安全验证
? 附录?F  洁净室生物】学评价方法 — 》 :。 F.1  【回、排?风高效过滤风—。口微生?物透:过率 ? :。 《 F.1.1  】仪器设备和材料应符!合以下要求 ! 1  仪—器设备 !Φ9:0玻璃平皿(或【。塑料:平皿); 】 空气微生物采】样器(固体撞击式采!样器、离心式采样器!、液体冲击式采样】器等均可使用—常用的为《安德逊(《And?ersen)—采,样器隶属于固体撞】击式采样器》); ? , 微生物气】溶胶发生器(由气泵!、油水?分离器、流量—计、高效过滤—器、喷雾器、缓【冲,。。瓶等组?成); — 各种玻—璃移液管、吸管、试!管、:容器瓶?。。等; 》 : 计时?器(:如秒表); 】 恒《温培养箱; 【 《洁净工作台; 】 高压蒸汽】消毒锅 !2  材料》 胰蛋】白酶大豆琼》脂培:养基; — 生理盐水;】 7【。5%酒精;  !。 菌《种(宜选用》毒性小或没有毒【性且便于区别大【气杂菌的特定菌种】常用的有枯》草芽:。孢杆菌、黏》质沙:雷氏菌、大肠噬菌体!等); 》 , ?采样介?质可选用硅酮类、石!油胨类、醇类、糖】。类、纤维《素类、蛋白类—、混:合类、组织培养【液等; !套,筒(测定《回、:排风高效过滤风【口时需?要使用罩住整个入口!。使检漏范围》包括边?框,长度应使通过气流时!间,为0.5s~1【s见图F.1—.1) 》 ! F.1.2  】透过率应按》以下方法《评价 ? 在—。。回、排风高效过【滤风:口进风端加设套筒在!套筒口部发生—微生物气溶胶在过滤!器出风面用浮—游菌法采样》由回、?排风高效过滤风口】前后的微生物—气溶胶浓度可—计算得出微》生物:透过率 — F.1.3】  检测步骤应符】。合下列要《求 — 1  制定—方案明确《评,价,任务制定详》细的评?价方案?包,括确定微生物—。气溶胶、发生器所】需的菌?液浓:度,、洁净压《缩空气流《量确定在《回、排风《高效过?滤,风口出风端的微生】物采样周期、采【样次数等一般可根】据,回、排风高》。。效过:滤风:口的尘埃颗粒物过滤!效率进行计算— 《 2  实验准备!根据预先制定的评价!方案准备《所需材料、》仪器设备制》。作采样?培养皿?一般而言采》样细菌用营》养琼脂培养基采集真!菌用:。沙氏:或真菌?选择培养《基采样病毒用根【据,病毒特?性配制的《采样介质 【 : 3  发生微生】物气溶胶将培育好】的高浓度微》。生物溶液一般—为(10《8~:1,010)cfu/】mL利用生理—盐水按1《0倍稀释《法逐次稀《释至需?要的低浓度(—步骤1确定的浓度)!然后由移液管、吸管!量取一定《容,。积的低浓度微—生物溶?液至气溶胶发生装】置的溶液瓶由—。微生:物气溶胶发生器【在回、排风》高效过滤风》。口的进风端将—微生:物溶液雾化发生【微生物气溶胶— , 》。4  采样》对于回、《排风高效过滤风口】。可在其后《的出风管道中—采样:离排风高效过滤【风门的距离根—据实际工程而定【原则上出风后有所混!合能近则好采样【点沿风管宽度方向】均匀:布置3点采样周期、!采样次?数按预先制定—的评价方案执—行采样过程》。中不能中断微生物气!溶胶的发生采样结束!后才能?停止发生微生物【气溶胶此后喷雾【器中必须尚》存不少于一半的微】。生物:溶液且需对剩余【菌液活性进行涂【布法:验,证以修正菌液浓度 ! 《 5  培养将采好!的平:。皿,立即盖上盖细—菌类在(3》5~37)℃培养(!1~2)《d结核菌《培养3周真菌在【28℃培养3d【上述培养时间可【根据所采样微生【物特性而适当调【整培养的过程中应定!。。期观察培养》箱内菌落《。的生长情况》。避,免培:养箱内干燥菌落不】生长或培养皿内菌】落过:多充分生长》汇合等情况的发生 !。 6 【 计数可以目—测、电子显微镜、】菌落计数器等对采】集到且培养好的菌落!。进行计数当采—到的菌落《很多时在它们未生】长汇合前用》。显微镜及早》观察将平皿划成许多!相等的部分抽出一部!分数菌然后乘以所划!份数即可得出每皿】。总菌:数计:数完毕后可根—据式(F.1.【31)计算浓—度 【 】 8  消】毒灭菌实验结束后】。需对剩余菌液以【及所用?各种仪器、设备【、平皿?等进行?消毒灭菌《、酒精擦《洗处理 !F,.1.4  在进】行洁净室生物学评价!时应符合以下要【求 1】  正?式试验前应》进行预备试验—并对各种仪器进行调!。。试,和,标定 ? 2  应!进行阳性对照试【验 3 ! 应:进行:阴性:对,照试验 】。 4  应在阳性试!。。验中长菌阴性试验组!不,。长,菌 —。 5  《。实验过程中应注意】。实,验人员的安》全防护实《验结束?后应:做好各种仪器、设备!、衣物等的消毒灭】菌处理 【 6  试验结】束后需对微生物【气溶胶发生器内的剩!余菌液?活性进?。行涂布法《验,证修:正式:(F.1.33)】中的:菌液浓度 【 7  采样周!期应设计合理当【确定采样周期存在】一定困?难时宜?增加采样次数—每次采样使用不【同的采样《周期 《