， 附录A（规范性】附录） 《灭菌效果检测方法】 ：。 A.1！ ， 方法原理 【 ？  《  ：。 本试验以常—见的硬式镜不锈【钢材料管腔、—。软式镜聚四氟乙【烯材料管腔为模【拟管腔验证微生【物的灭菌效果本【。试验应采用》两端开口的无缝测试！。管腔：。如有接缝则应保证气！密性在管腔中央放】置，染有细菌芽孢的【载体：通过半周期灭菌循】环无菌生长以嗜【热脂肪杆菌芽孢为】指标菌？同时进行《微生物灭菌效果【评价所有试》验均为？阴性培养结果—则判定结果合格 】 — A.？2  ？生，。物，指示物 —   【 ， 嗜热脂肪杆菌芽孢！（ATCC7953！） 》 A.3 】 ，验证器？材 《 A.3】.1  载体将芽孢！。。液均：匀涂布在直》径为0.4》mm：、长度为《20：mm～30mm不】锈钢检？测，材质：上以：染菌后？。不堵塞管腔为限嗜热！脂肪杆？菌，芽孢阳性回收—菌量应为1×10】6C：FU/载体～5×】10：6，CFU/载体室温下！自然干燥后再使用】 ： ： A.3.2 】 检测管腔本—。。试验宜采用两端开】口的无缝测试—管腔如？有接缝则应保—证气密性 》。 A.【。3.3  不—锈钢材质无接缝【管腔1？0根： 》 A.3.4  聚！四氟乙烯无接—缝管腔10根— 》 A.3.5  嗜！热脂肪杆菌芽孢【的，TSB培养基干粉】胰蛋白胨17.0g！植物蛋白胨3—.，0g氯化钠5.【。0g磷酸氢二—钾2.5g葡萄【。糖，2.5g《共，30：g，溶于1？L蒸馏水中》。制成胰蛋《白胨大？豆肉汤？（TS？B）培养基》 ： 》 A.4 》。 操作步骤 —。 ， —A.4.1  【将染菌的载体送达不！锈钢管腔的正中央】制作10根测试样本！将1：0根测试样本均匀】平行摆放在器械盒内！用，双层无纺布包裹放置！在灭菌舱内》灭菌舱内《。。如仅一层隔》架则1？0，。根样本？平行摆放在》器，械盒内放置》。在灭菌舱中》央（见图《A.1）；若灭【菌舱：内可摆放上下两【层，隔架则将10—根样本均匀摆放【在两个？器械盒内分》别放置在灭菌—舱内上？下两层隔《架中央（《见图A？.2）？ ！   》  按照消毒—技术规范（2002！版）中的灭》菌操作步骤进行半】周期灭菌灭菌结束后！以无菌？操作取出《细菌芽孢载体—均放：到TS？B培养基中56℃培！养48？h观察培养》。。结果如无细菌—生长则继《续培养？至，7d培养结果仍无细！菌，生长则判断为阴性】 《 ：A，.4.2  将染】菌的体？用细丝送达聚四【。氟乙烯管腔的正中】间制作10根测试】样本将10根—测试样？。本均匀平行》摆放在器械盒—内用双层无》纺布包裹放置在【灭菌舱内灭》菌舱内如《仅一层隔架则10】。根样本平行摆放在器！械盒内？放置在灭菌舱中【。。央（见图A》.3）？；若灭菌舱内可摆】。放上下两层隔架则将！10：。根样本均《匀摆放在两个器械】盒内分别《放置在？灭菌舱内上下—。两层隔架中央（见图！A.4） 【 》 ？     》按照：消毒技术规范（20！02年版《）中的灭菌》操作步骤《。进行半周期灭—菌灭菌结束后取出】细菌芽孢载体全【部，。放到TSB培养基】中，56℃培《养，48h观察培养结】果如无细菌生长【则继续？培养：至7d培养结果【仍无细菌生长则判】定阴性 《 ？ A.—5  结果计—算， ：。 《   《。  嗜热脂》肪杆菌芽孢》重复以上两种材【质的模拟《。管腔微生物》。测试各重复5次 ！ A【.6 ？。 结果判《定 ！   ？ 测试结果均无细菌！生长为？阴性则判定无菌合】格 ？