。 附录A（规范性！附录） 细菌定【量杀灭试验》 ， ， ， A—.1  试验原理 ！   ！  将规《定浓度的细菌悬液】以一定比例与酸性电！解水混合作》用至规定的时间后】加入中和《剂终止酸性电解水】的杀菌活性进行活】菌计数然后与—。阳性对？照组：细菌悬液中的—菌落数进行比—较以确定其杀—菌效果 — A.【2  ？悬液定量杀菌试验 ！ 》 A？.2.1  菌悬】液的制备 》 ： ？A.2.1》.1 ？ 按消毒《技术规范《（2002》年版）？要求将细菌》繁，殖，体和枯草杆》菌黑色变种》。芽孢制成2×1【0，9CFU/m—L，～，9×109CFU/！mL：的试验用菌》悬液 【 A.？。2.1.2  按消！毒技术规《范（20《02年版）要求【将白色念珠菌制【成2×？108CFU—/mL～9》×10？8CFU/mL【的，试验：用，菌悬液 《 ？ ， A.2.2—  悬液定量杀【菌，试验操作《。。程序 —。 ：A.：2.2.《1，  开启生成器待】产生：的酸性电解水—中有效成分处—于稳：定状态？时用25《。0，mL磨口锥》形瓶接取满瓶后盖】好瓶盖置20℃【±1℃水《浴备用 ！A.：2.2？.2  取》消毒试验用无菌大】试管先加入》0.05mL—试验用菌液再加【入0.05mL有】机干扰物质》混匀置20℃±【1℃水浴中5—min后用无菌吸】管吸取酸性电解水9！.9mL注入其中迅！速混匀并立即计时】 ？ A.》2.2.《3  待试验菌与消！毒剂相互《作用至各预定时【。。间分别吸取》0.5mL试验菌与！酸性电解水的混合】。液加于？。含，4.5mL中和剂（！0.1％《硫代硫酸钠、0.1！。％吐温80的生【理盐：水）的试《管中混？匀作用10mi【n后分别吸取1【.0m？。L样液按活菌—培养计数方法测定】。存活菌数《每管样？液接种2个》平皿：如平板上生长的【菌落数较多时可进行！系列1？0倍稀释后再进【。行活：菌培：养计：。数 A】.2.2.4 【 同时用标准—硬水代替《酸性电解水进行平】行试验作《为阳性对照 】 ： A.2.2.5】  所有试验样本】均，在37℃温》箱中培养对细菌繁】殖体：培养48h观察【最终：结，果；对细菌芽—孢和白？色，念珠菌需培》养72h观》察最终结《果 《。 ： ，A.2.2》.6  试验—重复3次（包括对照！）计算各组的活【菌浓度（C》。FU/m《L）并换《算为对数值（N）然！。后按式（A.1）计！算杀：灭对：数值 A！.2.3  杀【灭对数值的计—算 《 ？    计算—各组的活菌浓度（C！FU/mL）并【换算为对数值—（N）然后》按式（A.1）计算！杀灭对数值 — KL 】。= N0 》- N？x ：  ：   ？    …》………？………？………（A》.1） 】。     》式中 》 ？    KL杀灭】对数值； 【 ， ，    《 ，N，0对照组平均活【菌浓度的对数值； ！。。 《   ？  Nx《试验组活菌浓度对数！。。值，  【   计算杀灭对数！值时取小数点后两位！。值可以进行数字【修约但是如果消毒】试验组消毒》处理后平均生—长菌落数小于1CF！U杀灭对数值—即大：于或等于对照组【平均活？菌浓度的对数值K】L，≥lg（N》0） A！.2.4  评价】规定 《    【 ，取酸性电解水—原液与3个作用时间！重复试验3次在【最短作用《时间：以，及最短作用时间的1！.，5倍时对大肠杆菌】、金黄色《葡萄球菌、》铜绿假单胞菌、枯】草杆菌黑色变种芽孢！各次试验的杀灭对】数值均≥5.—00对白《色念珠菌各次试【。验的杀？灭对数值均≥—4.00判定为【消毒：合格 》 A.》2.：5  注意事—项 ： ： A.2.5】.1  试》。验中所使用的—中和剂？、稀释液和培养基等！。。各，批次均应进行—无菌检查《发现有菌生长—则全部试验需—换用未污《。染，试剂或培养基—重做 A！.2.5《.2  进行细菌液！定量杀菌试》验，时，对用于清洗物品的】。。消毒或用《于冲洗浸《泡消毒？有机：干扰：物质采用0》.3％（3g/L】）牛血清白蛋白【对未清？洗的物？品或有机《物较多的物品的消毒！有机干扰《物采用3％（30g！/L）牛血清白【蛋白 《