。 附录《A（规？范性：附录） 灭菌效【果检测方法》 《 A》.1  方法原理】  ！   ？本试验？以常见的硬式镜不锈！钢材料管腔、软式镜！聚四氟乙《。烯材：料管腔？为模拟管腔验证微】生物的灭菌效果本】试验应采用两—端开口的无缝—测试：管腔如？有接缝则应》保证气密性在管【腔，中央放置染有细【菌芽孢的载体通【过半周期灭菌—循环无菌《生长以嗜热脂肪【杆菌芽孢为指标【菌同时进《行微生物《灭，菌，效果：评价：所有试？验均为阴性》。培养结果则》判定：结果合格 【 ？ ：A.：2，  ：生，物指示物 》 【    嗜热脂肪杆！菌，芽孢（？A，。TCC795—。3） ？ — A.3  验【证器：材 《 A—.3.1 》 载体将芽》孢液均匀《涂布：在直径为0.4m】m、长度为20mm！～，30mm不》锈钢检？测材质上以染—菌，。后不堵塞管腔—为，限嗜热脂肪》杆菌芽孢阳性回收】菌量应为1×—106C《FU/载《体～5×106C】FU/载体室温下自！然干燥后再使用 】 ？。 A.3.2  ！检，测管腔本试》验宜：。采用两端开口的无缝！测试：管腔如？有接缝则应保证气】。密性 】A.3.3 — 不锈钢材质无接】缝管腔10根 】 《A，.3.4《 ， 聚四氟乙》烯无接缝《管腔：1，0根 ？ 》A.3.《5  嗜《热脂肪杆菌芽孢的T！SB培？养基干粉胰蛋白【胨17.0》g植物蛋白胨—3.0g氯化钠【5.：0g磷酸《氢二钾？2.5g葡萄—糖2.5《g共30g溶于1】L蒸馏水中》制成胰？蛋白胨？大豆肉汤（TSB】），培养基 》 ？ A.4  】。操作步骤 【 A.4.！1  ？将染菌的《载体送达不锈钢【管腔：的正中央制作10】根测试样本将10】根测试样本均匀平】行摆放在器械盒【。内用双层无纺布【包裹放置在》灭菌舱内灭菌舱内如！仅一层隔架则10】根样本平行》摆放：在器械？。盒内放置《在灭菌舱《中央（见图》A.1）；若灭【菌舱内可摆放上【下两层隔架》则将10根样—本均：。匀摆放在《两个器械盒内分别放！置在灭菌舱内上下】两层：隔架中央（》见图A？.2：） ？ 《 ，    】 按照消《毒技术？规范（20》02版）《中的灭菌操作步骤进！行半周？。期灭菌灭菌结束后以！无菌操？作取出细《菌芽：孢载体均放到TSB！培，养基：中56℃《培养48h观—察培：养结：果如无细菌》生长则继续培养至】7，。d培养结果仍无【细菌生？长则判断为阴性 】 A.4.！2  将染菌的体】用，细，丝送达聚四氟乙【烯管腔的正》。中，间制作1《0根测试样本—将，10根测试样本均】。匀平行摆放在器械】盒内用？双层无纺布》包裹放置在灭—菌舱内灭菌舱内如】仅一层隔架》则，。10根样本平—行摆放在器械盒内放！置，在灭菌舱中央（【。见，图A.3）；若灭菌！舱内：可摆放上下两层【隔架则将《10根样本》均匀：摆放在两个器—械盒内分别放置在灭！菌舱内上下》两层隔架中央（见图！A.4） 】 —     按照消！毒，技术规范（200】2年版）中的—灭菌操作步骤—进行半？周期灭菌灭菌结束】后，取出细菌《芽，孢载体？全部放到《TS：B，培养：基中56℃培养4】8h：观察培养结果如无】。细菌生长《则继续培养至—7d培？养，结果仍无细菌生长】则判定阴性 【 ： A》.5  结》果计算 《  】   嗜热脂肪杆】菌芽孢重复以—上两种材质的模拟】管，腔微生物测试—各重复5次 ！ ，。 ： A.6  结果】判定 】     测试】结果均无细菌生【长为阴性则判定【无菌合格 —