附录A（规范性！附录） 《陆生植物《生长试验 【 ： A.1 受试物】信息 —     —受试物信《息包括但不限于【水溶性、蒸汽—。压、结构式、有机溶！。剂中的溶解度—、正辛醇《/水的分配系—数、吸收行为、纯】度、在水《和光中的稳定性【、生：物降解？试验的结果》 A【.2 试验简—介 ？ A.—2，.1 试验目的 】    】 用于评《价在一次性施用后】土壤中固态和液【态的化学物质对【植物幼？苗和：早，期生长的潜在毒性效！应， 《 ， A.2.2 试验！。原理 》   》 ， ，本，附录用于《评，价在土？壤中（？或其他合适的—土壤基质）施用【供试品后对出苗【和较高植物早—期生长的影响种子】种入供试品处—理，过土壤中在对照组】出，苗率达到5》0％后的14d～】21d内进行—评价终？点测量是可见的出】苗率、？苗，干重（也可为鲜【重）某？些情况？下为苗高也要评【价植物不同部—位上可见的有害的影！响这些测量和—观察：与未：处理的对照进行比较！ ， 》  ：  根据可》能的暴露途径—供试品混入土—壤（或可《能，的，。人工土壤基质）或喷！洒在土壤表面—这些途？径要尽可能》正确代表化学品潜】在的：暴露途？径土壤混合时—先，进行大？量散：土的混合然后再【装入盆中将所选植】物种子种入土壤中表！面施药？时，先将土壤装入盆中】将种子种好然—后再喷药试验—体系（对照和处【理，土壤及种《子）放？在适合植物生长的环！境中 《  》   本附录—可根据研究目—的测定剂量-反应】曲线：或单：剂，量/比率作为—限度试？验如：。果单剂量/比率试验！超出一定的毒性水】平（例如观察到的效！应高于？x％）要进行—。范，围筛选试验测定毒性！高限和低限再—进行多剂《量试验产生剂量【-反：应，曲线适当的》统计分析方法分【析获得最敏感参【数的作用浓》度ECx《或有效施用率ERx！（如EC《25、？ER25《。、E：C50、ER—50）同样无作【用浓度（NOE【C）和最低作用浓度！。。（，LOEC《）也能计算出来【 ？ ，。 A.2.3【 参：比，。物 ？ 《   ？。 定期进行参考物】质试验以《确认随着《时间：的推移试《验性能和《特定植物的反—应和：试验条件《没有明显改变可【选的方法还有实【验室用以往》的对照组生物量【测定或生长测—量来评价试验系【统的性能可以作为实！验室：内部：质量控制 】 A.2》.4： 限：度 《     【本附录不《能给出由受试—。物蒸：发所造？成的可能伤害结果】也，未测定由于直接接】触，植物所产生的伤害 ！ ？ ， A：.3 设备》与材料 《  —   人《工生长箱、温室或】。。植物生长箱生—长容器应为》塑料：。器皿或瓷盆》钵， A.】。4 试验操》作 【A.4.1 准备】自然土/人工—基质  ！   可用含—1.5％以上有【机碳（有机质约3】％）的？沙壤土？、壤质沙土或沙质黏！壤土装入花》盆种入植物含—1.5％以上有机】碳的商业《盆栽土或合成混合】土均可？用如果供试》品黏土有很高—的亲和力则不可【用黏土耕地土应过】2m：m，筛使之？均，一并去除《粗，糙颗粒最终准备土壤！的类型？。和构造、有机碳【、，。。pH、？盐含量？和，电导率应报告—土，壤应巴氏消》毒或热处理消毒【以减少土壤病—菌的：。影响  ！   由于》物理/？化学特征和微生物】。群落的改《变自然土可能—使结果的解释复杂化！增加变异《性，这些：变异：依次为土壤持—水能力、《化学结合能》力、通风、》营养和微量》元素含量除了物理】因素的变《异外在？化学特性上》的变异如pH和氧】化还原电位》可以影响供》试品的生《物，可用性 【     —为尽可？能，减少自然土的变异性！对，。。试验带来《的误差当受》。