附录A（规范】性附录） 》陆生植物生长试验 ！ A—.1 受《试物信息 【    — 受试物信息包括】但，不限于水溶性、蒸】汽压、结构》式、有机溶》剂中的溶解度、【正辛醇/水的分配系！数、吸收《行为、？纯度、在《。水和光中的稳定【性、生物降解—试验的？结果 A！.2 试《验简：。介 《 A《。.2.？1 试？。验目的？   】  用于评价在一次！性，施用后土壤中固态】和液态的化》学物质对植物幼苗】。和早期生长的潜【在毒性效应 】 A《.2.2 试验原】理 ： 《。     本附录】用，于评价在土壤中【（或：。其他合适的土壤基质！）施用供试品后对】出苗和较《高植：物早期生长的影响种！。子种入供试品处【理过土壤中在—对照组出苗率达到5！0％：后的14d～—21d内《进行评价终点测【量是可见的出苗率】、，苗干重（也可—为鲜重）某些情况】下为苗高也要评【价植物不同》部位上可见的有害】的影响这些测—量和观察与未处理的！对照进行比较 ！     根】据可能的暴露途径供！。试品：混入土壤（或可【。能的人工土》壤基：质）或？。喷洒在？。土壤表面《这些途径《要尽可能正确—代表：化学品潜在的暴【露途径土壤混合【时先：进，行大量散《土，。的，混合然？后再：装入盆？。中将所选《植，物种子种《入土壤中《。表面施药时先将土】壤装入盆中》将种子？种好然后再喷药试验！体系（对照和处理】土壤及种子）放在适！合植物生长》的环境？。中 ？ ？    《 本附录可根据研】究目的测定剂量【-反：应曲：线或单剂《量/比率作为限度】。试验如？果单剂量/比率试】验超出一定》的毒性水平（—例如观察到的效应】高于x％）要进行范！围筛选试验测定毒】性高限和低》限再进行多剂量【试验产生剂》量-反应曲线适当】的，统计分析方法—分析获得最敏感参】。数的作用浓度—ECx或有效施用】率E：Rx（？如EC25、ER2！5、EC50、E】R50）同样无【作用浓度（NO【EC）和《最低作用浓度（L】OEC）也能—计算出来 — A》.2.3 》。参比物 【     定期进！行参考？物质试？。验，以确认？随着时间的推移试】验性能和特》定植物的反应和试验！条件没有明显改变可！选的方法《还有实验室用以【往的对照组生物量】测，定，或生长测量来—评价试验系》统的性能可以作为】实，验室内？部质量控制 ！ ， A.2.4 限】度 ：  — ，。  本附录不能给】出由：受试：物蒸发？所造成的可能伤害结！果也未测定由—于直接接触植物【所产生的伤害 】 A.3 】设备与？材料 【     人工生】长箱：。、温室或植物生【长箱生？长容器应为塑料器皿！或瓷盆？钵 A.！4 试验操作 】 ： A.4.—1 准备自然土/人！工，基质 【    《 可用含1.5【％以上有机碳（有】机质约3％）的沙】壤土、壤《。质沙土或《。沙质：。黏壤：土装入花盆种入【植物含1.5—％以上有机》碳，。的商业？盆栽土？或合成？混合土均可用如【果供试品黏土有很高！的亲和力则不可用】黏土耕？地，土应过2mm筛【使之均一并去除粗糙！颗粒最终准备土壤的！类型和构造、有【机碳：、pH、盐含量和】电，导率：。应报告土壤》应巴氏消《毒或热处理消毒以】减少土壤病菌的影响！    ！ 由于？物理/？化学特？征和微生物群落【。的改变自然土可能使！结果的解《释复杂化增加—变异：性这些变异依次为】土壤持水能力、化】学结合能力、通风】、营养和微量元素含！量除：了物理因素的—变异外在《化学特性上的变【异如pH和氧—化还原电《位可以影响供—试，品的生物《可，用性 —     为尽】可能减少《自然土的变异性对】。试验带来的误—。。差当：受，试物不？。是植物保护产品时可！