附录A（—规，范性附录《） ：陆，生植物？生长试验《 A.】1 受试物》信息 【  ：。。   受《试物：信息包？括但不？限于水溶性》、蒸汽？。压、：结，构式、有机溶剂【中的溶解度、正辛】醇/：水的：分配系数、吸—收行为、纯度、在水！和光中？的稳：定性、？生物降解试》验的结果 【 ？A.2 《试验简介 】 A.2.—1 试验《目的 —     用于评！价，在一：次性施用后土壤【中固态和液》态的化学物质对【植物幼苗《和早期？生长的潜在毒性效应！ 《 A.2.2 】试验原？理   ！  本？附录用于《评价：在土壤中《（或其他《合适的土壤基—质）施用供试品后对！出苗和较高植物早】期生长的影响—种子种入《供试品处理》过土壤？中在对照《组出苗率达到5【0％后？的14d～21【。d内进？行评价终点测—量是可见的出苗率、！苗干重（也可为鲜重！）某些情《况下为苗高也要评价！植物不同部位上可见！的有害？的，。影响这些测量和【观察与未处理的对照！进行比较 —  》   根《据可能的暴露途径】供试品？混，入土壤？。（或可能的人工土壤！基质）或《。喷洒在土《壤表面这些途径【要尽可？能正确代表化—学品潜在的暴露【途径土？。。壤，混合时先进行—大量散土的混合然后！再，装入：盆中将？。所选植物种子种入土！壤中表面《施药时？。先将：土壤装入盆》中，将种子种好然后再喷！药试验体系（对照和！处理土壤及种子）放！。在适合植《。物生长的环境—中   ！  本附录可—。根据研究目的测定剂！量-反应曲线—或单剂量/》比率：。作为限？度试：。。。验如果单剂量—/比：率试验超出一定【的毒性水《平（：例如观察到》的效应？高，于x％）要进行范围！筛选试验测定毒【性高限和低限再进行！多，剂量试验产》生剂量？-反应曲线适当【的统计？分析方法分析获【得最敏感参数—的作用浓度ECx或！。有效施用《率E：Rx（如EC25、！ER25、EC5】0，、ER50）—同样无作用浓度（】NOEC）和最【低作用浓度（LOE！C，），。也，能计算出《来 》 A.2.—3， 参比物 》   【  定期进行参考物！质试验以确认—随着时间的》。推移试验性能和特】定，植物的反应和试验】。条件：没有明显《改变可选的方法【还有实验室用—以往的对照》组，。生物量测定或—生长测？量来评？价试验系统的性能可！以作：为实验室内部—质量控制 【 A.》2.：4 限度 【    — 本附录不能给出】由受试物蒸发所造成！。的可能伤害结果【。也，未，测定由于直接接触】植物所产生的伤害 ！ 《 A.3 设备与材！料 ：。  —   ？人工生长箱》、温室或植》物生长？箱生：长容器应为》塑料器皿或》瓷盆钵 ！A，.4 试验操作 】 ： ？A.：4.：1， ，。准备自？然土：/人：工基质？   】。  可用《含1.5《％以上有机》碳（有机《质约3％）的—沙，壤土、壤质》沙土或沙质黏壤【。土装：入花盆？种入植物含1.5】％，以，上有：。机碳：。的商业盆栽土或合成！混合土均可用如【果，供试品黏土》有很高的亲和力【则不可用黏土耕地土！应过2mm筛使之均！一并去除粗糙颗【粒最终准备土壤的】类型和？构造、有机碳—。、pH、盐含量和】电导率？应报告土《壤应巴氏《消，毒或热处理消毒以】减少土壤病菌—的，影响  ！   由于物理【/化学特征》和，微，生，物群落的改变自然】土可能？使结果的解释复杂化！增加变异性这些变异！依次为土壤持水【能力、？。化学：结合能？。力、通风、营养和】微量元素含量除了】物理因素的变异【外在化学特》性上的变异》如pH和氧化还原】电位：可以：。。影响供试《。品的生？物可用性 【。 ？   ？。。 ，为，尽可能减少自然土的！