附录A（规【范性附录《），。 陆生植物生—长试验 — A.1 【受试物信息 ！。   《  受？试物：信息包括但不—限于水溶性、—蒸汽压、结构—。。式、有机溶剂中的溶！解度、正辛醇/水】的，分配系数、吸—收行为？、纯：度、在水和光中的稳！。定性、？生物降解试验的结】果 《 A.2— 试验简介 ！ A.2.1 试！验目的？ ， ： ，   《  用于评价在一】次性施？。用后土壤中固态【。和液态的化学物【质对植物幼苗和早】。期生长的《。潜在毒性效》应 — A.2.》2， 试验原理 】  《 ，  本？附录用于评价在土】壤中（或《其他：合适：的土壤基质）施用供！试品后？对出苗和较高植物】早期：生长：。的影响种《子种入供试品处理过！土，壤中在？对照组出苗》率达：到5：0％后的14d【～21d内进行评价！终，。点测量是可见的出】苗率、苗《干，重（也可《为鲜重）某些情况下！为苗高也要评价【植物：不同部位上可见的有！害的影响《这，些测量和观》察与：未处理的对照进【行比较 《   【  ：根据可能的》暴露途？径供试品混入—土壤（或可能的人】工土壤基质）或喷】洒在土壤《表面这些途径要尽】可能正确代表—化学品潜在》的暴露途径土壤混合！时先：。进行大？量散土的混合然后再！装，入盆中将所》。选植：物种子种入土壤中表！面施药时先将土壤装！。入盆中将种子种【好然后再喷药试验体！系（对照和》处理土壤及种—子）放？在适合植物生长【的环境中 ！     本附录】可根据研究目的【测定剂？量-反应曲线或单剂！量/比率作为限【度试验如果单剂量/！比率试验超出—一定的？毒性：水平：（例：如观察到《的效应高于》x％）要进》行范围筛选试验测定！。毒性高限和》低，限再进行多》剂量试验产》生剂量-反应曲线适！。当，的统计分析》方法分析获》得最敏感参数的【作用：浓度ECx或有效】施用率？E，Rx：（如EC2》5、ER25—、EC50、ER】50）同样无作【用浓度（NOE【C）和最低》作用浓？度（L？OEC）《也能：计算出来 【 ： A.2.3 【。参比物 》 《    定》期进行参考物质试】验以确认随着时间的！推移试验性能和特定！植物的反应》和试验条件没有【明显：改变可选的方法还有！实验室用以往的对】照组生物量》测定或生长测量来】评价试？。验系统的性能—可以作为实验室内】。部，。质量控制 — A.2【.4 限度 —   【 ， 本附录《不能：给出由受试物蒸【发，所造成？的可：能伤害结果也未【测定由于《直接接触植》物所产生的伤害 ！ ？ A.3 设备【与材料 ！    《人，工生长箱、温—室或植物生长箱生】长容器应《为塑料器皿或瓷盆钵！ A.4！ 试：验操作 【 A.4.1 准！备自：然土/人工基质【 《     可【用，含1.5％以上【有机碳？（有机质约3％【）的沙壤土、壤【质沙土或沙质黏【壤土装入花盆—种入植物《含1.5％以上【有机碳的商业盆【栽土或合成》混合土均可用如果供！试品黏土有很高【。的，亲和：力则不？可用黏土耕地土【应过2mm筛使之均！一并去除粗糙颗粒】最终准备土》。壤的类？型和构造、有机碳】、pH？、盐含量和电导【率应报告土壤应巴】氏消毒或热处理消毒！以减少土壤病菌【的影响？ 《   《  由于物理/化学！特征和微《生物群落的改—变自然土可能—使结：果的：解释复杂化增—。加变异？。性这些？变异依次为土壤持】水能：力、化学《结，合能力、通风、营】养，和微量元《素含量除了》物理因素的》变异外在化学特【性上的变异》如，。pH和？氧化还原《电位可？以影响供试品的生物！可用性 】     为尽【可能减少自然—土的变？异性对？试，。验带：来的误差《当受试物《。