附？录A：（规范性附录） 细！菌定量？杀灭：试验 ？ ？ A》.1  试验—原理 — ，     将】规定浓度的细菌悬】液以一定比例—与酸性电解水混合】作用至规《定，。的时间后加入中和】剂终止酸性电—解水：的杀菌活性进行活菌！计数：然后：。与阳性对照组细菌】悬，液中的菌落数进行】比较：以确：定其杀菌《效果 ？ A.！2 ： 悬液定量》杀菌试？验 ： 【A.：。2.1  》菌悬液？的制：备， A.2！.1.？1  按消毒技术】。规范（200—2年版）要求—将细菌繁殖》体和枯草杆》菌黑色变种芽孢制】成2×109C【FU/mL》～9×？。109CFU/【mL：的试验？用，菌悬液 》 ？ A.2《.1：.2  按消毒技】术规范（2002】年版）要求将—白，色念珠菌《制，成2×？108CFU/m】L～9×108C】F，U/mL的试验用菌！悬液 【。 A：.2.2  —。。悬，液定量杀菌》试验操作程序 【 A.2】.2.1《  ：开启生成器待—产，生的酸？性电解水中》有效成分《处于稳定状态时用】250mL磨口锥形！。瓶接取满瓶后盖好瓶！盖置20℃±1【℃水浴备用 】。 A.》2.：2.2  取消毒试！验，用无菌大《试，管先加入0.0【。5mL试验》用菌液再加入—0.05m》L有机干扰物质混匀！置20℃《±1℃水浴中—5m：i，n后用？无菌吸管吸取酸【性电解水9.9【mL注？入其中迅《速混匀并立即—计时 A！.2.2.3  待！试，验菌与消毒》剂相互作用至各预定！。时间分别吸取0.】5，mL试验菌与酸性电！解水的混合液加于含！4，.，5，mL中和剂（0.】1，％硫代硫酸钠、0.！1，％吐温80》的，生理盐？水）的试管中—混匀作用10min！后分别吸取1—.0m？。L样液按活菌培养】计数方法测》定存活菌数每管【样液接种2个—平，。皿如平板上》生长的菌落数—较多时可进行系列】10倍？稀释后再进行活菌培！。养计数 】 A：.2.2.4— ， 同时用《标准硬水代替酸【性电解水进行—平行试验作为阳【性对照？ 《 A.《2.2.5  所有！试验样？本均在37℃—温，箱中：。。培养对细菌繁殖体培！养48？h观察最终结果；】对细菌芽孢》和，白色念珠《。菌需培养7》2h观察最终结果】 A.】2.2.6 — 试验重复》3次（？包括对照《），计算各组的活菌浓度！（C：FU/？mL）并《换算：为对：数值：。（N）然后》按式（A.1）【计算杀？。灭对数值 】 ：A.2.《3  杀灭对数值的！计算： —    计算各组】的活菌？浓度（CF》U，/mL？），并换：。算为对数值（N）然！后按式（A.1）】计算杀灭对数值【。 KL】 ，= N0 - Nx！        】  ……《………？……………（A.】1） 【     式中【  【   KL杀—灭对数？值；：  【   N0对照【组平均？活菌：浓度：的对数？值；  ！   N《x试验组活菌浓度】对数值 《 ，   —  计算杀灭对【数值时取小数点后两！位值：可以：进，行数字？修约但？是如果？消毒试验《组消毒处理后平均生！长，。菌落数小于1CFU！杀灭对数值即大【于，或，等于对照《组平均活菌浓度的】。对数值KL≥—l，g（N0） ！ A.2》.4 ？ 评价规定 】     【取酸性电解水—原液与3个》作用时间重复试【验3次在最短—作用时间以及最短作！用时间的1.—5倍时对大肠杆菌】、金：黄色葡萄球菌—、铜绿假《单胞菌、枯》草杆菌黑色》变种芽孢各次—试验的杀《灭对数？。值均≥5.00【对白色念珠菌各【次试验的杀》灭对：数值均？≥4.0《0判：定为消毒合格 】 A.2.5！  注意事项 ！ A《.2.5《.1  《试验中所使用的【中和剂？、稀释液和培养基等！各批次？均应进？行无菌检查发—现有菌生长则全部】试验需换用》未污染试剂或培养】。基重做 《 ： A.2.【。5.2  进—行细菌液定》量杀菌试验时对用于！清洗：物品的消毒》或用于？冲，洗浸：泡消毒有机干扰【物质采用0.3【％（3g/L—）牛血清《白，蛋白：对未清洗的物品或】有机物较多的物【品的消毒有机干扰物！采用：3％（？30g/L）牛血】清白蛋白 —