试物不？是植物保护产品时】可用人工基质代替自！然土进？行试验所用基质应】包含惰性物质—减少与供试品、溶】剂载体或两者的【。相互反应用酸洗【过的石英砂、矿【物，丝和玻璃珠（—。如直径0.35m】m，～0.85mm）是！合适的惰《性，物质可减少对供试品！的吸收保证供试品】最大可？能地经根吸收达到幼！苗不适合的基—。质包括蛭石》、珍珠？岩，。或其：他高吸收性》的材料应提供植物生！长所需的营养以保证！植物没有《营，。养缺乏的压》力可通过化学分析或！对照植物的可见【评，价进行评价 — A.【4.2？ 供试？。植物 》     【。选，择植物的种类应考虑！其，在植物界中》分类学？上的多样性、—分布：。特征、种的特定生】活史：和自然？界分布？地区：差异具体包括下【列特征 【     有均】一，的种子从可靠的【标，准种：子来源获得能产生】持续、可靠和一【致的萌芽以及—一致的幼苗生长； ！   【  植物应适于在实！验室：。进行试验在实验室内！及实验室之间—能够得出可靠—和可再现的》结果； 】  ：。。 ，。  所用种的—敏感性？应，与，环境：暴露：中的植物反应—一致； 《     ！所选种已用以往的一！。些毒性试验》它们：在如：除草剂？生物测定、》重金：属筛选？、盐度？或，矿物压力试验或植】物相克？研究中？的使：。用表：明对宽泛多》样性刺激存在敏【感度； 》     能！够适应试验方—法中的生长条—件； — ， ，    符合试验】。有效性标准 【  》   ？试验：所用：。的种：类数量根据相关的管！理要求决《定附录？C中的植《物，测试：。试验用物种供参【考 【A.4.3 供试品！的，施入：    ！ 供试品应添加到适！当，。的载体上（如水【、丙酮、乙醇、聚】乙二醇、阿拉伯树胶！、砂）也可用包含有！效成分？和各种助《剂的制剂进行试验】。 ， 《 A.4《.4 与土》壤/人工基质的【混合  ！   溶于水或可悬！浮在水中的》物质可？。以直：接配成水溶》液然后将水溶液与】土，在适当的容》器中：混合此种类型试验适！合化学品通过土壤或！土壤毛细水吸收涉】及根的吸收供试【品添加量不应超过土！壤持水力每个浓度】添加的溶液量应一致！。但要注意避》免土壤结块》 —   ？ 水溶？。性低的物质应先溶入！适当的挥发》性溶剂中（如—丙酮、？乙醇：）并与沙混合用【气流将溶剂从沙【中去除处理》的沙子与试验土壤混！合设置只加沙子和】溶剂的溶剂对照各处！理和溶剂对照—应加等量的混入溶剂！并已去除溶剂的沙】子对于固体和—不溶于水的》供，试品直接和》干土混？合此后将土加入【容器中并立即种入种！子 ？   —。 ， 用人？工基质代替》土壤时在《试验开始前可直接将！溶于：水的：化学品溶解到—营，养液：。中不溶于水但可【以通过溶剂载体悬浮！于水中的可》加入载体再溶于营养！液中不溶于水但没】有无毒的《水溶性？载体可先溶于适当的！挥发性溶剂溶液与沙！子或玻璃珠混合【在旋转？蒸发仪上蒸发使化学！。品均匀地《。覆着在？。。沙粒或珠子上—。在分装之前取—一部分称重的玻璃】珠用等量溶》剂，提取进行化学分析 ！ ： ？A.4.5》 表面施用 【   —  对？于作物保《护产品通常用—土壤表面喷洒试【验溶液的方法进行】施药进行试验—操作的所有设—备包括准备和—喷洒供试《品的：设备都应使试—验以精？确的方式进行—能够产？生可重现性覆盖覆】盖应均？一分布在《土壤表面应避免化学！品被设备吸收或与设！备反应的可能（如】塑，料管与亲脂》性化学品易》反，应或某些《化学品对钢材质设备！有腐蚀性《）模仿？典型的喷雾器将供试！品喷洒在土壤—。表面通常喷洒量【应在：正常农？用量的？范围内用量（水的】量等：）应报？