附录《A，（规范性附录） 细！菌定：量杀灭试验》。 《 《A.1  试验【原理： ： ？     【将规定浓《度，的细菌悬液以—一定比例与酸性【电，解水混合作用至规】定的时？间后加入《中和剂？终止酸性电解水的杀！菌活性进《行活菌？计数然？后与：阳性对照组细菌悬】液中的菌落数—进行比较以确—定其杀菌效果 ！ A.2】 ， ，。悬液定量杀》菌试验 【。 ： A.2.1【  ：菌悬液的制备— A【.2.？。1.：1  按消毒—技术规范（2—00：2年版）要》求将细菌繁殖—体和：枯草杆菌黑色变种芽！孢制成2×109C！FU/mL～—9，×，109C《FU/mL的试验用！菌悬：液 A】.2.1.》2  按消毒技术】规，范（2？002？年版：）要求将白》色念珠？菌制成2×》108CFU/m】L～9×10—8CFU/mL的试！。。验用菌悬液 【 A.—2.2  悬—液定量杀《菌，试验操作程序 【 》A.2.2》。.1  开启生成器！待产生的酸性电【解水中有效成分处于！稳，定状态时《用250mL磨口锥！形瓶接取《满瓶后？盖，好瓶盖置20℃±1！℃水浴备用 ！ A.2.2【.2  取消毒试】验用无菌大试—管先加入0.05m！L试验用菌液—。。再加入？0.05mL有【机干扰物质混—。匀置2？0℃±1℃水浴中5！min后用无菌吸】管吸取酸性电解水】9.9mL》注入其中迅》速混匀并立即计时 ！ A.【2.2.《3  ？。待试验菌与消毒【剂，相互作用至各—预定时间《。。分别吸取《。0.5mL》试验菌与《酸性电解水的混合液！。加于含？4.5mL中和剂（！。0.1％硫代—硫酸钠、0.1【。％吐温80的—生理：盐水）的试管中【混匀作？用10min后分别！吸取1.《0mL样液按活菌培！养计数？方法测定存》活菌数每《管样液接种2个平皿！如平板？上生长？的菌落数较》多时可进行系—列10倍稀释后【再，进行活菌《培养计？数 ：。 A.2.！2.4  同时用标！准硬水代替酸性【电，解水进行平》行试验？作为阳性对照 】 A》.2.2.5  所！有试验样《本均在37℃温箱】中，培养对细菌繁殖【体培养48h观察】。最终：结果；？对，细，菌芽孢和《白色念珠菌需—培养72《h观察最终结果 ！。 ，。 A《.2.2《.6  试验—重复3次（包括【对照）计算》各组：的活菌浓度》。（CFU/m—L）：。并换：算为对？。数，值（N）然后按式】（A.1）计—算杀灭对数值 ！ ， ：A.2.3 — 杀灭对数值—的计算 》 《    计算各【组的：活，菌浓度（CFU/】mL）？并换算为《对数值（N）然后按！式（A.1）—计算杀灭对数值 ！ K》L = N0 - ！Nx  《        】……：……………………（！A.1） —   —  式中 — ，     K】L，杀，灭对数值； 【 ， ：     N0对】照组平均活菌浓度】。的对数值； ！     Nx试！验组活？菌浓度对数值 【    】 ，计算杀灭对数值时取！小数：。点后两位值可—以进行数字修约【但是：如果消？毒试验组《消毒：处理后平均生长菌】。落数小于1C—FU杀灭对数值即大！于或等于《。对照组平《均活菌浓度》。的对数值K》L≥lg（N0【） ？ A.—2.4  》。评价规定 》 《     取—酸性电解水原液与3！个作用时间重—。复，试验：3次在最短》作用时间以及最【短作：用时间的1.—5倍时对大》。肠杆菌、金黄色葡】萄球菌、铜绿假单胞！菌、枯草《杆菌黑色变种芽【孢各次试验的杀灭】对数值均≥5.0】0，对白色念珠》菌各次试验的杀灭对！数值均≥《。4.00《判定为消《毒合格？ ， ， A.2【.5 ？ 注意事项 【。。 ？ A.2.》5.1 《 试验中所使用的】中和：剂、稀释液和培【养基等各批次均应】进，行，无菌：检查发？现有菌生长则全部试！验需换用《未，污染试剂或培—养基：重做 — A.2.5.】2  进行细—菌液定量杀菌试验】时对用于清洗物品的！消毒或用于》冲，洗浸泡消毒有机干】扰，物质采用0》.3％（3g/【。L）牛？血清白蛋白对未清洗！的物品或有机物较】多的物品的消毒有机！干扰物采用》3％（30g/L）！牛血清白蛋》白 ？