数按预先制定—。。的评：价方案执行采样过程！中不能中断微生【物气溶？。胶，的发生采样结束后才！能停：止发生微《生物气溶胶此后【喷，雾器：中必须尚存不少于一！半的：微生物溶液》且需：对剩余菌《液活性进行》涂布法验证》以修正菌液浓度 】 5  培！养，将采：。好的平皿立》即盖上盖细》菌类在(《35～37》)℃培养(1—～2)？d结核菌培》养3周真菌》。在，28℃培养3d上述！培养：时间可根据所采样微！生物特性而适—当调：整培养的过程中应】定期观？察培养箱《。内菌落的生长—情况避？免培养箱内干燥菌落！不生长或培养皿【内菌落过多》充，分生长汇合等情【况的发生 【 ？。6 ：。 ，计数可以目测、【电子显微镜、菌【落计数器等对采集】到且培养《好的菌落进行计【数当采？到的菌落很》多，时，在它们未生》长，汇合前用显微镜及】早观察？将平：皿划成？许多相等的部分抽】出一部？分数菌然后乘以【所划份数《即可得出每》。皿总菌数计》数完毕后可根—据式(F．》1．31)计算【浓度 ！ 《 8 ！ 消毒灭菌》实验：结束后需《对剩余菌液以及所】。用各种仪器、设备】、平皿等进》行消：毒灭菌、酒精擦洗】处理 】F，。．1．4  在进】行洁净室生物学评价！时应符合以》下要求 【 1  正式试】验前应进行预备试验！并对：各种仪器进行调试】和标定 《 2  应！。进行阳？性对照试验 【 《。3，。  ：应进行阴性对—照试验 】 4  应在阳性试！验中长菌阴性—试验组不长》菌 5 ！。 实：验过程中应注意【实验人员《的安全防护实—验，。结束后应做》好各种仪器》、设备、《衣物等的消毒灭【菌，处理 6！  试验结束后需对！微生物气溶胶发【生器内的剩余菌液】活性进行涂布—法验证修正式—(F．1．》33)中的菌—液浓：度，。 —7  采样周期【应设计合《理当：确定采样周》期，存在一？。定，困难时？宜增加采样次—数每次采样使—用不同的采》样周：期 ？