附录A（规【范性附录）》 细菌定量杀灭【试验 】 A.1  试】验原理 》    ！ 将规定浓度的细菌！悬液以一定》比，例，与酸：性电解？水，混合作用至规定的时！间后加入中》和剂终止《酸，性电解水的》杀菌活性进行活菌】计，数然：后与阳性对照组细菌！。悬液中的菌落数进行！比，较以确定其杀菌【。效果： ： 《 A.《。2  ？悬液定量杀菌试验】 《 A.—2.1  》菌，悬液的制备 ！ A.2.1.】1  按消毒技术规！范，（2002年版）要！求将细？菌繁殖体和枯—草杆菌黑色变种【芽孢制？成2×109—CF：U/mL～9×10！9，CF：。U/mL的试—验用菌悬液》 —A.2.1.2【  按消毒技术规范！（2002年版【）要求将白色念珠】菌制成2×108C！FU/mL～9【×1：08CFU/—mL的试验用—菌，。悬液 ？ 《 A.2.2  】悬液定量杀菌试验操！作程序 ！A.2.2.—。1， ， 开启生成器待产生！的酸性电解水—中有效？成分处？于稳定？状态时用《250mL磨口锥形！瓶接取？满瓶后？盖好：瓶盖置20℃±1℃！水浴备用 — ？ A.2.2.2】  取消毒试验用】无菌大试管先—加入0.《0，5mL试验用菌液再！加入：0.05mL有机】干扰：物质混匀置20【℃±1℃《水浴中5min【后用无菌吸管吸取酸！性，电解水？9.9mL注入其中！迅，速混匀并立即—计时 A！.2.2《.3 ？ 待试验菌与—消，毒剂相互作用—至各预？定时间分《别吸取0《.5mL试验菌【与酸性电解水的混合！液加于？含4.5《m，L中和？。剂（0.1％—硫代硫酸钠、0.1！％吐：温80的生》理盐水）《的，试管中混匀作用1】0mi？n后分别吸取1【.0mL样液按活菌！培养计数方法测定】存活菌数每管—样液接种《2个：平皿如平板》上生长？的菌：落数较多时可—。进，行系列10倍稀释后！再，进行活菌培养计【。。数 【A.2.《2.4 《 同时用标准硬水】代替酸性电解水进】行平：行试：验作为阳《性对照 ！A.2.2》.5  《所有试验样本均【在37℃温》箱，中培养对细菌繁殖】体培养48h—。观察最终结果；对细！菌，芽孢和白色念珠【菌需培养72h【观察最终结果 ！ ： A：.2.2.6— ， 试验重复3次（】包，括，。对照）计《算，各组：的活菌浓度》（CFU/mL【）并换算为对—数值（N《）然后按《式（A.1）计算】杀灭对数值 — A—.2：.3  《杀灭对数值的计【算， —    计算—各组的活《菌，浓度（CF》U/mL）并换算为！对数：值（N）然后—按式：（A.？1）计算杀灭对【数值： ： ： KL = 【N0 -《。 N：x       】 ，  ：…………《。…………《…，…，（A.1）》 ， 》 ，   式中》 》     》。。KL杀灭《对数值？。； 》 ， ，    N》。0，对照组平均活菌浓度！的对数值《；， ， ， ，   》  Nx试验组活菌！浓度对数值 — 》    计算杀灭对！数，值时取小数点—。后两位值可以进行数！字修约但《是如果？消，。。毒试验组消毒处理】后平：均生长菌落数小【于1：CF：U杀：。。灭对数值即大于【或等于对照组—平均活菌浓度的对数！值KL≥lg—（N0）《 A.】2.4 《 评价规定 【。 ？。   ？  取酸性》电解水原液》与3个作用时间重】复试验3次在最短作！用，时间以及最短作用】时间的1.5倍时】对大肠？。杆，菌、金黄色葡萄球】。菌、铜绿假》单胞菌、枯草杆菌黑！色变种？芽孢各次试验的【杀灭对数值均—≥5.00对白色念！珠菌各次试验的杀灭！对数值均≥4.0】。0判定为消》毒合：格 A.！2.5  》注意事？项 — A.2.5.1】  试验中》所使：用的中？和剂、稀释液和培养！基，等各批次均应—进行无菌《检查：发现有？菌生长则全部试验】。需换用？未污染试《剂或培养基重—做 A.！2.5.2》  进行细菌液定】量杀菌试验时对用于！。清洗物品的》消毒或用《于冲洗浸泡消—。。毒有机干《扰，物质采？。用0：.3％（3g/L】）牛血？清白蛋白对未清洗】的物：品或有机物较多的物！品的消毒有机干扰】物采用3％（3【0g/L）牛血【清白蛋白 —