不，。是植物保护产品时可！用人工基质》代替自然土》进行试验所用—基质应包含》惰性物质减》少与供试品、溶剂】载体或两者》。的相互反应用酸洗】过的：石英砂、矿物丝和】玻璃珠（如直径0】.35mm～—0.8？5mm？）是合适的》惰性物？质可减少对供试【品的吸收保证供试】品最大可能地—经，根吸收达到幼—苗不适？。合的基质包》括，蛭石、珍《珠岩或其他高吸收性！的材料应《提供植物生长—所需的营《养以保？证植物没《有营养缺乏的压力】可通过化学分析或对！照植物的可见—评价进行《评价 】A.4.2 供试】植物 》 ？    选择植物】的种类应考虑其在】植物界中《分类学上的》多样性、《分布特征《、种的特定生—活史和自然界分布地！区差异具体包括下】。列特征？ ： 《    有均一的】种子从可靠的标准种！子来：源获得能产生—持续、可靠和一致的！萌芽以及《一致的？幼苗生长； — 》 ，   植物应适于】在实验室《进行试？验在实验室内及实】验室之间《能够得出可靠—和，可再现的《结果； 】   ？  ：所用：种的敏感性应与【环境暴露中的植物】反应一致《；， —    所选种已】用以往的一些毒性试！验它们在如》除草剂生物》。测，。定、重金属筛选、盐！。度或矿？物压力试验或植【物相克研究中的使用！表明对宽《泛，多样性刺激存—在敏感？度； 【     》。。能够适应试验—方法：中的：生长条件； —  —   符《合试验有效性标准】 ，  —  ： 试验？所，用的种类数量根据】相关的管理要求决】定附录C中》的植物测试试验【。用物种供参》考 【A.：4.3？ 供试品的施入 】 ？  ？   ？供试品应添》加到适当《的载：体上（如水、—丙酮、乙醇、聚乙二！醇、阿拉伯树胶、砂！）也可？用包含？。有效成分和各种助剂！的制剂进行试—验 — A.4.4 与】土壤/人工基质的混！合 —   ？  溶于水或可悬浮！在水中？的物质可以直接【配成水溶液然后将水！溶液与土在》。适当的容器中—混合此种类》型试验适合化学品通！过土：壤或：土壤毛细水吸收【涉及根的吸收供试】品添加量不应超【过土壤持水力每个】浓度添加的溶液量】应一致但要注意避免！土壤：。。结块 》   》  水溶性低—的物：。质应先溶入适当【的挥发性溶剂中【（如丙酮、乙醇）】并与沙混合用气流将！。溶，剂从沙中去》除，处理的沙子与试验土！壤混合设《置只加沙《子和溶剂的》溶剂对？照各处理和溶剂对】照应加等《量的混入溶剂并已】去除溶剂的沙子【对于固体和不溶【于水的供试品—直接和干土混—合此后将土》加入容器中》并立即？。种入种子 【     【用人工基质》代替土壤时在试验开！始前可直接》将溶于水的化学品】溶解到营《养液中不溶于水【但可以通《过溶剂载体悬浮于水！中的可加入载体【再溶：于营养液中不溶【于水但没有无—毒的水溶性载体可】先，溶于适当的挥—发性溶剂溶》液与沙子或玻璃珠】混合在？旋转蒸发《仪上：蒸发使化学》品均匀地《覆着在沙粒》或珠：子上在分装之前取】一部分称重的玻【。璃珠用等量溶—剂提取进《行化：学分析 《 A.【4，.5 ？表面施用 》  —   对于》作，。物保护产品通—。常用土壤《。表面：。。喷洒试验溶液的方法！进行施药进》行试验操作的所有设！备包括准备和喷洒供！试品的设备都—。应使试验以精—确的方式进》行，。能够产？生可重？现性覆盖覆盖应均一！分布在土壤表—面应避免化学品【被设备吸收或与设】备反应的《可能（如塑》料管与亲脂性化学】。品易反应《或某些化《学品对钢材》。。质设备有腐蚀性【）模：仿典型的喷雾器【将，供，试品喷洒《在土壤？表，面通常喷洒量应【在正常农用量的范】围内用量（》水的量等）应—报告选择喷》嘴类型以保》证均一？