， 附录A（规范【。性，附录：） 灭？菌效：果检测方法 【。 《。 A.1  【。方法原？理 】。     本试【验以常？见，的硬式镜《不锈钢材料管—。。腔、软式镜》。聚四氟乙烯》材料管腔为》模拟：管腔验证《微生：物的：。灭菌效果本试验应采！用两端开口的无缝】测，试管腔如有接缝则应！保证：气密性在管腔中央】放置染有细菌—芽，孢的载体《通过半周《。期灭菌循环》无菌生？长以嗜热脂肪杆菌芽！孢，为指标菌同》时进行？微生物灭菌效果【评价：所有试验均为阴性培！养结果？则判定结果合—格，。 【 A.2 》 ，生物指示物 【  【   嗜热脂肪杆菌！芽孢（？ATCC795【3）：。 【 ，A.：3  验证器材 ！ A【.3.1  载体将！芽孢液均匀涂—。。布在：。直径为0《.4：。mm、？。长度为20mm～3！0mm不锈钢检【。测材：质上以染菌后不【堵塞管？腔为限嗜热脂肪【。杆菌：芽孢阳性回收菌【量应为1×10【6CFU/载体～】5×1？06CF《。U/：载体：室温下？自然：干燥后再使用 ！ ？A.3.《2  检测管腔本试！验宜采？用两：端开：口的无缝测试—管腔如有接缝则应保！。证气：密性 ？。 《 A.3.3 【。 不锈钢材质—无接缝管腔10【根 A.！3.4？  聚四《氟乙烯无《接，缝管腔10根—。 ， A.3】.5  嗜热脂【肪杆菌芽孢》的，TSB培养基干粉】胰，蛋白胨17.0g】植物蛋白胨3.0】g氯化？钠5.0g磷酸【氢二钾2.》5g葡萄糖2.【5g共30g—溶于1L蒸馏水中制！成胰蛋白《胨大豆肉汤（T【SB）培养基 【。。 《 A.4 【 操作步《骤 — A《.4.1《  将染《菌的载？体送达不锈钢管腔的！正中央制作10【根测试样本》将，10根测试样本【均匀平行摆放在器械！盒，内用双层《无纺布包裹》。放置在灭菌舱内【灭，。菌舱内如《仅，。一层隔架则10根样！本平行摆《放在器械盒内放置】。。在灭菌舱中央（见】图A.1）；若【灭菌舱内可摆—放，上下两层隔架—则将10根》样本均匀《摆放在？两，个，器械盒内分别—放置在？灭菌舱内上下两层】隔架中央（见图A.！2，） 】  —   按照消毒技】术规范（200【2版）中的》灭菌操作步》骤进行半周期灭菌灭！菌结束后以无—菌操作取出细菌芽孢！载体均放到TSB】。。培养基中5》6℃培？养48h观察—培养结果如无细菌生！长则继续培》养至7d《培养：。结果仍无细菌生长则！判断为阴性 】 A.4.2 ！。 将染？菌的体用细丝送【。达聚四？氟乙烯管腔的正中】间，制作10根测试样】本，将10根测》试样本均匀平行摆放！在器：械盒内？用双层无纺布—。包裹放置在》灭菌舱内灭》菌舱内如仅一层隔架！。则10根样本—平行摆？放在器械盒内—放置在灭菌》舱中央（见图A.】。3）；若灭》菌，。舱内可摆放上下两】层隔架则将1—0根样本均匀摆放】在，两个器械盒内分别放！置在灭菌舱内—上下两层隔架中【央（见？图A.4） 】 《 》    按照消毒】技术规范（200】2年版）中的灭菌操！作步骤进行半周期】灭菌灭菌结》束后取出细菌—。芽孢：载体全？部放到TS》B培养基中56℃培！养48h观察培【养，结果如无细菌生长】则，继续培养至7—d培养？结果仍无细菌生长】则判定阴性 】。 A.5】  结果计算—。  ！   嗜热》脂肪杆菌芽孢—重复以上两种材【质的：模拟管腔微生—物测试各重复5次】 — A.6  【。结果判？定 ：  】   ？测试结果均无细【菌生长为阴性则判定！无菌：合格 《