告选择喷嘴》类型以保《证均一的土壤表【面覆盖量《如果应用溶》剂和载？体应设置《溶剂：/，载，体对照？不必试验作》物保护产品的制【剂 《 A.4—.6 供试品浓度】/比率的《验证 】    浓度应经】适当的分析》方法：验证对于可溶性物质！所，有浓度？的验证可以通—过分析用于逐级稀】释，的最高浓度来确认】。用校准？设备（如校准分析用！玻璃器具、校准喷雾！设，备，）进行逐《级稀释对于》不，溶于水的物质分【析添加到土中的量如！果，要证明供试品—在土：壤中的均一性有【必要：。进行土壤《分析 】A.4.7 —试，验条件？   】  试验条》件应与试验种和变种！的正常生长条件【。相似出苗的植—物应：放在可控《的气候培养箱、【人工气候箱或温【室，中进行园艺操—作，维持正常生长采用】生，长设备？时应保证《植物正常生长—并与对照组对照；应！记，录包括条件控制【和足够频率（如【每日）的温度、相】对湿度、二氧化【碳浓度、光（照度】。、波：长、光合有效辐射）！/光：周期：、平均灌溉量等参数！温室温度通》过通风、升温—和/或制冷系—统来控制下》列条件通《常为温室试验的推荐！条件 ？ ，     】温度：（22±10）【℃；  ！  ： 相对湿度（70±！25）％； ！。     光周期！。最少16h光—。照；： —    照度（24！850±35—。50）lx如果【照度：降到14200 】lx以下波长400！nm～？700？n，m除某些种》需减少照度外需补】充光照 —     试验！期间应监《测和：记录环境条件试【验所用？。容器应为《无，孔塑料或玻璃容器容！器下面应垫上托盘或！碟子容器应定期重】新摆放以减》少植物的生长差【异（因为生长设施】。的试验？条件不同）容器应】足够大以保》证正：常生长 —     为】维持好的植物活【。力可以添加》土壤营养液通过【观察对照植物判【断添加营《养，液的需要《和时机推荐从试验容！器底部浇水》（如用玻《璃纤维？丝）：。 —    对试—验植物？种和供？试品来说特定的生长！条件是适合的（【参见附录《。D）对照和试—验，组，植物应放《。置在一样的试验环境！。条件下然《而应采取必》要的：措，施防止不同处理间】及对：照与供试《品间的交叉污—。染（如挥发》物质） 》 ？ A.4.8 【试验操作 ！ A.4《.8.1《 ，试验设计《   】  同样《种类的种子种—植于容器中》每个：容器：中种入的种子数目应！根据植？物种类、容器大【小和试？验周期？决定试验期》间给植？物提供充《分的：生长条件《避免过于《。拥，挤根：据种子大《小最大的植株密【度，为3粒/100cm！2～1？0粒/100c【m2例？如每个直《径为15cm的【。容器：内可种1株～2【株玉米、大豆、西红！柿、黄瓜或甜菜；可！种，3株油菜或》豌豆；？可种5株～10株洋！葱、小？。麦或：其他小粒《种子种子数》。量和：重复容器《（一：。。个重：复指一个《容器容器《内的植？物不是重复）应足以！采用理想的统计分析！方，法进：行统计每个重复【用很：少的大种《子比每个重复用小种！子时变异《会较大应标》记可以通过每—。个容器内同样—数量的种子》降低变？异 ？    【 ，设置对照组》保证观察到的—效，。。应与：暴，露的供试品有—关或由供试品引起】除了不暴《露于供？试品外适《当的对照《组应与试验》组在各方面都一样】所有被？。试植物包括对照均应！。来自：同一来源为》避免偏离对照和【试验组植物应随机】。分布 【     应避免】使用杀虫剂或杀菌】剂包被的种子（即“！包衣”种子）—特殊情况下允许使】用某些非内吸性接触！杀菌剂（如克菌【丹、：福，美双）如果有种生病！菌可以把种子在【5％：次氯酸盐中浸一下然！