的，土壤表面覆盖—量，如果应用《溶剂和？载体：应，设置溶？剂/载体对照不必试！验作：物保护产品的制剂 ！ 《 A.？。4.6 供》试品浓度《/比率的验证 ！     浓度！应经适当的分析方法！验证对于可溶性物质！所有浓度的验证【可以通过分析用于】逐级稀？。释的最高浓度—来确认用校准设备（！如，校准：分析用玻璃器具【、，校准：喷雾设备）进行逐级！。稀释对于《不溶于水的物质分】析添加到土中的量】如果要？。证明供试品在土【壤中的均一性有【必要进行土》壤分析 ！A.4.7 试【验条件 ！ ，。。 ， ， 试验条《件应与试验》种和变种的正—常生长条件》相似出苗的》植物应放在可—控的：气候：。培养箱、人工气候】箱或温？。室中进行园艺操作维！持正常生长》采用生长设备时【应保证植物正常生长！。并与对？照组对照；应记录】包，括条件控制和足【够，频率（如每日）的】温，度，、相对？湿度、二氧化碳浓】。度、光？（照度、波长、光】合有效辐射》）/光周期、平均灌！。。溉量等？参数温室温度—通过通风、》升温和？/或制冷《系统来控制下列条】件通常为温》室试验的推》荐条：件， 《     温【度（22±1—0）℃？；   ！。 ， 相对湿度（—7，0±25）％； ！ 《  ：  光周期最—少16h《光照；？ ：     】照度：（24850±3】55：0）：lx如？果照度降到1420！0 lx以下波长4！0，0，nm～？700nm除—某些种需减少照度】。外需补充光》照，   】  试验期间—应监测和记录环【境条件？试验所用容器—应为无孔《。塑料或？玻璃容器容器—下面应垫上托盘或碟！子容器应定期重新】摆，放以减少植》物，的生长差异（因为生！。长设施的试验条件不！同）：容器应足够大以保证！正常生？长 —。     为维持】。好的植物活力可以】添加土壤营养液【通，过观察对照植物判】断添加营养液—的需要和时》机推荐从试验容【。器底部？浇水（？如用玻？。璃纤维丝） 【     对！试验植物种》和供试？品，来说特定《的生长条件》是适合？的（参见附》录D）对照和试验】组植物应《。放置：在一样？的试验环境条—件下然而应采—。取必：要的措施《防止不同处理间及】对照与供试品间的】交叉污染（如—挥发物质）》 A.4！.8 ？试验：操作 【 ，A，.4.8.1 【试验设计 【 ，     同【样种类的种子种植于！容器中？每个容器中种入的种！子数目应根据—植物种类、容—器大：小和：试验周期《决定试验期》间给植物提》供充分的生长条件避！免过：于，拥挤根据种》子大：小最大的植株密度为！3，粒/100cm2～！1，0粒/100cm2！例如每个直》径为：。15cm《的容器内可》。种1株～2株玉米】、大豆、西红柿【、黄瓜？或甜：菜；可种3株油【。菜或：豌豆；？可种5？株～10株洋葱、小！麦或其他小粒—种子种子数量和重复！容器（一《。个重：复指一个《容器：容，器内的植物》不是重复）应—足，以采用理想的统【计分析方《法进：。行统计每个重复【用很少的大种—子比：每个：重复用小种子时【变异会？较大应标记》。可以通过每》个容器？内同样数《。量的：种子降低变异 】     设！。置对照组保证观【察，到的效？应与：暴，露的供试品》。有关或由供试—。品引起除了不暴露于！供试品外适当的对照！组应与试验组在各】方面都一样所有被】试植物包括对照均】应，来自：同，一，来源为避免偏离对照！和试验？组植物应随机分布 ！ ，   —  应避免使—。用杀虫剂或杀菌剂包！被的种子（即“包衣！”种子）特殊情【况下允许使用某【些非内？吸性接触杀菌剂（如！克菌：丹、福美双）—如果有种生病—菌可以把《种子在5％》次，氯酸盐中浸一下然后！