， 附录A（规范性附！录） 陆生植物生长！试，验 》。。 A.《1 受试物信息 】  —   ？受试物？信息：包括但不《限于水？溶性、蒸汽压、结构！式、有机《溶剂中的溶解度、正！辛醇：/水：的分配系数、吸收】行为、？纯度、在《水和：光，中的稳？定性、生物降解【试，验的结果 》 A.2 ！。试验简？介 《 A.2.1】 试验目的 】     用】于评价在一次—性施用后土》壤中固态和液—态，的化学物质对植物】幼苗和早期生—长的潜在毒》性效应 ！A.2.2 试验】原理 》  《   本附》录，用于评价在》土壤中（或其他【合适的土壤基—质）施用《供试品后对出苗和较！高植物早期生长的】影响种子种入供试】品处理过土》壤中在对照组—。出苗：率达到？50％后的14d～！21d内进行评价终！点测量是可见的出苗！率、苗干重（—。也可为鲜重）某些情！况下为苗《高也要评价》植物不同部》位上：可见的有害的影响】这些测？量，和观察？与未：处理的对照进行比】较 》   《  根据可》能的暴露途径供试】品混：。入土壤（或可能的人！工土：壤基质？）或喷洒在土壤表】面这些途径》。。要尽可？能正确代表化学品潜！在的暴露途》径土壤混《合时先进行大量【散土的混合然后再装！入盆中将所选—植物种子种》入土：壤中表面施药时【先将土壤装入—。盆中将种子种好然后！再喷药试验》体系（？对照和处理土壤及】种子：）放在？适合植物生》长的环境中 —     ！本附录可根据研究目！的测：定剂量-《反应曲？线，或单剂量/比率作】。为限度试验如果【单剂：量/：比率试？验超出一《定的毒性《水平：（例：如观：察到的效应高于x％！）要进？行范围？筛选试验测》定毒：性高：限和低限再进—行多剂量试验产生剂！量-反应曲线适当】的统：计分析方《法分析获得》最敏感？参，数的作用《浓度ECx或有效施！用率E？。Rx（？如EC25、—。。ER25、E—。C50、ER—50）同样无作用】。浓度（NO》EC：）和最低作》用浓度（L》OEC？），也能计算出来— ？。 ，。 A.2.3【 参比物 【    — 定期进《行参考物质》试验以确认随着时间！的推移试《验性能和《特定植？物，的反应和试验条【件没有？。明显改变《可选的方法还有实验！室用以往的》对，照组生物量测定或】生长测量来评价【试验系？统的性能可以作为实！验室内部《质量：。控制 — ：A.2.4 —限，度 《     【本附录不能给出【由受试物《蒸发所造成的可能】伤害结？果也未？测定由于直》。接接触植物所—产生的伤害》 —A.3 设备—与，材料 《     】人工生长箱、温室】或植物生长箱生长容！器应为塑料》。器皿或？瓷盆钵 — A《.4 试《验操作？ A.】4，.1 ？准备自然土》/人工基质 —   【  ：可用：含1.？。5％以上有机—碳（有？机质：约3％）的》沙壤土、壤质沙【。土或沙？质黏壤土《装入花盆种》入植物？。含1.5％以—上有机碳的商业【盆栽土或合成混合土！均可用？如果：供试品黏土有很【高的亲和力则不【可用黏土耕》地土应过2mm【筛使之均一并去除】粗糙颗？粒最：终，准备土壤的类型和构！造，。。、有机碳《、pH、盐含量和】电导：率应报告《土壤应？巴，氏消毒或热处理【消毒以减《少土壤病菌》的影响？   】。。 ， 由于物理/化学】特，征和：微生：物群落的《改变自？然，土可能使《。结果的解释》复杂化增加变—异性这些变》异依：次为土？壤，持，水能力、化》学结合能力》。、通风？。、营养和微量元【。素含量除了》物理：因素的变异》外，在化学特性上的变】异如pH和氧—化还原？电位可以影响供试】品的生物可》用性 —     为【尽可能减《。少自然土的变异性】对试验带来的误【差当受试物不是【植物保护产品—时可用人工基质代】。