， 附《录F  洁》净室生物学评—价方法 ！ F．1【  回、排风高【效过滤风口》微生物？透过率 — F—．1．1  仪【器设备和材》料应符合以下—要求 《 1 — 仪：器设备 — Φ《90玻璃《。平皿(或塑》料平皿)；》 ： ？ 空气微《生物：采样器(《固，体撞击式采》样器、离心式采【样器、液体冲击【式采样器等均—可使用常用》的为：安德逊(Ander！sen？)，采样器隶属于固体撞！击式采样器)—；， ， 微生物】气溶胶发《生，器(由气泵、油水分！离器、流量计、【高效过滤器、喷雾器！、缓冲瓶等组—成)； — ，。 各种玻璃移【液管、？吸管、试《管、容器瓶等—； 计时！器(：如秒表？)； 《 恒》温培养？箱； ？ 洁净工】作台； ！高压蒸汽消毒锅 ！ ， 2  材料 ！ ？ 胰蛋白》酶大：豆，琼脂培养基；— 生【理盐水？； 75！％酒精；  —。。 《 菌种(宜选用【毒性小？或没有毒性且便于】区别大气杂》菌的特？定菌种常用的—。有枯：草，芽孢杆菌、黏—质沙雷氏菌、大肠噬！菌，体等)； 】 采样《介，质可选用硅酮类【、石油胨类、醇【。类、糖类《、纤：维素类、蛋白类【、混合类、组织【培养液等；》。 ？。 ？套筒(测定回、排风！高效过滤风口时需要！使用罩住整》。个入口使检漏范围】包，括边框长度应使通过！气流时间为0．【5s：～1s见图》F．1．1) 】 《 ： F．1．2！  透过率应按以下！方法评价 】 在回、排风【高效过滤风》。口进：风端：加设套筒在》套筒口部发》生，微生物气溶》胶在过滤器出—风面用浮游菌法采】样由回、排风—。高效过滤风口前【后的微生物气溶【胶浓：度可计？算得出？。微生：物透过率 — F》．，1．3  检测步骤！应符合下列要求 ！ 1  【制定方案明确评价任！务制：定详细的评价方案包！括确定微生物—气，溶胶、？发生器所需的菌液】浓度、洁净压缩空气！流量确定在回、【排风高效《过滤：风口出风端的微【。生物采？样周期、《采样次数《等一般可根》据回：、排风？高效：过滤风口的尘埃【颗粒物过《滤效率进行计算【 》 ，2  实验准备根据！预先制定的评价方】案准备所需材—料，、，仪器设备《。制作采？样培养皿一》般而言采样细—菌用营？养，琼脂培养基采集真】菌用沙氏《或真菌选《择培养基采样病毒】。用根据病毒特性配制！的采样？介质 3！  发生微》生物：气溶胶将培育—好的高浓度微生物】溶液：。一般为(108～1！010)cf—u／mL利用—生理盐水按10倍稀！释法逐次稀》释至需要的》低浓度(《步骤1确定》的浓：度)然后《由移：液管、吸管量取【一定容积的低—浓度微生物溶液至气！溶，胶发生装《置的溶液瓶》由微生物气溶胶【。发生器？在回、排风高—效过滤风口的进风】端将微生物溶液雾】化发生微《生物气溶胶 — 《 4  《采样对于回、—排风高效过》滤风口可在其后【的，出风管道中采样【离排风高效过滤风门！的，距离根据实》际工程而《定原则上出风—后有所混合》。能近则好采样点【沿风管宽度方—向均匀？布置：。3点采样周》期、采？样次数？按预先？制定的评价方案【执，行采样过程中不【能中断微生物气溶胶！的发生采样结束【后才能停止发生微】生物气溶《胶，此后喷雾器中必须】尚存：不少于？。。一半的微生物溶【液且需对剩余菌液活！性进行涂《布法：验证以修《正菌液浓度 【 5》  培养《将采好的平皿立【即盖上盖细菌类【在(35～37)℃！培养(1～2—)d：结核菌培养3—周真菌？在28℃培养—3d上述培养时间】可根据所采样微生】物特性？而，。适当调整培养的过】程中应定《。期观：察培养箱内菌落的生！。长情况避免培养【箱内干燥《菌落不生长》或培养？皿内：。菌落过多充分生【长汇合等情况的发生！ ？ 6  计【数可以目测、电【子，显微镜、菌》落计数器等对采集】到且培养好的菌落】进行计数当采到的菌！落很多？时在它们未生长【汇合：前用显微《镜及：。早观察将《。平皿划成《。许多相等的部分抽出！一部分数菌然后乘以！所划份数即可得出每！皿总菌数计》数完毕后《。可根据式(》F．1．31)【计算浓度 】 ！ ， ？ 8  消毒—灭菌实验结束—后需对剩余》菌液以及所用各【种仪器、设备、平皿！等进行消毒灭菌、】。酒精擦洗处理 【 F．【1．：4 ： 在进行洁净室生】物，学评：价时应符合以下要求！ 《 1  正式【试验前应进行—预备试验并对各种仪！器进行调试》和标定 ！2 ：。 应进行阳性对【照试验 ！3  应进行阴性】对照试？验 — 4  应》在阳性试验中长【。菌阴性试验组不长】菌 【5  实验过程中应！注，意实验人员的—安全防护实验结束】后应做好各》种，仪器、设备、—衣物等的消毒灭菌处！理 【6 ： 试验结束后—需对微生物气溶【。胶发生器《内的：。。剩余菌液活性进行涂！布法：。验证修正式(—F．1．《33)中《的菌液浓度》 7 】 采样周期应设【。计合理当确》定采样周《期，。存在：一定困？。难，时，宜增加？采样次数每》次采：样使用不《同的采？样周期 》