在流水下漂洗再晒干！允许：其他作物保》护产品的非治—疗，性处理 【 A？.4.8.2 【单，浓度/比率试—验， ：     进！行，单浓度试验（限度】试验）时未》确，定适当供试品—浓度需要考》虑很多因素对—一般：化，学品来说应》考虑物？质的物理/化学特性！对作物保护产品【而言需要考虑物理/！化学特性、供—试品：的使：用模式、《最大浓度或施—。用比：率、：每个生长季节—施用次数和/或试】用品：。的持久性为测定一】般化：学品是？否有植物毒素特【性通：常以1000—mg/kg》干土作？为最大剂量 】 A《。.4.8《.3 预试验 】     进！行正式的多》浓度的剂量反应【研究前需先进行【预试验确定剂—量范：围预试验的浓度【间距应？较宽（如0.1m】g/kg、1.【0mg/k》g、10mg/kg！、1：00mg《/，kg和1000【mg/kg干土）】作，物保护产品的浓【度应根据推荐或最】大使用浓度》或施用比率确—定如推？荐/最大浓度或施】用比率的《1/1？00、1/10【和1/1《 《。 ， ，A.4.8.4 】多浓度/比》率试验 —   》  多浓《度/比率试》。验的目的是》建立剂量反》应关系和测定—。萌芽率、生》物量的ECx或E】Rx值和/或与未】给药的对照组比较的！可，观察效？应 —。  ：   ？试验浓度/》比率：的数量？和，间距应足够产生可】信的：剂量反？应关系和《回归线？性方程并能得出估计！的ECx或ER【x值所选浓》度数量？。至少五个几何—级数并加上对照【相邻的两个浓—度梯：度不应？超，过，3个：几何级每个处理和】对照均至少有—四个平行总的种子】。数应至少20—粒对某些《萌芽率低的》。植物或多样化的【。生长特征的植物增】加平行数提高统计】效力： ？ ？A.4.《8.5 观察— ：    【。 在：观察期内即对照【（溶：剂对照）出苗率达到！50％后《的14d～21【d内：定期（至《少1周若可能—每日）？观察植物是否—出，苗，和可：见的植？物中毒死亡在—试验：结束时记录出苗【率、存活植》物的生物量和植物】不同部位可见的毒害！效应：后，者包括已出幼苗【形态上的异常—、生长迟缓》、枯萎、变色、【死亡和？植物发育《上的：影响最终生物—。量通过测《。。定，最终存活《植株的平均苗干重】完成收割土壤—表面以上的植株在6！0，℃，烘干至？恒定的质《量也可？选择以鲜重作为【最终生物量如—有特殊要求苗高可作！。为另一个重点—指，标可用一个统一的】评分系统对可—见的伤害进行评分】来，。评价可观察的—毒性反应《 ： A.5 】质量控制 ！     为保证试！验的有效性对照应符！合下列形《态标准 【    》 出苗率至少7【。0％：； ： ：  《 ，  幼苗没有—可见的植物毒素【影响（如变色病【、坏死病、枯萎、】叶子和茎的畸—形）个？别种类的植株在生长！和形态上只有正常变！异； 】   ？ 试验期间对照【。组幼苗平均存活【率应高于《90％； —     特！定种类的环境条件应！一样生长《介质包含等量的人工！土壤基质、支—持介质或同样来源】的物质 ！A.：6， 数据和报告 ！ A.6.【1 数据处理 】 A.6.1！.1 单浓度—/比率试验 【    【 每个植《物种的数据都应【用适当的统计方【法进行分析报告试验！。浓度/比《率产：生的效应水平或试验！浓，度/：比率下未见效应（如！在，y浓度或比》率观：察的效应《＜x％） ！ ，A，.，6.：1.2 多浓度【/比：率试验 【  ？   根据回归【方程剂量《-反应关系》可用不同的模型如出！苗率等计数型数据E！Cx或ER》x（如EC25、E！