：附录A（规范—性附录） 陆—生植：物生长试验》 A【.1：。 受试物信息 【 》    受试物信】。息包括但不限于【水溶性？、蒸汽压、》结构：式、有机《溶剂中？的溶解度《、正辛？醇/水的分配系【数、吸收行》为、纯度、在水和光！中的稳？定性、？生物：降解试验《。的结：果 ？ A.2【 试验简介 【 《A.2？.1 ？试验目的 】     用【于评价在一次性施用！后，土壤中固态》。和液态的《化学：物质对？。植物幼？苗，和早期生长的潜在】毒性效应 ！ A.2.2 试验！原理 ？ 《     本附【录用于？评价：在土壤中（或—其他合适的土壤【基质：）施用供试品后对出！苗和：较高：植，物早期生长的影【响种子？种入供试品处理【过，土壤中在对照—组出苗率《达到50％后的14！d～21d内进【行评价终《点测量是可》见的：出苗率、苗干重（也！可为鲜？重）某？些情况？下为苗高也》要评价？。。植物不同部》位，上可见？。的有：害的影响这些测量和！。。观察与未处理的【。对照进行《比较  ！   根据可能的】暴露：途径供试品混入土壤！（或可能的人工【土壤基质）或喷洒】在土壤表面这—些途径要尽可能正确！代表化学品潜—在的暴露途径土【壤混合时先进行大量！散土：的混合然《后再装入盆中将所】选植：物种子种入土壤中】。表面施药时先将土壤！装入：盆，中将种子种好然后再！喷药试验体系（对照！和处：理土壤及种子）【放在适合植物生长的！环境中？ ？  《 ，  本附录》可根据？研，究目的测定剂—量-反应曲线或单剂！量/比率作》为限度？试验如果单剂量【/比率？试验超出一定—的毒性水《平（例如观察到的效！应高于x《％）要？进行范？围筛选试验测—定毒性高限和低限再！进行多剂量试验产生！剂，。量，。-，反应曲线《适当的统计分析方】法分析获得》。最敏感参数的—作用浓度《ECx或有效施用率！ERx？（如EC2》5，、ER25、E【C，50、E《R50）同样无【作用浓度（》NOEC《）和：最低作用浓度（L】。OEC）也能—计算：出来 【 A：.2.3 》参比物 —     定】期，。进行参考《物，质试验？以确认随着时间的推！移试验性能》和，特定植物的反—应和试验条件没【有明显改《变可选的方》法还有实验室用【以往：的对照组《生物量？测定或生长测量来评！价试验系统的性能】可以作为实验—室，内部质量控制 ！ A.2.4】 限度 《 《     本附录不！能给：出，由受试？物蒸发所造成的可】能伤害结果也未【测定由于直接—接触植物所产生的伤！害 ？ A.3【 设备？与材料 】     人工生】长箱、温《室或植物生长箱【生长容器应为塑【料器皿或瓷》盆钵：。 A【。.4 试验操作【。 A【.，4.1 准备自然土！/人工基质 】  《   可用含1.】5％以上《有机碳（有机质约3！％）：的沙壤土、壤—。质，沙，土或沙质黏壤土装】入，花盆：种入植物含1.5％！以，上有机碳《的，。商业盆栽土或合成混！合土均可用如—果供试品《黏土有很《。高的亲和力则不可用！黏土耕地土应—过2mm筛使—之均一并去除粗糙】颗粒最终准备—土壤的？类型：和，构造、？有，机碳、pH、盐含量！和电导率应报告土】壤应：巴，氏消毒或热处理消毒！以减少土壤病菌的】影，响 ：    】 由：于物理/化》学特征和微生物群】落的改？变自然土可能使结果！。的解释复杂》化增加变异性—这些变异依》。次为土壤持水能力】、化学结合》能力、通风》、营养？和微量？元素含量除了物理因！素的变异外在化学】特性：上的变？异如pH和氧化还原！电位可以影响—供试品的生物可用性！。 》。   ？。  为尽可能减少】自然：土的：变，异性对试验带来的】误差当受《试物不是植物—保护：产品时可用》。