变异性对《试验带来的误—差，当受试物不》是植物保护产品【时可用人工基质代】替自然土进》行试：验所用基质应包含惰！性物质减少与—供试品、溶剂载体或！两者的？相互反应用》酸洗：过，的，石英砂、矿物—。丝和玻璃珠》（如直？。。径0.35m—m～0.85mm】）是合适的惰性物质！可减：少对供试品的吸收保！证供试？品最大可能地经根吸！收达到幼苗不适合的！基，质，包括蛭石、珍珠岩或！其他高吸收性的材料！应提供植《。物生长所《需的营养以保证植物！。没有营？养缺乏的压力—可通过化学分析【或，对照植物的可见评】。价进行评价 ！ ， A.4.2 【供试：植，物 《。    — 选择植物的种类】应考虑其在植物界中！分类学上《的多样性、分布特征！、种：的特定生活》史和自然《界分布地区差异具体！包，括下列？特征  ！   有《均一的种子从可靠】的标准种《子来源获得能—产生持续、可靠和】。一致的萌芽以及【一致的幼苗生—长；  ！ ，  植物应适—于在：实验室进行试验在】实验室内及实验室】之间能够得出可靠】和可再现的结果； ！ ， ， ，     所【用种的敏感》。性应与环境》。暴露中的植物反应一！。致，；， 《    》 所选种《已用以往《的一些毒《性，试验它？们，在如除草剂》生物测定、》重金属筛选、盐度或！矿，物压力试《验或植物相克研究】。中的使用《表，明对宽泛多样—性刺激存在》敏，感度； 《 》   ？ 能够适应试验【方法中的生长条件；！ 》    《 符合？试验有？效性标准《 —    试验所用】的种类数量根据相关！的管理要求》决，定附录？C中的植物测试【试验：用物种供参考 【 A.【4.3 《供试品的施入— 《    》 供：。试品应？添加到适当的—。。载体上（如水、丙】酮、乙？醇、聚乙《。二醇、阿拉伯—树胶、砂）也可用】包含：有效成分和各—种助剂的《制剂进行试验 ！ A.4—.4 与土壤/人工！基质的混合 】。     溶】。于，水或可悬浮在水中】的物质可以直—接配成水溶液—然后将水溶液与【土在适当的容器中混！合此种类型试验适】合化学品通过土【壤或土壤毛细—水吸收涉及根的吸】。收供试品添加量【不应超过《土壤持水力每个浓度！添，加的溶液量应一【致但要？注意：避免土壤结》块 ？ ？     水溶性低！的物质应先溶入适】当的：挥，。发性溶剂中（如【丙酮、乙醇）并与】。沙混合用气》流将溶剂从沙中【去除处理《的沙子与试验土【壤，混合设置只加沙子和！溶剂的溶《。剂对照各《处理：和溶剂对照应加等量！的混入溶《剂并已去除溶剂【的沙子？对于固体和不溶于】水的供试品直接和】干土混合《此后：将土加入容》器中并立即种入【种子  ！   用人工—基质代替土》壤时在试《验开始前可》直接将溶于水的【化学：品溶解到营养液中不！溶于水？但可以通《过溶剂载体悬浮【于水：。中的可加入载体【。。再溶于营养液—。中不：溶于水但没有无毒的！水溶性载体可先【溶于适当的挥发【性溶剂溶液与沙子】。或玻璃珠混合—在旋转蒸发仪上蒸】发使化学品均—匀地覆着在》。沙粒或珠《子上在分装之前【取一部分称重的【玻，。璃，珠用等量溶剂提取进！行，化学分析 ！ ，A.4.《5 表面施用— 《     —对于作物保护产品通！常用土壤《表面喷洒试验溶【液的方法《进行施药进行试验操！作的所？有设备包括准备和】喷，洒供试？品的设备都应使试验！以精确的方》。式，进行能够产生可【重现性覆盖》覆盖应均一分布在】土壤表面应避免【。化学品被设备吸【收或与设备反应的可！能（如塑料管与亲脂！性化学品易反应【或某些化学品对钢材！。质设备有腐蚀性）模！仿典型的喷》雾，器将供试品喷洒在】土壤表面通常喷【洒量应在正常农用】量的范围内用量（】水的：量等：），应报告选择喷嘴类】型以保证均》一的土壤表面覆盖】量如果？