R2：。5、EC5》0或E？R50？。）和置信《限的估算可》用逻辑回《归法、概率法、【韦博法、《寇氏法进行统计；】幼苗生？长（质量和高度）】等连续型终点指【标ECx或ER【x和可信限的估算可！用适当的《回归分析（如B【ruce-V—ersteeg非】线性回归《分析）如《。果，可能R2值为0.7！或再高些《对多：数敏感种来说—所设浓度/比率包】含2：。0％和80》％效应？如果要求NO—。。EC要求有更强大的！。分析性试验并且要在！数据分布基础上【选择 》 A.6—.2 试《验报：告 《  《   试《验报告应包括试验结！果、试验条件的【详细描述、结—果的全面《讨，论、数据的分析和结！果，分析提供结果图表】和摘要通常包—括下列内容》 ， 《     》a，）供试品 】    》 化学鉴定》数据相关《物质特？。性（：如可能正辛醇/【水的分配系数—1gPow、水溶解！度、蒸汽《压、环境归宿和行】为的信息）； ！ ：     试验【溶液的制备细节和试！验浓度的验证 【  —   b《）试验植物种 ！ ？    试验生物的！详细：资料种/亚种、所】属植物科、学名和】通用名、尽可—能详：细的来源和历史（】即提供者《的名称、萌》芽率、种子尺寸【级别、批号、—产种年？或选择的生》长季节、萌芽期【。等级）、生存力等；！   】 ， 所试验《的单：子叶：。和双子叶种的—。数量；？。   】。  选择此种—的理由； 【   》  种子贮存、处理！和维护的描》述  】   c）试验条件！ ？    — 试验设施》（如生长箱、人【工气候箱和室温【）； 《 ？ ，  ：  试验系统的【描述（如《容器直？径、容器材》料和土壤量）—。；  】   土壤》。特性（土壤质地【或，类型土壤颗粒分布】和分级、物》理化学特征包括有】机物含量、》有机碳含量》和pH？值）； 【     试【验前土壤/基质【（如：土壤、人工土壤【、沙子和其他）【的制备； 【     【若用营养液配方【描述：； ？ ？     供—试品的施用施用【方法、设备、暴露】承载量和体积（包】括化学验《证、：校准方法）、施药】期间环境条件—的描：述； 《   —  生长条件照度、！光周期、最高/最低！温度、浇水时间表】和方法、施肥；【  【。   每个容器内】的种子数量、每个】。剂，量植株数《、每个暴露率—的重复数；》 《。。     对【照的类型和数—量（阴性对照和【/或阳性对照、溶剂！对照）； 【   》 ， 试验？。周期：    ！。 d）结果 —  —   每个重复、试！。验浓度？。/比率和种子的【所有：终点数据表； 】     与！。对照比较的萌—芽数量和萌芽率；】 《 ：  ：  ：。植株生？物量（植《株干重或《鲜，重，。）测定值与》对照比率《；   ！  若？测量植株高度与【对照的比《率； 【    《。 与对照比较的由】供试：品引发？的可：见的伤？害率和？可见的定《性定量描述（—黄化、坏死、枯【萎，、叶和茎的畸形【和缺乏症）；— ， ， ： ：    如果提供可！见，伤害评分标准判断可！见伤害描述； ！   》  对于单》剂量试验《应报告伤害》率； 】    E》Cx或ERx（如】E，C50、《ER50《、EC？2，5、ER2》5）值和相》。关置：信限如果有回归分析！。提供回归方程标准】偏差单个参数估【计标准偏差（如斜】率、截距）； 【   【。  若？计算NO《EC（？和LO？EC）值； — ，     】统计过？程和假设检验的描】述； 》   》  ：数据表和试验种【的剂量-反应关系】图 ？    【 试验过程》中与方？法的：偏离：和试验中不可预【见的情况的》。描述 《