人工：基质代替自然土【进行试验所用基【质，应包含惰性物质【减少与供试品—。、溶剂载体》或两者的相互—反应用？酸洗过的石》英砂、矿物丝和玻璃！珠，（，如直径0.》35mm～0.【85：mm：）是：合适的惰性》物质可？减少对？供试品的吸》。收保证供试品最【大可能？地经根？吸收达到幼苗不适】合的基质包括蛭石、！珍，珠岩或其他高吸收性！。的材料应提供植物】生长所需的营养以】保证植物没有—营养缺乏的》压力可通过》化学分析或对照植】物的可见评价进行】评价： A.4！。.2 ？。供试植物 》     ！选，择，植物的种类应—考，虑，其在植物《界中分类学上的多样！性、分布特征、种的！特定生活史和自【然界分布地区差异】具，体包括下列特征【 《  ？   ？有，均一的种子》从可靠的《标准种子《来源获得《。能产生？持续、可《。靠，和一致的《萌芽以？及一致的幼苗生长；！ 》  ：   植物应适于在！实验室进行》试验在实《验室内及实验室【之间：能，够得：出可靠和可再现的】结果； ！    所》用，种的敏感性应与环】境，暴露中的植物反【应一致？；  】   所《选种已用以》往的一些毒性试验它！们在如除草剂生物】测定、重金》属筛选、盐度或矿物！压力试验或》植，物相克研究中的使用！表明对宽泛多样【性刺激存在敏—感度； 》     能！够适应试验方法【。。中的生长《条件； 《    】 符合试验有—效性标？准 — ， ，   试验所用的种！类数量根据相—关的管理《要求决定附录C中的！植物测？试试：验用：物种供参考 — A.【4.3？。 供试品的施入 】。   【  供试品应添【。。加到适？当的载体上（如水】、丙酮、《乙醇、聚乙》二醇、阿拉伯树【胶、砂）也可用包含！有效：成分和各《。种助剂？的制剂进行试—验 A.！4.4 与土—壤/人工基》质的混合 【 ？    溶于水【或可悬浮在水中的】物质可以直接配成水！溶液然后《将水溶液与》土在适当的容器【中混合此种类—型试验适合》化学品通过土壤或土！壤毛细水吸收涉及】根的吸收供试—品添加量不应超【过土：壤持水力每个浓度添！加的溶液量应一【致但要注意避—免土壤结块 【   —  水溶性低的物质！应先溶入适当的挥】发性溶剂中（—如丙酮、乙醇—）并：与沙混合用气流【将溶：剂从沙中去》除处：理的沙子与试验土】壤混合设置》只加沙子和溶剂【。的溶剂对照各处【理和：溶剂对照《应加等？量的混入溶剂并已】去除溶剂的沙子对】于固体和不溶—于水的供《试品直接和》干，土混合此后将土加入！容器中并立》即种入种子 】 ：     》用，人，工基质代替》土壤时在试验开始前！可，。直接将溶于》水的化学品溶解到】营养液中不溶于【。水但可以通过—溶，剂，。载体悬浮于》水中的可加入载体】。再，溶于营养液中不【溶于水但没有无毒】的水溶性《载体可先溶于适当】的挥发性溶剂—溶液与沙子或玻璃珠！混合在旋转蒸发仪】。上，蒸发使？化学品均匀地覆【着在沙粒或珠子【。上在分？装之前取一》部分称重的玻—璃珠用？等，量溶：剂提取进行》化学分析 》。 ： ？A.4.5 表【面施：用， —    《对于作物《。保护产？品通常用土壤表面】喷洒试？验，溶液的？。方法进？行施药进《行试验操作的—所，。有设备包括准备和】喷洒：供，试品的设备都应使试！验以精确的方式进行！能够产？生可重现性覆—盖覆盖应均》一分布在土壤—表面应避《免化学品被》设备吸收《或与设备反》应的可能（如—塑料管与亲脂—性，。化学品？易反应或某些化学】品，对钢材质设》备有腐蚀性）模【仿典型？的喷雾？器将供试品喷洒在】土壤表面通常喷【洒，量，应在正常农》。