？ 附录？F  洁净室生物】学评价方法 — 》 ：。 F．1  【回、排？风高效过滤风—。口微生？物透：过率 ？ ：。 《 F．1．1  】仪器设备和材料应符！合以下要求 ！ 1  仪—器设备 ！Φ9：0玻璃平皿(或【。塑料：平皿)； 】 空气微生物采】样器(固体撞击式采！样器、离心式采样器！、液体冲击式采样】器等均可使用—常用的为《安德逊(《And？ersen)—采，样器隶属于固体撞】击式采样器》)； ？ ， 微生物气】溶胶发生器(由气泵！、油水？分离器、流量—计、高效过滤—器、喷雾器、缓【冲，。。瓶等组？成)； — 各种玻—璃移液管、吸管、试！管、：容器瓶？。。等； 》 ： 计时？器(：如秒表)； 】 恒《温培养箱； 【 《洁净工作台； 】 高压蒸汽】消毒锅 ！2  材料》 胰蛋】白酶大豆琼》脂培：养基； — 生理盐水；】 7【。5％酒精；  ！。 菌《种(宜选用》毒性小或没有毒【性且便于区别大【气杂菌的特定菌种】常用的有枯》草芽：。孢杆菌、黏》质沙：雷氏菌、大肠噬菌体！等)； 》 ， ？采样介？质可选用硅酮类、石！油胨类、醇类、糖】。类、纤维《素类、蛋白类—、混：合类、组织培养【液等； ！套，筒(测定《回、：排风高效过滤风【口时需？要使用罩住整个入口！。使检漏范围》包括边？框，长度应使通过气流时！间，为0．5s～1【s见图F．1—．1) 》 ！ F．1．2  】透过率应按》以下方法《评价 ？ 在—。。回、排风高效过【滤风：口进风端加设套筒在！套筒口部发生—微生物气溶胶在过滤！器出风面用浮—游菌法采样》由回、？排风高效过滤风口】前后的微生物—气溶胶浓度可—计算得出微》生物：透过率 — F．1．3】  检测步骤应符】。合下列要《求 — 1  制定—方案明确《评，价，任务制定详》细的评？价方案？包，括确定微生物—。气溶胶、发生器所】需的菌？液浓：度，、洁净压《缩空气流《量确定在《回、排风《高效过？滤，风口出风端的微生】物采样周期、采【样次数等一般可根】据，回、排风高》。。效过：滤风：口的尘埃颗粒物过滤！效率进行计算— 《 2  实验准备！根据预先制定的评价！方案准备《所需材料、》仪器设备制》。作采样？培养皿？一般而言采》样细菌用营》养琼脂培养基采集真！菌用：。沙氏：或真菌？选择培养《基采样病毒用根【据，病毒特？性配制的《采样介质 【 ： 3  发生微生】物气溶胶将培育好】的高浓度微》。生物溶液一般—为(10《8～：1，010)cfu／】mL利用生理—盐水按1《0倍稀释《法逐次稀《释至需？要的低浓度(—步骤1确定的浓度)！然后由移液管、吸管！量取一定《容，。积的低浓度微—生物溶？液至气溶胶发生装】置的溶液瓶由—。微生：物气溶胶发生器【在回、排风》高效过滤风》。口的进风端将—微生：物溶液雾化发生【微生物气溶胶— ， 》。4  采样》对于回、《排风高效过滤风口】。可在其后《的出风管道中—采样：离排风高效过滤【风门的距离根—据实际工程而定【原则上出风后有所混！合能近则好采样【点沿风管宽度方向】均匀：布置3点采样周期、！采样次？数按预先制定—的评价方案执—行采样过程》。中不能中断微生物气！溶胶的发生采样结束！后才能？停止发生微生物【气溶胶此后喷雾【器中必须尚》存不少于一半的微】。生物：溶液且需对剩余【菌液活性进行涂【布法：验，证以修正菌液浓度 ！ 《 5  培养将采好！的平：。皿，立即盖上盖细—菌类在(3》5～37)℃培养(！1～2)《d结核菌《培养3周真菌在【28℃培养3d【上述培养时间可【根据所采样微生【物特性而适当调【整培养的过程中应定！。。期观察培养》箱内菌落《。的生长情况》。避，免培：养箱内干燥菌落不】生长或培养皿内菌】落过：多充分生长》汇合等情况的发生 ！。 6 【 计数可以目—测、电子显微镜、】菌落计数器等对采】集到且培养好的菌落！。进行计数当采—到的菌落《很多时在它们未生】长汇合前用》。显微镜及早》观察将平皿划成许多！相等的部分抽出一部！分数菌然后乘以所划！份数即可得出每皿】。总菌：数计：数完毕后可根—据式(F．1．【31)计算浓—度 【 】 8  消】毒灭菌实验结束后】。需对剩余菌液以【及所用？各种仪器、设备【、平皿？等进行？消毒灭菌《、酒精擦《洗处理 ！F，．1．4  在进】行洁净室生物学评价！时应符合以下要【求 1】  正？式试验前应》进行预备试验—并对各种仪器进行调！。。试，和，标定 ？ 2  应！进行阳性对照试【验 3 ！ 应：进行：阴性：对，照试验 】。 4  应在阳性试！。。验中长菌阴性试验组！不，。长，菌 —。 5  《。实验过程中应注意】。实，验人员的安》全防护实《验结束？后应：做好各种仪器、设备！、衣物等的消毒灭】菌处理 【 6  试验结】束后需对微生物【气溶胶发生器内的剩！余菌液？活性进？。行涂布法《验，证修：正式：(F．1．33)】中的：菌液浓度 【 7  采样周！期应设计合理当【确定采样周期存在】一定困？难时宜？增加采样次数—每次采样使用不【同的采样《周期 《