应用溶剂和载—体应：设，置溶：剂/载？体对照不必试验作】物保护产品的—。制剂 A！.，4.6 供试—。品浓度/《比率的？验证  ！   浓《度应经适当的—分析：方法验证对》于可溶性物质所【有浓度的《验证可？以，通过分析用于逐级稀！释的最高《浓度来确《。认用：校准设备（如校【。准分析用玻璃器具】。、校准喷雾设备）进！行逐级？稀释对于《不溶于水《的物质分析添加到】土中的量如果—要证明？供，试品在？土壤中的均一性有必！要进行土壤分—析 A.！4.：7 试验条件— 《    》 试：验条件应与试验【种和变种《的正常生长条—。件，相似出苗的植物应】放在：。可，控的气候培养箱、】人工气候箱或温室】中进行园艺操作维】持正常？生长：采用生长设备时应保！证植物？正常生长并》。与，对照组对照；应记录！包括条件控》制和足够频率—。（如每日）的温度、！相对湿？度、二？氧化碳浓度》、光（照度、波【长，、光合有效辐射【）/光周期、平均】。灌溉量等参》数温室温度通过通风！、升温和/或制冷系！统来控制下》列条：件通常为温室试验的！推荐条件 】   《 ， 温度（《22±10）—℃； 】    《相对湿？。度（70±2—5）％； —   —  光周期最—少16h光》照； ？  —   照度（2【4，850？±3550）—lx如果照度—降到14200 】lx以？下波长40》0nm～700nm！除某些种《。需减少照度外需补】充光：照 ？ ：  ？ ，  试验期间—应监：测和记录环境—条件试验所用容【器，应为无孔塑料或玻璃！容器：容器下面应》。垫上：托盘或碟子容器应定！。期重新摆放》。以减：少植物的生长差【异（因为生长设施】的试：验条件不同）容器】应，足够大以保证—正常：。生，长 —     》为维：持好的植物活力【可以添加土壤—。营养液通过观—察对照？植物判？断添加营养》。液的需？要和时机推荐—从试验容器底部浇】水（如用玻璃—纤，维，丝，） 》    》 对试验《植物种和《供试品？来说特？定的生长条件是【。适合的？（，参见附？录，D）对照和》试验组？植物：应放置在一》样，的试验环境条—件下然而应采取【必要的措《施防止不同处理间及！。对照与供试品—间的交叉污》染（如挥发物—。。质） A！。。.4.8 》试验操作 【。 A《.4.8.1 【试验设计 》   【 ， ，同样种类的种子种植！。于容器中每》个容器中种入—的种子数目》。应根：据植物种类、容器大！小和试验周期—决，定，试验期间给植物【。提供充分《的生长条件避免【过，于拥挤根据》种子大小最大的植】株密度为3粒/1】00cm2～1【0粒：/1：00cm2例如每】个直径为15cm的！容器内？可种1株～2—株玉米、大豆—。。、西红柿、黄—瓜或甜菜；可—种3株油菜或豌【豆；可种5株～10！株洋葱、《小麦或其他小粒【种子种子《数量和重《复容器（《一，个重复指《一个容器《。容器内？的植物不是重复【）应足以采用理想的！统计分？析方法进《行统计？每个重？复用很？少的：大种子比每个—重复用小种子时变】异会较大《应标记可以通过每】个容器内同样—数，量的种子降》低变：异  】   设《置，对照组保证观察到的！。效应与暴《露的供？试品有关或由供【试品引起除》了不暴露于供—试品：外适当的对照组【。应与试验组在各【方面都？一样：所有：被试植物包括对照】。。。均，应来：自同一来源为避【免偏离对照和试【验组植物《。应随机分布 ！    》 应避免使用—。杀虫：剂或杀菌剂包被的】种，子（：。即“包？。衣”种？子）特？殊情况下允许—使用某些非》内吸性接触杀菌剂】（如克菌丹、—。