用量的范围内—用量（水的量—等）应报《告选择喷嘴》类型：以保证均一的土壤表！面，覆盖量如果应用溶】剂和载？体应设置溶剂/【。载体对照不必试验作！物保护产品的制【剂 — A.4.6 【供试品浓《度/比率的验证【 《     —浓度应经适当的分析！方法：验，证对于可溶性物【质所有浓度的验证可！以通过分《。析用于逐级稀释的】最高浓度来确认【。用校：准设：备（如校《准分析用玻璃器具、！校准喷雾设备—）进行逐级稀释【对于不溶于水的物】。。质分析添《加到土中的量如【果要证明供试品在土！壤中：。。的，均一性有必要—。进行土壤分析— —A.4.《7 试验条件 ！    — 试验条件》应与试验种和—变种的正常生长【条件相似出》苗的植物应放在可】控的气候《。培，。养箱、？人工气候箱或温【。室中进行园》艺操作维持》。正，常生长采用生长设】备时应保证植物正常！生长并与《对照组对照；应【。记录包括条件控制和！。。。足够频率（如每【日）的温度、相对】湿度、二氧化碳浓】。度，、，光（照度、》波长、？光合有效辐》射）/光周期、平均！灌溉：量等参数温室温度】通过：通风、升温和/或制！冷系统来控》。制下列？条件通常为温—室试验的推》荐条件 《     ！温度（2《2±10）℃—； 》     相对】湿度（70±25】）％； —。 ，     —光周期最少1—6h光照； —   【  照度《（，24850±—3，5，50）lx如果照】度降：到，14200 l【。x以下波长》400nm～7【00：nm除某些种—需减少照度外需补充！光照  ！   试验期—间应监测和记录【环境：条件试验《所用容器应》为，无孔：塑，料或玻？璃，容器容？器下面应垫》上托盘或碟》子，容器应定期重新摆放！以减：少植物的生长—差，异（因为生长设【施的试验条件不同】）容器应足够大以】保证正常生长 ！ ，     为【维持好？的植物？活力：可以添加《。土壤营养液通过【观察对照植物—判，断添加营养液的【需，要和时机推》荐从试验容器底部浇！水（如？用，玻璃：纤维丝？）  】   对《试验植物种和供试】。品来说特定》的生长条件是—适合的（参见—附录D）对》。照和：试，验，组植物应放置在一样！的，。试验环境条件下【然而应采取》必要的措施》防，止不：同处理间及对照与】供试品间的交叉【污，染（如挥发》物质） 》 ： A.4.8 】试验操作《 —。A.4.8.1 试！验设计 》     】同样种？类的种子种植于容器！中每个容《。器，中种：入的种子数目—应根据植物种—类、容器大小—和试验周《期决定试验期间【给植物提供充—分的生长《条件：避免过于拥》挤，根据种子大小最【大的植？株密度为3粒/【100cm2～10！粒/100cm2例！如每个直《。径为1？5c：m的容器内》可种：1株～2株玉米、】大，豆、西红柿、黄瓜或！。甜菜；？可种3株油菜—或豌豆？；可种5株》～，10株洋葱、—小麦或其他小—粒种子种《子数量？和重复容器》（一个重复》指，一个容？器容器？内的植物不是重复）！。应足以采用理想的统！计分：析方法？进行统计每个重复】用很少的大种—子，比每个重复》用小种子时变异会】较大应标记可以通】过每个容器内同样】。数量的种子降低【变异 》     设置！对照组保证观察【到的效应《与暴露的供试品【有关或？由供试品《。引，起除了不暴露—于供试品《外适当的《。对照组应与试验组】在各方？面都一样《所有被试《植物包？括对照均应来自【同一来源为避免偏离！对照和？试验组植《物应：随机分布 —     】。应避免？使，。用杀虫剂《或杀菌剂包被—的种：子（即“包》衣”种子）特殊情况！下允许使用某些非内！吸性接触《杀菌剂（如克菌【。丹、福美《双）如果有种生病菌！可以把种子在5％次！