后在流水下漂洗再晒！干允许其他作物保】护，。产品的？非治疗性处理 ！ A.》。4，。.8：.2 ？单浓度/比》率试验？ ？  《   进行》单浓度试验（限度】试验）时未确定【。适当：供，试品浓？度，。需要考虑很多因素对！一般化学品》来说应考虑物—质，的物理？/化学特性对—作，物，。。保，护，产品而言需》要考虑？物理/化学特性、供！试品的使用》模式、最大浓度【或施用比率、每【个生长季节施用次】数和/或试用品【的持：久性为？测定一般化》学品是？否有植物毒素特【性通常以10—0，0mg/kg干土作！为最：大剂量 【 A.4.8【.3 预试》验   ！。  进行《正式的？多浓度的剂量反应研！究前需先进行预试】验确定剂量范围【预试验的《浓，度，间距应较宽》（如0？.1：mg/？kg、1.0mg/！kg、1《0mg/kg、1】00mg/》kg和1《000m《g/kg《干土）？作物保护产品的【浓度应根据推—。荐或：最大使用《浓度或施用比—率确定如《推，荐/最大浓度或施用！比率的？1/：100、1》/，10和1/》1 A.！4.8.4》 多浓度/》比率试验 】     多浓度！/比率？试验的目的是—建，立剂量反应关系和】测，定，萌芽率、《生物量的EC—x或ERx值和【/，或与未给药的—对照：组比较？。的可观察效应— ：     】试验浓？度/比率的数量【和间距应《足，够产生可信的剂量反！。应关：系，和，回归线性方程—并，能得出估《计的ECx》或ER？。x值所选浓》度数量至《少，五个几何级数并【加上对照相邻—的两个浓度梯度不】应超过3个几何级】每，。个处理和对照均至少！有四个平行总的【。种子：数，应至少20粒对某些！萌芽率低《的植物或多》样化：。的，生长特征的植物【增加平行《数提高统计效力 】 ？ A.4.—8.5 观察 】   —。  在观《察期：内，即，对照（溶剂对照【）出苗率达到—50％后的1—4d～21d内定】期（至少1周若可能！每日）观察植物是】否出苗和可》。见的植物《中毒死亡在试—验结束时《记，录出：苗率、存活植物的生！物量和植物不同部位！。可见：的，毒害效应后者—包括：已出幼苗《形，态上：。的异常、生长—迟缓、枯萎、变【色，、死亡和植物发育】上，的影响最终生物量】通过测定最终—存活植株的平均【苗干重完成收割土】壤表面以上》的植：株在60℃》烘干至恒《。定的质量也》可选择以鲜重作【为最终生物量如【。有特殊要求苗高【可，。作为另一个重—点，指标可用一个—统一的评分系统对】可见的伤害》进行评分来评价可】观察的？毒性反应 — A.5 质！量控制 【    》 为保证《试验的有效》性，对照：应符合下列形态【标准 【     出苗率】至少70％；—。 —   ？ 幼苗没有可—见的植物毒素影【响（如变《色病、坏死病—、，枯萎、叶子和—茎的畸形）个别种】类的植株在》生长和？形态上只《有，。。正常变异；》 》     试验期间！对照组幼苗》。平均存？活，率应高于90％；】   】  特定种类—的，环境条件应一样生长！介质包含等量的人工！土壤：。基质、支持介质或同！样，来，。源的物质《 ： 《A.6 数据和报】告 《 A.6.1 ！数据处理 【 A.6—.1.1 单浓【度/比率《试验 ？ ， ？     》每，个植物种的数—据，都应用适当的统计】方法进？行分析报告》试验浓度/比率【产生的效应》水平或试《验浓度/比率下未】见，效应（？如在y浓度或—比率：观察的？效应＜x％） 】 A》.6：.1.？。2 多浓度》/比率试验 【 ，    — 根据回《归方程剂量》-反应？关系可用不同—的模型？如出苗率《等计数型《数据ECx》或ERx（如EC】25、？