用人工？基质：代替自然土进行【试验所？用基质应包含惰【。性物质减少与—。供试品、溶剂载体或！两者的？相互反应用酸洗过】的石英砂、矿物丝】和玻璃珠（如—直径0.35—mm～0.85m】m）是合适的惰性】物质可减《少对：供试品的吸收保【证供试品最大可能】地经：根吸收达到幼—苗不适合的基质包】括蛭石、珍珠—岩，或其他高《吸收性的材料应提供！植物：生长所需的营养【以保证植物》没有营养缺乏—的压力可通》过化：学分析或对照—。植物的可《见评价进行评价 】。 A.4.！。2 供试植物 】。    【 选择植《物的种类应》考虑其在植物界中分！类学上的《多样性、分布特征、！种的：特定：生活史和自然界【分布地区差异具体包！括下列特征 — ，    【 有均一的种—子从可靠《的，标准：种子：来，源获得能《产生：持续、？可靠和一致的萌【芽以及？一致的幼苗生—长；  ！   植物应—适于在？实验室进行试验在实！验室内？及实：验室之间能够得【。出，可靠和可再现的结】果； ？。 ，。。。  》   所用种的敏】感性应与环境暴【露中的植物反应一致！；，   】  所？。选种已用以往的【一些毒性试验它们】在如除草剂生—物测定、重金属筛选！、盐度？或矿物压力试验【或植物相《克研究中的使用【表明：对宽泛？多样性刺《激存在？敏感度； 】 ：   ？ 能够适应试—验方法中的生长条】件，； 》     符【。。。合试：。验有效性《标准 【    《 试验所用的种类数！量根据相《关的管理要》求，决定附？录C中？的植：物测试试验》用物种供参》考 【A.4.3 —供试品的《施入 《  》   供试品应添】加到适当的载体上】（如水、丙》酮、乙醇、聚—乙，二醇、？阿拉伯树《胶，。。、砂：）也可用包》。含有效成分和—各种助剂的制剂【进行试验《 A.】4.4 与土壤/人！。。工基质的混合 】     】溶于水或可悬浮在】水中：。的物质可以》。直接配成水溶液然】。后，将水溶液《与，土在适？当的容器《中，混合：此种类型试验—适合化？学品：通过土？。壤或土壤毛细水吸】收涉及？根的吸收供》试品添加量不应超】过土壤持水力每【个浓：度添加的溶》液量应一致但要【注，意避免土壤结块 】   【  水溶《性低的物《质应先溶入适当【。的挥发性溶剂中（如！丙酮、？乙醇）并与沙—混合用气流将—溶剂从？沙中去除处理—。的沙子与试验土壤混！合设置只加》沙，子，和溶剂的溶》剂对照各《处理和溶剂》对照应加等量的【混入溶剂《并已去除溶剂的【沙子对于固体—和不溶于水的供试品！。直接和干《土混合？此后将土《加入：容器：中并立即《。种入种子 】 ：    用人—工基质代替土—壤时在试验开始前可！直接将溶于水—。的化：学品溶？解到营养液中不【溶于水但可》。以通过？溶剂载体悬浮于【水中的可《加入载体再溶于营养！液中不溶于水—但没有无毒》的水溶性载体—。可先：溶于适？当的挥发《。性溶剂溶液与沙【子或玻璃《珠混合在旋转蒸【发仪上蒸发使—化学品均匀地—覆着在沙粒或珠子】上在分装《之前取一《部分称重的玻璃珠】用等量溶剂》提，取进行化学分析【 A.】4.5 《表，面施用 】    《 对：于作物保《护产品通常用土【壤，表面喷洒试》验溶液的方法—进行施？。药进行？试验操作的所有【设备包括准备—和喷洒供试》品的设？备都应使试验以精】确的方式进》行能够产生可重现】性覆盖覆盖应—均一分布在土壤表面！应避免化学》品被设备吸收或与设！备反应的《可能（如塑》料管与亲《脂性：化，学，品易反应或某些化】学品对钢材》质设备有腐蚀性【。），模仿典型《的喷雾器将供试【品喷洒在土壤—表面通常喷洒量应在！正常农用量的范围内！用量（水的量—等）应报告选择喷】嘴，类型以保证均一【的土壤？