， 附录B《（规范性附录—） 脊？。髓灰质炎病毒—。灭活试？验 ？ ？ ， ：B.1  试验原理！ 》 ：     》将规：定感染？滴度的？脊髓灰质炎病毒悬】液以一定比例—与，酸性电解水混合作】用至规定的时间【。后加入中和剂—终止酸？性电解水的灭活【作用接种细胞进【。行残留病毒感染滴】度测定然后与阳性】。对照组的病毒感染】滴度进行比较以确】定其对病毒的灭活效！果， 》。 B.2  灭！活试验方法 】   【  脊髓灰》。质炎病毒（Ⅰ型疫】苗株）悬《。液的制备《按消毒技《术规：范（2002年版）！进，。行 ！B.3  》脊髓灰质炎病毒灭活！试验操作步》骤 ！B.：3.1？  ：取脊髓？灰质炎病毒》液0：.05mL》加到：无，。菌试管中再加—入0：.05m《L有机干扰物然【后加：入4.9《。mL酸性电解水混】匀于20℃》水域中作用至规定】时间 】B.3.2 — 取0.1m—L病毒与酸性电解水！混合：液加入到《。含0.9mL—中和剂的试管中【。振打混？合后取样按消毒技术！规范（？2，00：2年版）2.—1.1.10—.4所示《方法：检测：残留脊髓《灰质炎病毒》滴度： B.3！.3  阳性对照】用，细胞维持液代替酸】性电：解水其余步骤与试验！组相同 — B.3.4 ！ 阴性对照用不【含脊髓？灰质炎病毒的—。完全培养基作—为阴性对照以观【察培养？。。基无：污染细胞是否生长】良好 》 ， B.3.5【  试验重复3【次 B】.3.？6  根《据各组的平》均病毒感染滴度【（TCID》50）分别计—算其对？病毒的？灭活：对数值 《 【B，。.4  评价—规定 】     对【。脊，髓灰质炎病》毒在3次试》验中阳性对照组【。病毒对数值为—5～7灭活对数值≥！4.0？0判为消《毒，。合格 —。 ， ， ， B.？5  注《意事项 【 ？ B.5.1  对！有机干？。。扰物的？要求与A.2.【5.：。2相：同 B.！5.2？  在病《毒，灭活试验《中每次均应设置阳性！对，照， ， ： B.5.3】  脊髓灰质—炎病毒灭《活，试验操作《应在：生物安全Ⅱ级以【上，实验：室内进行避》。免造成操作人员【实验：。室感染和《对，环境污染 【 B.》5.4  》操作人？员应：具有基？本的病毒学实验工】。作经验量《使用移液器与无菌】一次性吸头 — ，