替自然土进行试验】所用基质应包含【惰性物质减少与供】试品、溶剂载体【或两者的相互反应用！酸洗过的《石英砂？、矿物丝《和玻璃珠（如直【径0：.35mm～0.8！5mm）是合—。适，的，惰性物质可减—少对供试品的吸收保！证供试品最大可能】地经：根吸收？达到幼苗不适合【的基质包括蛭—石、珍珠岩或—。其他高吸收性的材】料应提供植》物生长所需的营养以！。保证：植物没有营养缺乏】的压力可通过化【学分析？或对照植《。物的可见评价进行评！价 ： A.【4.2 供》试植物 —     【选择植物的》种类：应考虑其在》植物界中分》类学上的多样—性、分布特征、种的！特定生活史和—自然界？分布地区差异具体包！括，下列特征 【     有均！一的种子《从可靠的标》准种：子，。来源获得能产生【持续、可靠和一致】的萌芽？以及一致的》幼苗：生，长；  ！   植物》应适于在实》验室：进行试验在实验室内！及，实验室之间能够得】出可靠和可再现的结！果； 《 ，  《   所用种的敏】感性应与环》。。境暴露中《的植物反应一致；】   】  所选种》。已，用，以往的一些毒性试】验它们在如除草剂生！物测定、重金属筛选！、盐度或矿物压力】试验或植物相克【研究：。中的使用表明—对宽泛？多样：性刺：。激存在敏感度—。。； 【    能够适【应，试，验方：法中的？生长条件； 】     符合！试验有效性标—准 — ，。   ？。 试验所用》的种类数量根据相关！的，。管理要求决定附录】C中的植物测—试试验用物种—供参：。考 《 A.4—.3 供试品的施入！  【   供试品应添】加到：适当的载体上—（如水、丙》酮、乙？醇、聚乙二醇、阿拉！伯树胶？、，。砂）也？可用包含有效成分和！各种助剂的制剂进】行试验 【。 A.4.4 与！土壤：/人：工基质的混》合，  【   溶于水—或可悬浮在水中【的物：。。质可以直接配成水】溶液然后《将水溶液《与土在适当》的容器中混合—此种类型试验适【合化学品《通过土？壤或土壤毛》细水吸收涉及根的吸！收供试品添加量【。不，应超过土壤持水力】。每个浓度添加的溶液！量应一致但要注意】避免土壤《结块 》 ： ，。    水溶—性低的物质应—先溶入适当的挥发性！溶剂中（如丙酮、】乙醇）并与沙混合】用气流将《溶，剂，。。从沙中去除》处理的沙《子与试验《土壤混合设》置只加沙子和溶剂】的溶剂对照》各处理和《溶剂对照应加—等量的混入》溶剂并已去》除，。溶剂：的，。沙子对于固体和【不，溶于水的供试品【直接和干土混合【此后将？土加入容器中—并立即种入种子 】    】 用人工基质代【替土壤时在试验【开始前可直接将溶】于水的化学》品溶解到营养液中】不溶于水但可以通过！。溶，剂载体悬《浮于水中的可加入载！体再溶于营养液【中不溶于水》但没有无毒的—水溶性？载体可先《溶，于适当？。的挥发性溶剂溶液与！沙子或玻璃珠混【合在旋转蒸发—仪上蒸发使化学品均！匀地覆着在》沙粒或珠《子上在分装之前取】一部分称重的玻【。璃珠用？等量溶剂《提取进行《化学分析 【 ？A.4.5 表【面施用 —    — 对于作物保护【。。产品通常用土—壤表面喷洒试验【溶液的方法》进行施？药进行试验操—作，的所有设《备包括准备和—喷洒供试《品的设？备都应使试验—以精确的方》式进行能《够产：生可重现性覆盖【。覆，盖应均一分布在土】壤，表面应？避免化学品被设【。备吸收或与设备反】应的可能（如—塑料管与亲脂—。性，化学品？易反应或某些化【学品对钢材质设备有！腐蚀性）模仿—典型的喷雾器将【。供试：品喷洒在《土壤：表面：通常：喷洒：量应在正《常农用量的范围内用！量，（水的？量等）应报告选【择喷嘴类型以—保证均一的土壤表】。