表面覆盖量如—果应用？。溶剂和载体应设【置溶剂/载体对照】不必试验作》物保护产品的—制剂 — A.4.6 】供试：品浓度/比》率的验证 —     浓！度应经适当的分析方！法验证对于可—溶性物质所有浓度的！验证可以《。通过分？析用于逐级稀释【的最高浓度来确认】用校准？设备：（如校准分析—用玻：璃器具、校准喷【雾设备）进行—逐级稀释对于不溶于！水的物质分》析，添加到土中的量【如果要证明供试【品在土壤中的均【一性有必要》进行土壤分析 】 ： A.《4.7 试》验条：件 — ，    试验条件】应与试验种和变种】的正常生长条件相】似出苗的植物—应放在可控的气【候培养箱、人工气】候箱或温室中进【行园：。艺，操作维持正常生长】采用生长设备时【。应保证植物》正常：。生长并与《对照组对《照，；应记录包括条件】控制和足够频率【。（如每日）的温【度、相对《湿度、二氧化碳浓】度、光（照度、波】长、光？。合有效辐《射）/光《周期、平均灌溉量等！参数温室温度通过】通风、升温和/【或制冷系统》来控制下列条件通常！为温室试《验的推荐《。条件 《     】温度（22±10）！℃； —    》 相对湿度（70±！25）％； ！     光周期！最少16h光照【。； 》 ：。。 ，   照度（24】850±《3550）lx【。如果照度《降到14200【 lx以下波长40！0nm～7》00nm除某—些种需减少照度外】需补充光照》 ：     试！。验期间应《监测和记录环—境条件试验所用【容器应为无》孔塑料或《玻璃容器容器下面应！垫上：托盘或碟子容器应】定，期重新摆放》以减少植物的生【长差异（《因为生长设施的试】。验条件？不同）容器》应足：够大以保《证正常生长 】     【为维持好的植物活】力，可以：添加土壤《营养液通过观察对照！植物：判断添加营》养液的？需要和？时机推荐从试验容】。器底部浇水（—。如用玻璃纤维丝）】 ： ？     对试【验植物种和供—试品来说特》定，的生长条件是适合的！。（参见？附录：D）对？。照和试验组植物应放！置在一样的试验环境！条件：下，然而应采取》。必要的措《施防：止不：同处理？间及对？照与供？试品间的交叉—污染：（如挥发《物质） 】 A.4.》8 ：试验操作《。 ？。 A.4.【8.1 试验设计 ！   【  同样种类—的种子种植于容器中！每个容器中种入【的种子数目应根据】植物种类、容器大】小和试验周期决【定试验期间给植物提！。供充分的生长条件避！免过于？拥挤根据种》。子大：小最：。大的：植株密度为3粒【/100cm—2～10粒/100！。cm2？例如每个直径为15！cm的？容器内可种1—。株～2株玉》。米、大豆、西红【柿、：黄瓜或甜菜；—可种3株油菜或豌】豆，；可种？5株～？10株洋葱、小麦或！其，他小粒种子种子【数量和重《复容器？（一个重复》指一个？容器容？器内的植物不是【重复）应足以采用】理想的统计分析方】法进行统计每个【重复：。用很少的《大种子比每个重复】用小种子时变—异会较？大应标记可以通过】每个容器内同样数量！的种子？降低变异 —  》。   设置对照【组保证？观察到的效应与【暴露：的供试品有关或由】供试：品引起除《了不暴露《于供试品外适当【的对照组应与试验】组在各？方面都一样所有被试！植物包括《对照均？应来：自同一？来源为避免偏—。离对：照和试验《组植物应随机分【布 ： ：。 ？   ？。 应避免使》用杀：虫剂或杀《菌剂包被的种子（即！“包衣？”种子）特》殊情况下允许—使用某些非内—。吸性接触杀菌剂（】如，克菌丹、《福美双）《如果有种《生病菌可《。以把种？子在5％次氯酸【盐中浸一《下然后在《流水下？