： 附录F  洁净！。室生物学评价方【法 ： ， ： 《 ：F．1？  回、《排风：高效：过滤风口微生—。。物透过率 【 》F．1．1》  仪器设备—和材：料应符合以下要求 ！ ， ： 1 《 仪器设备》 Φ90！玻璃平皿(》或塑料平皿)； 】 空气微生！物采样器(固体撞击！式采样？器，、离心式采样器【、液：。体冲击式采样器【。等均可使用常用【的为安德逊(—Andersen】。)采样器隶属于【固，体撞击式采样器)；！ ： 《微生物气溶》胶，发生器(《由气泵、《。油水分离器》、，。流量：计、高效过滤器、】喷雾器、缓冲瓶【等组成？)； — ：各种玻璃移液—管、吸管、试—管、：容器瓶等《。；， 》 计时？。器(如？秒表)； — 恒温培养】箱； 洁！净工作台； 】 ： 高：压蒸汽消毒锅 ！ ： ，2，  材？料 《 ？胰蛋白酶大》豆琼脂培养基； ！ 生理盐水】； 75！％酒精；  — 菌种(宜！选，。用毒性小或没有【。毒性且便《于，区别大气《杂菌的特《定菌种常用的有【枯草芽孢杆菌、黏质！沙，雷氏菌、大肠噬菌】体，等，)，； 【采，样介质可选》用硅：酮类、石油胨类、】。醇类、糖类、纤维】素类、蛋《白，类、混合《类、组织培养液等】； ： ： 套筒(—测定回、《排风：高，效过滤风口时需要】使用罩住《整个入口使检漏范】围包括？边框长度应使通过气！流时间为0．5【s～1s见》图F．1．1)【 【 F．【1．：2  ？透过率应按以下方法！评价： ， ： ： 在回、排风高【效过滤风口进风【端加设？套筒在套筒口—部发生微生物气溶】胶在过滤器出风面用！浮游菌？法采样由回》、排风高效》过滤风口前后—的微生物气》溶胶浓度可计算得】出微：生物透过率 】 ： F．1．3—。。  检测步骤应【符合下？列要求 】 1  制定方案】明确评价《任务制定详细的评价！方案包括确》。定微：生物气溶胶》。、发：生，器所需的菌液浓【。度、洁净压缩空气流！量确定在回、排风高！效过滤风口出风【端的微生物采样周期！、采样次《。数等一般《可根据回《、排风高效过滤【风口的尘《埃，。颗粒物过滤效率进】行计算 》 2  实验！。准备根据预先制【定的评价方案准备所！需材：料、仪？器设备制作采样培养！皿一般而《言采样细菌用营养琼！脂培养？基采集？真，菌用沙氏或真菌【选择培养基采样【病毒用根据病毒【特性配制的》采样介？质 《 3  发生】微生物气溶胶将培】育好：的高浓度微生物溶】液一般为《(108～10【10)cfu—／mL利用生理盐水！按1：0倍稀释法逐次稀】。释至需？要的低？浓度(步骤1确定的！浓度)然后由移【液管、吸管》量取：一定容积的》低浓度？微生：物溶液至气溶胶发生！装置的？。溶液瓶由微》。生物气溶《胶发生器在》回、排？风高效？过滤风口的进风【端将微生物溶—液雾：化，发生微生物气—溶，。胶 ？ ， 4 》 采样对于回、排风！高效：过滤风？口，。可在其？后的出风管》道中采样离排风高效！过滤风？门的距离《根据：实际工程《而定：原，。则上出风后》有所混合能》近则好采样点沿【风管宽度方向—均匀布置3点采样】。周，期、采？样次数按预先—制定的评价》方，案执行采样过程中】不能：中断微生物气—溶胶的发生采样【结束后才能停止【发，生，。微生物？气溶胶此后喷雾器中！必须尚存不》少于：一半的微生物溶液且！需，对剩余菌《液活性进《行涂：布法验证以修正菌】液，浓度： 《。。 ， 5  培养—将采：好的平皿立即—盖上：盖细菌类《在(35～37)】℃培养(1～2)d！结核菌培养3周【真菌在28》℃培养3d上述培】养时间可根》据所：采样微？生物特性而》适当调整培养—。的过程？中应：定期观察培养箱内】。菌落的生长情况避免！培养箱？内干燥菌落不生【长或培养《皿内菌？落过多充分生—长汇合等情况的发生！ 《 6  》计数：可以目测、电子【显微镜、菌落计【数，器等对采《集，到且培养《好的菌落进》行计数当采到的菌落！很多时在它》们未生长汇》。合前用显微镜及早】观察将平皿划—。成许多相等的—部分：。抽出一部分数—菌然：。后乘以所划份数即可！得出：每皿：。总菌：数计数？完毕后可《根，据式(F．1．3】1)计算浓度 】 】 》 ： 8： ， 消毒灭菌实验【。结束后需对剩余菌】液以及所《用各：种仪器、设》备、平皿《等进行消毒灭菌【、酒：。。精擦洗处理 — F—．1．4  在进】行，洁净室生物》学评：价时：应符合以《下要：求 》 1 《 ，正式：试验前应进行预备】。试验并？。对各种仪器进—行调试和标定— 《 2  应—进行阳？性对照试验 ！ 3  应进行阴！性对：照，试验：。 》 4  应》在阳性试《。验中长菌阴性试验组！不，长菌 — 5  实验【过程中？应注意实验人员【的安全？防护实验结束—后应做？好各种仪器、设【备、衣物等的消毒灭！菌处理 — ： 6  试验结束】后需对微生物—气溶胶发生》器，内，的剩余？。菌液活性进》行涂布法验》证修正式《(F．？1．33)中的【菌液浓度 】 7  采样周期！应设计？合理当确定采样周期！存在：一定困难时宜增加采！样次数每次采样【。使用不同《的，采，样，周期 ？ ，