福美双）如》果，有种生病菌可以把】种子在5《％，次氯酸盐中浸—一下然后在流水下】漂，洗再晒干《允许：其他作物保护产【品，的非治？疗性：处理 — A？.4.8《.2： 单浓度/比率试验！ 》。     进行单】浓度试验（限度试验！）时未确定》适当供？试品浓度需要考虑很！多，因素对一般》化学品来说应考【虑物质？的物理/《化学：特性对作物》保护产品而言—需，要考：虑物：理/化学《特性、供《试品的使用模式、最！大浓：度，或施用？比率、每个生长季节！施用次数《和/或试用品的持久！性为测定一般化学品！是否有植物毒素特】性通常以10—。00：mg/？kg干土作为最大剂！量，。 —A.：4.：8，.，3 预试《验 ： ？。     进【行正式的多》浓度的剂量》反应研究前需—。先进行？。预试验确定剂量范围！预试验的浓度间【。距应：较宽（如0.1m】g/kg《、1.0mg/kg！。、10？。mg/？kg、100mg】/kg和10—0，0，mg/？kg干土《）作物保护产—品的浓度《。应根据推荐或最大使！用浓：度或：施用比率《。确定如推荐/最【大浓度？或，施用比率的1/10！0、1？/1：0和1/1 【 ？ A.4.8.4 ！多浓：度/比率试》验  】   多浓度/比】率，试验：的目：的，是建立剂量反应关】系，和，测定萌？芽率、生物量的【ECx或ERx值】和/或与未》给，药，。的对照组比较—的可观？。察效应 —   》  试验浓》度/：比，率，的数量和间距应【足，够产生可信的剂量反！应关系和回归线【性方程并能》得出估计的》ECx或ERx【值所选浓度数量至少！五个几何级数—并加上对《照相邻的两》个浓度梯《度不：应超过3个几何级】每个处理和对照均】至少有四《个，平行总？的种子数应至—。少20粒《对某些萌芽率—低的植物或多样化】的生：长特：征，的植物增加平行数提！高统计效力 】 A.》。4.8？.5 观察 —。。 《。     在观察】期内即？对照（溶剂》对照）出苗率达到】50％后的14d～！21d内定期（至少！1周若可能每日）观！察植物是否出—苗和可见的植—物中毒死亡》在试验？结束时记录》出苗：率，、存活？植，物的生物量和—。植物不同部位可【见，的毒害？效应后者包括已【出幼苗形态》上的异常《、生长迟缓》、枯萎、变色、死】亡和植？物发育上的》。影响最终生物量通过！测定最终《存活：植株的？平均苗干重完成【收割土壤表面—以上的植株在6【0℃烘干至恒定【的质量也可选择【。以鲜重作《为最终生物量—如，有特殊要求苗—高可作为另一—个重点指标可用【一个统一《的评分系统》对可见？的伤害进行评—分，。来评价可观察的毒性！反应： ： A.5【。 质量控制 】 ， ：。    为》保证试验《的有效性对照—应符合下列形—态，。标，准 《   》  出苗率至—少70％《；  】。  ： 幼苗没《有可：见，的植物毒素影响（】如变色病、坏—。死病：。、枯萎、叶子和茎】的畸形）个别种类的！植株在生长和形态】上只有正《常变异； ！。。     试—验期间对照组幼苗】平均存活率应—高于90％》；   ！  特定种类的环境！条件：应一样生长》介质包含等量的人工！土壤基质、》支持介质或同样【来源的？物，质 A】.6 数据和报告 ！ A.【6，.1 数据处理 ！ A.6.1！.1 单浓度/【比率试验 》    】 每个植物种的数据！都应用适《当的：统计方法进行分析】报告试验浓》度/比率产》生的效应水平—或试验浓度/比率】下未见效应（—。。如在y？浓度或比率观察的效！应＜x％） 【 A.6.】1.2？。 多浓？度/：比率试验 — ：  ？   根据回归方程！剂量-反应关系【可，用，不同的模型如出苗】率等：计数型数据E—Cx或E《。