氯酸盐中浸一下然】后在流水下漂洗再晒！干允许？其他作物保护产【品的非治疗性处理】 A.】4.8.2 单【浓度/比率试验【。 《    》 ，。进行单浓《度，试验（限度试—。验）时未确定—适当供试品浓度【。需要：考虑很多因素对一般！化学品来说应—。考，虑物质的物理/化学！特，性对作物保护产品而！言需要考虑物理/化！学特性、供试品【的使用模《式、最大浓度或施用！比率、每个生长【。季节施用《次数和/《或试用品的持久性为！测定一般化学品是否！。有，植物毒素特》性通常？。。以，1，000m《g/kg《干土作为最大剂量】 A.】4.8.3 —预试验 《  —   进行正式的多！浓度的剂量反—应研究前需先进行预！试验确？定剂：量范围预试》验的浓度间距应较】宽（如0.1—mg/kg、1【.0mg/kg、】10m？g/kg、100m！g/kg和1—000？。mg/kg干土）作！物保护产品的—浓度应根据推—荐，或最大使用》浓度或施用》比率确定《如推荐/最大浓度】或施用比率的1/1！00、1/1—0和1/1 】。 A《.4.8.4— ，。。。多浓：度/比率试验 】 《    多》浓，度/比率试验—的目的？是，建立剂量《反应关系和测定【萌芽率、生》物量的ECx或【。ERx值《和/或与未给药【的对照组《比较的可观》察，效应： 》     试验浓】。度/比率的》数量和间距应足【。够产生可信的—剂量反应《关系和回归》线性方程《。并能得出估计—的ECx或ER【x值：所选浓度数量至少五！个几何级《数并加上对》照相邻的两》个浓度？梯度不应《超过3个几何级每个！处理和对照均至少】有四个平《行，总的种子数应—至少2？0，粒对某些萌芽—率低的植《物或：。。。多样化的生长特征】的植物增加》平，行，数提：高统计效力 — 》A.4.8》.5： 观察 】     在观【察期内即《对，照（溶剂对照）【出苗率达《。。到5：0％后的14d～】2，1d内定期（—至少：1周若可能每日【）观察？植物是否出苗和可见！的植物中毒死亡在】试验结？束时记录出苗率、】存活植物的生物量和！植物不同部位可见的！毒害：效应后？者包括已出幼苗形态！上的异常、》生长迟缓、枯萎、变！色、死亡和植物【发育上的影响最【终生：物量：通过测定最终存活植！株的平均苗干重完】成收割土壤表面以上！的植株在60—℃烘干至恒定的质量！也可选择以鲜重【作为最终生物—量如有特《殊要求苗高可—作为另一个重点【指标可用一》个统一的《。评分：系统对可见的伤害进！行评分？来评价可观》察的毒性反应 】 A.5 】质量：控制 ？ ：     【为保证试验》的有效？性对照应符》合下列？形态标准《 》     出苗率】至少70％； 【 ：     幼】苗没有可见的植物毒！素影响（如变色病、！坏死病？、枯萎、叶子—和茎的畸形）—个别种类的植株【在生长和形态—上只：有正常变《异； 【。    《 试验期间》对照：组，。幼苗：平均存？活率应高于90％；！    ！ 特定种类的环境条！件应一样生长介质包！含等量的人工—。土壤基质《、支持？介质或同《样来源？的，物质 】A.6 数据和【报告 A！.6：.1 数据》。处理 ？ 》A.6.1.—1 单浓度/比率试！。验，    ！ 每个植物种的数据！都应用适《当的统计方法—进，行分析报告试验【浓度/？比率：产生的效《应水平？或试验浓《度/比率下未见效】应（如？在y浓度或比率观】。察的：效应＜？x，％） ？ ： ：。 A.6.》。1，.，2 多浓度/比率试！验，   】  根据《回归方程剂》量-反应《关系可用不同的模】型如出苗率等计【。数型数据ECx或E！R，x（如E《C25？