附录B》(规范性附》录) 脊髓灰质炎病!毒灭活试验
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B.【1 试验原理【
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》 将规定感染—滴,度,的脊:髓灰质炎病毒悬液】以,。一定比例与酸性电解!水,混合作?用至规定的时间【后,。。。加入中?和剂终止酸性电解】水的灭活作用接种】细胞进行残》留病毒感《染滴度测定然后【与阳性对照组的病】毒感染滴度进行比较!。以确定其对病毒的灭!活效果
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B.2 灭活】试验方?法
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》 :脊髓灰?质炎病毒(Ⅰ型疫苗!。株):悬液的制备按消【毒技术?规,范(2002年版)!进行
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B.3 脊!髓,灰质炎病毒》灭活试验操》作步骤
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B.3.!1 : 取:脊髓灰质炎病毒【液0.05mL【加,到,无菌:试管中?再加入0《.,05mL有机—干扰物然后加入4】.9:mL酸?性,。电解水混《匀于20℃水域【中作用至规定时间
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B.3.!2 取0.1m】L病毒?与酸性电解水混【合液加入《到含0.9mL【。中和:。剂的:试,管中振?打混合后取样按【消毒技?术,规,范(2002年【版):2.1.1.1【。0.:4所示方法检—测残留脊髓灰—质炎病毒滴度
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》B.3.3 【阳性对?照用细胞维持—液代替?酸性电解水其余【步,。骤与试验组相同【
—。。B.3.4 阴】性对照用《不含脊?。髓,灰质炎病毒的完全】培,。养基作?为阴性对照以观察】培养基无污染细胞】是否生长良》好,
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B.3.5 【 试验重复3—次
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B.3.6 【 根:据各:组的平均病》毒感:染滴度(TCI【D50)《分别计?算其对病毒的灭活对!数值
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》。B.:4, :评价规?定
! 对脊—髓灰质炎病毒在3次!试验中?阳性对照《组病毒对数》值为5~《7灭活对数值—≥4.00判为消】毒合格
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B.》。5 ?注意事?项
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B.】5.1 对有机】干扰物的要求与A】.2:.5:.2相同
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B.—5.2 在病毒】灭活试验中每次均】应设置阳性对照
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B.5.!3, :脊髓灰质炎病毒【灭活:。试验操作应在生物安!。全Ⅱ级以上实验室】内进行避免造成操作!人员实验室感染【和对环?境污染
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B.5.4— , 操作人员》应具有基本的病毒】学实验工作经—验量使用移液器与】无菌一次性吸头
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