漂，洗再晒干《允许其？他作物？保护产？。品的非？治疗性处理》。 —A.4.8.2 】单浓度/比》率试：验   ！ ， 进行？单浓度试验（限度试！验）时未确定适当供！试品浓？度需要考虑很多【因素对一般化—学品：来说应考虑》物质的物《理/化学特性—对作物保护产品而】。言需要？考，虑物理/化学特性】、供试？品的使用模式、最】大浓度或施用比率、！每个生长季节施【用次数？和/或试用品的【持，久性为测定一—般化学品是否有植物！毒素特性《通常以？1，000mg/kg干！土，作为最？大剂量 ！A.：4.8.3》 预：试验 【    《 进行正式的多【浓，度的剂量反应—研究前需先进—行预试验确定剂量】范围预试验的浓度间！距应较宽（如0.】1mg/kg—、1.0m》。。g/k？g、：10：mg/kg、100！mg/kg和—1000m》g/kg干》土）作？物，保护：产品的浓度应根据推！荐或最大使用浓度】或施用比《率确定如推》荐/：最大浓？。度或施用比率—的1/100—、1/10》。和1/1《 《 A.4.—8.4 多浓度【/比：。率试验 》     】多浓：度/比率试验的目的！是建立剂《量反应关《系和：测定萌芽率、生【物量的ECx或【ERx值和/或与未！给药的？对照组？比较的可观察—效应  ！   试验浓度/】比率的数量》和，间距应足够产生【可信：的剂：量，反应关系和回—归线性方程并—能得出估计的EC】。x或ERx值所选浓！度数量至《少五个几何级数并加！上对照相邻的两个】浓度梯度不应超【过3个几何级—每个：处理和？对照均至《。少有四个平》行总的种子数应至少！20：粒对某些萌》芽率低？的，植物或多样化的【生长特征的》植物增加《平行数提高统计【效力 ？ A.4.！8.5 观》察 ：     ！在观：察期内即对照（溶】剂对照）《出苗率达到50％后！的14d～21d内！定期（至少1周若】可，能每日）《观察植物是否出苗和！可见的植《物中毒死亡在试验结！束时记？录出苗率、存活植】物的生物量和植物不！同部：。位可见的毒害效应后！者，包括已出幼苗形态上！的异：常、生长迟》缓、枯萎、变色、死！亡，和植物发育上的影响！最，终生物？。量通：。过测定最终存—。活植株的平均苗干】重完成收割土壤【表面以上的植株在6！0℃烘干至》恒定的质量也可【选择以鲜重作为最】终生物量《如有特殊要》求，苗高可？作为另一个》重点指？。标可用？一个统一的评分【系统对可见的伤害】进行评分来》评，价可观察的毒—性反应 《 A.【5 质量控制—    ！ 为保？证试验？的有效性对照应【符合下列形》态标准 【     —出苗率至少70％】；   ！  幼？苗没有？可见的植《物，毒素影响（》如变色病、坏死病、！枯萎、叶《子和茎的《畸形：）个别种《类的植株在生—长和形态上只有【正常变异； ！。    》。 试验期间》对照组幼《苗平均存《活率应高于》。90％；《 ： ： ：    特定种【类的环境条》件应：。一样生？长介质包含等量【的人工土壤基质、】支持介？质或同？样，。来源的物质 — ： ： A.6 数据和报！告， A【.6.？1 数据处理 ！。 A.6.1】。.1： 单浓度/比率【试验 —     每个植！物种的？数，据都：应用适当的统计方法！进行分析报告试验】。浓，度/比率产生的效】应水平或试验浓【度/比？率，下未见效《应（如在y浓度或比！率观察的效应＜【x％） 【 A.《6.1.2》 多浓度/比率试】验 》   《  ：根，据回归方程》剂量-？反应：。关系可？用不：同的模？型如出苗率等计【数型数？据ECx《或ERx《（如E？C25？、ER25、E【。C50或《ER：50）和置信限的估！