Rx：（如EC2》5、ER25、【EC50或ER50！），和置：信，限的估？算可用逻辑回归【法、概率法、韦博】法，、寇氏法进行统计】；幼苗生长（—质量：和高度）等连续【型终点指标ECx或！ER：x和可信限的估算可！用适当的回归分析】（如Bruce-V！erste》eg非线性》回归分析）如果可】能R2值为0—.7或再高些—对多数敏感》种来说所设》浓度/比率包—含20？％和80％效—应如果要《求，NO：。EC要求有更强【大的分析性试验并】且，要在数据分布基础】上选择 —。 A.6.2】 试验报告 ！    》 试验报告应包括】试，验结果、试》验条：件的详细《描述、？结，果的全面讨论—、数据？的分析和结果分析】提供结果图》表和摘要《通常包括下列内【容 【。   ？ a）供试品—  【   化学》。。鉴定数？据相关物质特性（如！可能正辛醇》/水的分配》系数1gP》ow、水溶解度、蒸！汽压、环境归宿【和行为？的信：息）； 】。     》。试验溶液的制备细节！和试验浓度》。的验：。证 ： ，     b！），试验：植物种 【     —。。试，验生物的详》细资料种/亚种、所！属植：物科、？学名和通用名、尽可！能详细的《来源和历《史，（即提供者的名称、！萌芽率、种子尺【寸级别、批号、产种！年或选择《的生长季《节、萌？。芽期等级）、生存力！等； 《     】所试验的单子叶【和双子叶种的数【量； 》 ：    《 选择此种的理【由；：   】 ， 种：子贮存、处理和【维护的描述 】     c）！试验条件《   】  试验设施—（如生长箱、人【工气候？箱和室温）；— —    试验—系统的描述》（如容器直》径、容？器，材料和土《壤，量）； 】     土壤【特性（土壤质—地，或类型？土壤：颗粒分布和分级、】物理化？学特征？包括有机物》含量、？有机碳含《量和pH值》），；， ？ ：    《。 试验前土壤/【基质（如《土壤、人工》土壤、沙子和其【他）的制备》； —   ？  若用营养液配】方描：述，； ： ，。     供！试品的施用》施用方？。法、设备《。、暴露？承载量和体积—（，包，括化学验证》。、校准方《法）、施药期间环】。境条件的《描述； 《 ， ：     生长条！件，照度、光周期、【最高/最低温度【、浇水？时间表和方法、施肥！。； 《     每个！容器内？的种子数量、—每，。个剂量植《株数：、每个暴《露率的重复数； ！     】。对照的类型和数量】（，。阴性对？照和/或阳性—对照：、溶剂对照）； ！   — ， 试验周期 】 ：   ？  d）结果 【     ！每个重复、试验浓度！/，比率和种子的所有终！点数：据表； 【     与对照！比，较的萌芽《数量和萌芽率—； 《 ？    《。植株生物《量（植株干重—或，鲜重）？。测定值与对照—比率； 《 ？ ，     若测量植！株高度与对照的【。比率； 《 《  ：   与对照比较】的由供试品引—发的可见的伤—害率和可见的定性定！量描述（黄化、坏】死，、，枯萎：、叶：和茎：的畸：形和缺乏症）； 】     ！如果提供《可见伤害评》分标准判断可—。见，伤害：描述； 《。     ！对于单剂《量，试验应报告伤害【率；： —    ECx或】ER：x（：如E：C50？、ER50》、EC25、ER】25）值和》。相关置信限如果【有回归？分析提供回》归方程标准偏差单】个参数？估计标？准偏差（如斜率、截！距，）； 】    若计算【NOEC（》和LOEC）值；】 —  ：  统计过程和【假设检验的描述；】 ，     ！数据：表和试验种的剂量-！反，应关系图《 ：   —  试验《过程：中与方法的偏离和试！。验中不可预见的情况！的描述 》