附录A（规【。范性附录） 灭【菌效果检测》方法 ！ A.1  方法原！理 ！    本试验以常！见的硬式《镜不锈钢材料管【腔、：软式镜聚四》氟乙烯材料管—腔为模拟管腔验证】微生物的灭》菌，。效果本试验应—采用两端《开口的无缝测—试管腔？如有：接缝则应保证气密性！。在管：腔中：。央放置染有细菌芽】。孢的载体通》过半周期灭菌循【环无菌生长以嗜热】。脂，肪杆菌芽孢为指标菌！同时：进行微？生物灭菌效果评【价所有试验均—为，阴性：培养结果则判—定结果？合格 】 A.《2  生物》指示物？ —     —嗜热脂肪杆》。菌芽孢（ATCC7！953）《 — A.3》  验证《。器材 【 ？A.3.1  【载体将芽孢液均匀】。涂布在直径为0.】4mm、长度为20！。mm～？30mm不》锈钢检测材》质上以染菌后不堵】塞管：腔为限嗜热脂肪【杆菌：。芽孢阳？性回收？菌量应为1×1【06CFU/载体～！。5×106C—FU/载体室—温下自然干燥后再】使用 《 ， A.》3.2 《 检测管腔本试【验宜采用《两端开？口的无缝测》试管腔如《有，接缝则应保》证气密性《 A.3！.3： ， 不锈钢材质无【接缝管腔《10根 】。 A.3.4  聚！四氟乙烯无接缝管】腔10根 【 ？A.3.5  【嗜热脂肪杆菌芽【孢的TSB培养基干！。粉胰蛋？白胨17.0g植】物蛋白胨3》。.，0g氯化钠5—.0g磷酸氢二钾】2.5g《葡萄糖2.5g共3！0g溶？于1L蒸《馏水中？制成胰蛋白胨大豆肉！汤（：TSB）培养基 ！ 《 ， A：.4  操作步骤】 ，。 ， A.4！.1  将》染菌：的载体送达》不锈钢管腔的正【。中央制作10—根测试样本将1【0根测试样本均【匀平行摆放在—器械盒内用双层无】纺布包裹《。放置在灭菌舱内【灭菌舱内如仅一层】隔，架则1？0根样本平行摆【放，在器械盒内放置在】灭菌：舱中央（《见图A.1）；若灭！菌舱内可摆》放，上下两层隔架则【将10根样本均匀】摆放在？两个：器械盒内《分别放置在灭菌舱内！上下两层隔架中【。央，（见图A.2） 】。 【  》   按照消毒技术！规范（2002【版）中的灭菌操【作，步骤进行半》周期灭菌灭菌结【束后以无《菌操作取出》细菌：芽孢：载体均放到》。TSB培养基中5】。。6，℃培养48h观察】培养结果如》无细菌生长》则继续培养至7【d培养结《。果，仍无细？菌生长则判》断为：阴性 【。 A.？4.2  将染菌】的体用细丝送达聚】四氟乙烯管腔的正】中间制？作10根测试样【本将10根测试样】本均匀？平，行，摆放在器械盒内用双！层，。无纺布包裹》放置在灭《菌舱内灭菌》舱内如仅一层隔【架则：10根样本平—行摆放在器械盒内放！置在灭菌舱中央【（见图A.3）；】若灭：菌舱内？可摆放上《。下，两层隔架则将10根！样本均匀摆》放在两？个器械盒内》分别：。放置在？灭，菌舱内上《下两层隔《架中央（见图A【.4） —。 ： —。     按照【消毒技术规》范（20《02年版）中—的灭菌操作步骤进】行半周期灭》菌灭菌结束后—取出细菌芽孢—载体全？部放到TSB—培养基中56℃培】养48？h观察培养》结果如无细》菌生长则《继续培？养至：7d培养结果—仍无细菌生长则判定！阴性 【 A.5 【 结果计算》 【。     嗜热【脂肪杆菌《。芽，孢重复以上两种材质！的模拟管腔》微生物测试》各重复5次 —。 A】.6  《结果判定 】。 《  ：  测？试结果均无细菌生长！为阴性则判定无【菌合：格 ？