算可用逻《辑回归法《、概率法《、韦博法、》寇氏法进行统计；幼！苗生长？（质量和《高，度）等？连续型终《点指标EC》x或E？R，x和：可信限的估算可【用，适当的回归分—析（如Bruce-！Verste—eg非线性回归【分析）如果可能【R2值为0.7或再！高些对多数》。。敏感种来说所设【浓度/比率包含20！％和80％效—应如果？。要求NO《E，C要求有更》强大的分析性—试验并且要在数据分！布基础上选择 】 A.6【.2 试验报告 ！ 《    试验报告应！包括试验结果—、，试验条件的详细描】述、结果的全面讨论！、数：据的分析和结果分析！提供：结，果图表和摘》要通：。常，包括下列内容 【 》 ，   a）》供试品 】    《 化学鉴定》数据：相关物？质特性（如可能正】辛醇/水的分配系】数1：。gPow《、水溶解度、蒸【汽压、环境》归宿：和行为的信息）；】 《     试【验溶液的《制备细节和试—验，浓度的验证 —。  —   b）试验植】物，种 《     试】。验，。生物：的详细？。资料种/《亚种、所《属植物科、学名和通！用名：、尽可能《详，细的来源和历—史（即提供者的名】称、萌？芽率、种子尺—寸级别、批号、产】种年或选择的生长】季，节、萌芽期等级【）、生存力等； ！    【 所试验的单子叶】和双：子叶种的数量—。； 《   》  选择《此种：的理由； — ？     种子贮】存、处理和》维护的描述 】     【c，）试验条件 【。    【。 试验设施（如生】长箱、人工气候箱】和，室温）？； ？。 ： ：    《试验系统的描述【。。（如容器直径—、容器材料和土壤量！）；： ：    【 土壤特性（—土壤质？地或类型土壤—颗粒分布和分级、物！。理化学特征包括【有机物含量、—。有机碳？含，。量和pH值）—； 《 ，     试【验前土壤《/基质（如土—。壤、人工土壤、沙】子和其他）的—制备； ！   ？。 ，若用：。营养液配方》描述； — ？ ，   供试品—的施用施用》方法、设《备、暴？露，承载量和体积—。（，包括化学验证、校】准，方法）、《施药：。期间环境条件的描】述；： —    生长条件照！度、光周期》、最：高/最低温度—、浇水时间表和方法！、施肥； 】   《  每个容器—内的种子数量、每】个剂量？植株数？、每个暴露》率的重复数；—    ！ ，。对照的类型和—数，量（阴性对》照和/或《阳性：。。对，照、溶？剂对照）；》 ：   —  ：试验周期 — ： ，     d）结】果 》。     每个重！复、试？验浓度/比率和【种子：的所有终点数据【。表； 【     》与对照比较的萌芽】数量和？萌芽率； 》 《     植株生】物量（植株干重或鲜！重）测定《值与对照比率—；   ！  若？测量植株高度与【对照的比《率； 】    与》对，照比：较的由供《试品引发的》可见的伤害率和可】见的定性《定量：。描，述（黄化、坏—。死、枯萎、叶和茎的！畸形：和缺乏症）； 【     ！如果提供可见伤害】评分标准判断可【见伤害描《述； 《  》  ： 对于单剂量试【验应报告伤害率；】。 《     —ECx或ERx（】。如EC？50、ER50、】E，C，25：、ER2《5）：值和相关《置信限如果有回归】分，析提：供回归？方程标？准偏差单个参数【估，计标准偏差（如斜率！、截距？）；  ！   若计算N【OEC（和LO【EC）值； —。 》   ？。 统：计过程？和假设？检验的描《述； ？ ， ，    — ，数据表和试验—种的剂？量-反应《关系图 ！    试验—过程中与方法的【偏离和试《验中不可《。预见的情况》的描：。述 ： ，