附录A（规范性！附录） 灭菌—效果：检测方法 】 ： A.1  【方法原理 》。 【    本试—验以常见的硬—式镜不？锈，钢材料管腔、软式】镜，聚四氟乙烯材料管腔！为模：拟管腔验《证微生物的灭菌效果！本试验应采用两端】。。开口的？无缝测试管腔如【有接缝则应保证气密！。性在管腔中央—放置染有细菌—芽孢的载体》通过半？周期灭菌循环无【菌生长以嗜热脂【肪，杆菌芽孢为指标菌同！时，。进行：微生物灭菌效—。果评：价所有试验均—为阴性培养结果则判！定结果合《格 《。 ， A.2  ！生，物指：示物 《   】  嗜热脂肪—杆菌芽孢（》ATCC7953】） 】 A.3  验证】器材 ？ 《 A.3.1 ！ 载：体，将芽孢液均匀涂布】在直径为0》.4mm《、长度为20mm】～30mm不锈钢检！测，材，质上以染菌后不【堵，塞管腔为限嗜热【脂肪杆菌芽孢—阳性回？收菌量应为1×【10：。6CFU/载—体～5×106C】FU/载体室温【下自然干燥后再使】。用 》 A.《。3.2 《 ，检，测管腔？。本试验？宜采用两端开口【的无缝测试管腔如】有接缝则应保—证气密性 】 ， A.3.3  】不锈钢？。材质无接缝管—腔，10根 ！A.3.4  【聚四氟？。乙烯无接缝管腔【10：根 ： A.3】.5  嗜》热脂肪杆菌芽孢【的，TSB培《养基干粉胰蛋—白，胨，17.0g》植物蛋白《胨3.0《g氯化钠5.0g磷！酸氢二钾2.5【g葡萄糖2.5【g共30g溶于1】L，蒸馏水？中制成胰《蛋白胨大豆肉汤（】TSB）培养基 ！ 》 A.4 》 操作步《骤 — A.4—.1：  将染菌的—载体送达不锈钢管】腔的正？中，央制作？10根？测试：样本将10根测试】样本均？匀平行摆放在器【械盒：内，用双：层，无纺布包裹》放置在灭菌舱内【灭菌舱内如》仅一层？隔架则10根样本平！。行摆放在器械盒内】放置在？灭，菌舱中央（见—图A.1）；若灭菌！舱内可摆放上—下两层隔架则将1】0根：样本均匀摆放在【两个：器，械，盒内分别放》置在：。灭菌舱？内上下两层隔架中】央（见图《A，.，2） 【   ！  按？。照消毒技术规范（】20：02：版）中的灭菌操【作步骤进《行半周期灭菌灭【菌结束后以无菌操作！。取出细菌芽孢载【体均放到T》SB培养《基中：56℃培养4—8h观察培养—结，果如无细菌生—长则继续培》养至7d培养结果仍！无，。细菌生长则判—断，为阴性 — A.4.2 ！ ，将染：菌的体用细丝送达聚！四，氟乙：烯管腔的正中间【制作1？0根测试样本将1】0根测试样本均匀平！行，摆放在器械盒内用】双层无纺布包裹【放置在灭《。菌舱内灭菌舱内如】仅一层隔架则10根！样本平？行，摆放在？器械盒内放置在灭菌！舱中央（见图A.】3）；若灭菌舱【内可摆放上下—两，层隔：架则将1《0根样本均匀—摆放在两个器械【盒内分别放置在灭】菌舱内？上下两层《隔架中央（见—图A.4）》 ： — ，     按】照消毒技术规范【（2002年版）】。中的：灭菌操作步》骤进：行半周期《灭菌灭菌结束后【取出细？菌芽：孢载体全《。部放：到TSB培养基【中56℃《培养48h观察培】养结果如无细菌【。生长则继《续培养至7》d培养结果仍无【细菌生长则判定阴性！ 】A，.5  结》。果计算 —   【 ， ，嗜，热脂肪杆《菌芽孢重复以—。上两种材质》的模：拟管腔？微生物测试各—重复5？次 《 ， ？ A.6  结果】判，定 ： 【    测试—结果均无细》菌生长为阴性则判定！无菌合格 —