ER25、EC5】0或ER50—）和置信限的估算】可，用逻辑回归法、概】率法、韦博》法、寇？氏法进行统计；幼】苗生长（质量和【高度）等连》续型终点指标E【C，x或：ERx和《可信限？的估算可用适当的】回归分析（如Br】u，ce-Vers【te：eg非线性回归分析！）如果？可能R2《值为0.7》或再高？些对多数敏感种【来说：。所设：。浓度/？比率包含2》0％和8《0％效？应如果？要求NOEC—。要求有更《强大的？分析性试验并且要】在数据分布基—础上选择 — A.6.2！ 试验报告》    ！ 试：验报：告应包括试验结果】、试验？条件的详《细描述、结果—的全面？讨论、数据的分【析和结果分》析提供结《果图表和《摘，要通：常包括下列内容【 ， ： ？    a）—供试品 【 ： ，   化学鉴—定数据相关物质特性！（，如可能正辛醇—/水的分配系数【1gP？ow、水溶解度、】蒸汽压、环境归宿和！行为的信息》）；： ？     试】验溶液的制》备，细节和试《验浓度的《验证 —     b【）试验植《。物种 【     试验生物！的详细资料种/亚】种、所属植物科、学！名和通用《名、尽可能详细【的来源和历史（【即，提供者的名》称、萌？。芽率：、种子？尺寸级别、批号【、产种年或选—择的生？长季节、萌芽期【等级）、生存力【等； — ：    所》试验的单子叶和双】。子，。叶种的？数量； 【     —选择此种的理由【； 【    种子—贮存、处理和维护的！描述 ？ ： ？    c）试【。验，条，。件 —     试—验设施？（，如生：长，箱、人工气》候箱和室温）；【 《。     试【验系统的描述（如容！。器直：径、容器《材料和土壤量）； ！    】 土壤特性（土【壤质地或类型土壤】颗，。粒，分布和？分级、物理化学【特征包括有机—。物含量、有机碳含】量，和pH值《）； 】  ：  试验前》土壤/基质》（如土壤、人—工土壤、沙子—和其他）的制备；】 》     若用营】养液配方描述； ！     供！试品的施用施用【方法、设备、暴露承！载，量和体积（包—。括化学验证、—校准方法）、施药】期，间环境条件的描【述； 《     】生长条？件照度？、光周期、最高/最！低温度、浇水时间表！和方法、《施肥：； 》   《 ， 每：个容器？内的种？子数量、每个—剂量植株数、每个】暴露：率的重复《数； 《  》   对照的—类型和？数量（阴性对照和/！或阳性对照、溶【剂对照）； ！  ？ ，。  试验周期 【   【。 ， d）结果 【 《。    每个重复、！试验浓度/比率和】种，子的所有终》点数据表； 【 ，   》。  与对《照比较的萌芽数【量和萌芽率；— 《    》 植株生《物量（植株干重或】鲜重）测定值与对】照比：率； 《  》。。   若测量植株高！度与对照的》比率； 《  —   与对照比【较的由供《试品引发的》可见的伤害率和【可见的定《性定量描述（黄化、！坏死、枯《萎、叶和茎的畸形和！缺乏症？）； —     如果提！。供可见伤害评分标】准判断可见伤—害描述；《。 ？   》。  ：对于单剂量试验应报！告伤害率； — 》    ECx或】ERx（如EC50！、ER50、E【C25、ER2【5）：值和相？关置信限如果有回归！。分析提？供回归方程标准【偏差单个参数估计标！准偏差（如斜率、截！距）； 【     若计算！NO：EC（和LOEC）！值； 【 ，    《统，计过程和假设检验】的描述； ！     数据表】和试验种《的剂量-反应关【系，图   ！  试验过程中【与方法？的偏离和试》验，中不可预见的—情，况的描述 —