附录《B(规范性》附,录) 脊《髓灰质炎病毒—灭活:试验
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B.1 】试验原?理
! 将规—定感染滴度的脊髓灰!质炎病毒《悬液以一定比例与】酸性电解水混—合作用至规定的时】间后加入中和剂终止!酸性电解水的灭活】作用接种细胞进【。行残留病毒感染【滴度测定《然后与阳性对照组的!病毒感?染滴度进行比较【以确定其对病毒的】灭活:效果:
》
B.2 灭!活试验方法》
《。
》 脊髓灰质炎病!毒,(Ⅰ型疫苗》株)悬液《的,制备按?消毒技术规》范(2?002年《版)进行《
【
B.3《 脊髓灰质—。炎病毒?灭活试验操作步【骤
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B.3—.1: :取脊髓灰质炎病【。毒,液,0.05mL加到】无菌试管《中再加?入0.05mL有】机干:扰物然?后加入?4.:9mL酸性电解水混!匀于20℃水域中】作用至规定时间
!
《B.3?.2 取》0.1mL病—毒与酸性《电解水混《合液加?。入到含0.》9mL中和剂—的试:管,中振:打混合后取样按消毒!技术规范(200】2年:版)2.1.1.1!0,.4所示方法检测】残留脊髓灰质炎【病毒滴度
】
B.3.3 !阳性对照《用细胞维持》液代替酸性电—解水其余步骤与试验!组相同
—。。
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B.《3.4 《 阴性对照用不【含,脊髓灰质炎病毒的】完全培养《。基作为阴性对照以观!察培养基无污染细】胞是否生长良好【
?。
B.》3.5 《 试验重复3—次
?
,
B.3.6】 根据《。各组的?。平,均,。病毒感染滴》度(TCID50)!。分别计算其对病毒的!灭活对数《值
】
B.?。4 评《价,规定
】
《 , ,对脊髓?灰质:。炎病毒?在,3次试?验中阳性对照组病】毒对数?值为5~7灭活对数!值≥4.00判为】消毒合?格
】
B.5 注意】事项
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B.5.1! 对有机干扰【物的要求《与A.?2.5.2相—。同
?
B》。。.5.?2 在病毒灭活试!。。验,中每次?均应设置阳性对照】
B.5!。.3 脊髓灰【。质炎病毒灭活试验】操作应?在生物安全Ⅱ级【。以上实验室内进【行,避,免造成操作人员实验!室,感染和对环》境污染
—。
B.5.【。4 操作人—员应具有基本—的病毒学《实验工作经验量【。使用移液器与无菌】一次性吸头
【