、ER25》、，E，C50或ER5【0）和置信》限的：估，算可用逻辑回归法、！概率法、韦博法【。。、寇：氏法进行统》计；幼苗生》长（质量和高度）】等连续型终点指标E！Cx或ERx和可】信限的？估算可用《适当的回归》分析（如Bruce！-Verstee】g，非线性？回归分析）如果可能！R2值为0.7或】。再高些对多数敏感种！来说所设浓》度/比率包含20】。％，和80％效应如果要！求NOEC要求有】更强大的分析性试】验，。并且要？。在数据分布基础【上选择 ！A，.6：。.2 试验报告 】 ：。     试】。验报告应包括试验】结，果、试验条》件的详细描述—、结果的全面讨论】、数据？的分析和结果分【析提供结果图表和摘！要通常包括下列内】容 【    a）—供，试品： ？     化】学鉴定数据相关物质！特性（如可能正辛醇！/水的？分配系数1gP【ow、水溶解度【、蒸汽压、环—境归宿和行为的信】息）； 》 ？     试验【溶液的制备细—节和试验浓度的验】证 》 ，     》b）试验植物种【   】  ：试验生物的详细资料！种/亚种、所属【植物科、学名—和通用名《、尽可能《。详细的来《源，和历：史（：即提供者的》名称、？萌芽率、种》子尺寸级别、批【号、产种年或选择】的生长？季，节、萌芽期等级）】、生存力等； ！ ？。   ？。 所试验的》单子：叶和双子叶种的数量！； ： 》 ，   选择此种的】理由：。；  】   种子贮存、处！理和：维护的描述 — ， 《    c》）试：验条：件 —    《 试验设施》。（如生长箱、人工气！候，箱和室温）； 】。 ，     试验！系统的描述（—如容器直径、容器】材料和土《壤，量）； —     【。土壤：特性（土《壤质地或类型土【壤颗粒分布和分级】、物理化学特征包括！有机物含《。量、有机《碳含量和《pH值）； — 《 ， ，   试验前—土壤/？基质（如土壤—。、人工？土壤、沙子和其他）！的制备；《 》   ？  若用营养液配】方描述？； 》。     供试】品的施用施》用方：法、设？备、暴露承载量【和体积（包括—化学验证、校准方】法，）、：。施药期间环》境条件？的描述； 【。   》  生长条》件照度、《光周期、最》高/最？低温度、浇水时间】表和方法、施肥； ！ ？  ？  ： 每个容《器内的种子数量、】每个剂量植株—数、：每个暴露率》的重复数； ！     —对照的？类型和？数量（阴性对照和/！或阳性对照》、溶剂对《照，），；  】   试验周期 】 ：。 ？  ：。  d）结果— —    每个重复、！试验浓度/比率和种！。子的所有终点数据】表； ？。  —。   与《对，。照比较的萌芽数量和！萌芽率； ！     植株生物！量（植株干重—或鲜重）测》定值与？对照比率《；，    ！ 若测量植株高度】与对照的《。比率；？ ？    — 与对照比》较的由供试》品引发的可见的伤害！率和可见的定性定量！描，述，（黄化、坏死、【枯，萎、叶和茎的畸【形和缺？乏症）； 》。 ？  ？   如果提供【可见伤害评分标准判！断，可见：伤，害，描述； ！    对于单剂】量试验应报告—伤害率；《。  【   ECx或ER！x（如EC50【、ER50、EC】25、E《R25）值和相关置！信限如果有回—归分析提供》回归方程标准—偏差单个参》。数，估计标准《。偏差（如斜率、截距！），； 【  ：  若？。计算：N，OEC（和LO【EC：）值； 】   ？  统计过程和【假设：检，验的描述； —  —   数据表和试】验种的剂《量-反应关系图 ！ ？ ，。   ？ 试：验过程？中与方法的偏离和试！验中不可预》见的情况的描—述 ？