， 附录A《（规范性附录）【 ，灭菌效果检》测方法 》 《 A？.1：  方法原理 】。。   】  本试验以常见】的硬式镜不》锈钢材料管腔、【软式镜聚四》氟乙烯材料》管腔为模《拟管腔？验证微生物的灭【菌效果本试验—应采用两《端开口？的无缝测试管—腔如有接缝》则应保证《。气密：性，在管腔中央放置【染有细菌《芽孢的载体通过【半周期灭菌循—环无：菌生长以嗜》热脂肪杆菌芽—孢为指标菌同时进行！微生物灭菌效—果评价？所有试验《均为阴性培养结果】。则判：定，结果合格《 ？。 A.2】  生物指示物 ！ 《    》 嗜热？脂肪杆菌芽孢—（A：TCC7《953） ！ ？A.3 《 验证器材 ！。 《A，。。.3.1 》 载：体，将芽孢液均》匀涂布在直径为0.！4，mm、长度为—20mm～30mm！。不锈钢检测材质上】以染菌后不堵塞管腔！为限嗜热脂肪—杆菌：芽，孢，阳性：回收菌量《应为：1×1？06CFU/载【体，～，5，×106《CFU/载体室温】下自然干燥后—再使：用 《 A.3—.2 ？。 检测管腔本试【。验宜：采用两端开口—的无：缝，测试管腔《如有接缝则应保证】气密性 【 A.3.3 】 不锈钢材质—无接：缝管腔10根 【 ： A.3.4】  聚四氟乙烯【无，接缝管？腔10根 【 A.3—.，5  嗜热脂肪【杆菌芽？孢的TSB培养基】干粉胰蛋《白，胨17.0g植【物蛋白胨3.0【g氯化？钠5.0g磷酸氢】二，钾2：.5g葡萄糖2【.5g共30g【溶于：1L蒸馏水》中制成胰蛋白胨大豆！肉汤（TS》B）培养基 ！。 A.4  ！操作步？骤 》 A.4.】1  将染》菌的载体送达不锈】钢管腔？的，。正中央制作10根测！。试，样本将10根测试样！本均匀平行摆放【在器械盒内用双层】无纺布包裹放置在灭！菌舱内灭菌舱—内如仅？一层：。隔架则1《0根样本平行摆【放在器械《盒内放置在灭菌舱】中央（见图A.【1）；？若灭菌舱内》可摆放上下两层隔架！。则将：10根样本均匀【摆放在两个器—械盒内？分别放置在灭—菌舱内上下两—层隔架中央（见【图，A.2） 》 ？ —     按【照消毒技术》规范（2002【版）中的《灭菌操作步骤进行】。半周期？灭菌灭菌结束后以无！菌操作取出细菌芽孢！载体：均放到TSB培养基！中56℃培养—48：h观察培养结果如】无细菌生长》则继：续培养至7d培养】结果仍无细菌生【长，则判：断为：阴性 《 ， A.4.2】 ， 将染菌《的体用细丝送达【聚四：氟，。乙烯管腔的正中间】制，。作10根测试—样本将？10根测试样本均】匀平行摆放在器械盒！。。内用双层无纺布【。包裹放置在灭—。菌舱内灭菌舱内如】仅一：层，隔架则？10根样本》平，行摆放在《器械盒内放置在灭】菌舱中央《（见图A《。.3）？；若灭？菌舱内可《摆放上下两层隔架则！将1：0根样本《均匀：。摆放在两个器械盒】内分别放置在灭菌】舱内上？下两层隔架中央【（见图A.4—） — 《    — 按：照消毒技术规范（】2002年版—）中的灭《菌操：作步骤进行半—周期灭？菌灭：菌结束后取》。。出细：菌，芽孢载体全部—放，到TS？B培养基中56【℃培养48h观察培！养结：。果如无细《。菌生长则继续培养】至7d培养结—果仍无细《菌生长则判定阴性 ！ 【A.：5  结《果计算 》 《     —。嗜热脂肪《杆，。菌芽孢重复以上【。两种材质的模拟管】腔微生物测试各【重复5次 ！ ， A.《6，  结？。果判定 ！ ，     测—。。试结果均无细—菌生长为《阴性则判《定无：菌合：格 ？