面覆盖量《如果应用溶剂—和载体应设置—溶剂/载《体对照不必试验作】物保护产品》的制剂 【 A？.4.6 》供试品浓度/比率】的验证 】     浓度【应经适当的分—析方法验证对于可溶！。性物质所有浓度的验！证可以通《过分析用于逐—级稀释的最高浓度来！确认用校准》设，备（如校准分析用】玻璃器具《、校准喷雾设备）】进行逐级稀释对于不！溶于水的物质—分析添加到土中【的量如？果要证明供》试品在土壤中的【均，一性有必要进行土壤！分析 【。 A.4.7— 试验条件 【。  》   试验条件应】与，试验种？和变种的正常生长条！件相似出苗的植物】应放在？可控的？气候培养箱》、人工气候》箱或温室《中进行园艺操作维】持正：常生长采用生长设】。备时应保证植物【正常生？长并与对照组对照】；应记录包括—条，件控制和足够频【率（如每日》）的：温度、相对湿度、】二氧化？碳浓度、光（照【度、波长、光合有】效辐射）/光周【期、平均灌溉量等】参数温室温度通过通！风、升温和/—或制冷？系统来？控制下列条件通常】为温室试验的推荐条！件 【    温度（【2，2，±10）℃； ！。   》  相对《。湿度（？70±25》）％；？   】 ， 光：周期最少《1，6h光照； ！     —照度：。（24850—±35？。50：。）lx如果照—度降到14》200 l》x以下波长400n！。m～700》nm除？某些种需减少照度外！需补：充光照 ！ ，   试验期间【应监测和记录环【。境条：。件，试验所用《容器应为无孔塑【料或玻？璃容器容器下面应垫！上托盘或碟子—容器应定期重—新摆放以减》少植物的生》长差异？（因为生长设—施的试验条件—不同）容器应足够大！以，保证正常《生，长  】   为维持好的植！物活力可《以添加土壤营养液通！过观察对照植物判】。断添：加营养液的需要和时！。机推荐从试验容器底！部浇水（如用玻璃】纤维：丝）： ？ ：     》对试验植物种和供试！品来说特定的生长条！件是适合《的（参见附录D）】对照：和试验组植物应放置！。在一样的试验环境条！件下然而应采取必要！。的措施防《止不同处理间及【对照与供试品间的】交叉污染（如—挥发物质） ！。 A.《。4.8 试验操作】 A【.4.8.》1 试？验设：计， ：     】同样：。种类的种子种植【于容器？中每个？容，。。器中种入的种—。子数目应根据—植物种类、容—器大小和试验周期】决定试验期间给植物！提供充分的生长条】件避免过于》拥挤根据种子大小最！大的植株密度为3】粒/100c—m2～1《。0粒/？100cm2例如每！个直径为15c【m的容器内可种【1，株～2株玉》米、大豆《、西红柿、黄瓜或甜！菜；可种3》株油菜或豌豆—；可种？5株～10》株洋葱、《小麦或其他小—粒种子种子数量和重！复，容器（一个重—复指一个容器容【器内：的植物不是重—复）应足以采用理】想的统计分析方法进！行统计每个重复用很！少的大种《子比每个重复用小】种，子时变异会较大应】标记可以通过每个容！。器内同？样数量的《种子降低《变异 【     设置【对照组保证观察到】。的效应与暴露的供试！品有关或由》供，试品引起除》了不暴露于》。。供试品？外适：。当的对照《组应：与试验组在各方面】都一样？所有被？试，植物包？括对照均应来自同】一来：源为避免《。偏离对？照和试验组植物应随！。机分布 —   》  应避免使用杀虫！剂或：杀菌：剂包被的种子（即】“包衣”种子）【特殊情况下允—许使用某些非内吸】性接触杀菌剂（如克！菌丹：。、福美双）》如果有种生病菌【可，以把种子在5％【次氯酸盐中浸一下】然后在流水》下，漂洗再晒干允许【其他作物保护—产品的非治疗—。性处理 【 A.4.8.2！ 单：。浓度/比率试验 ！  》   进《。行单浓度试验—（限度试验）—。时未确定适当供试品！浓度需要考虑很多因！素，对一般化学品来说】应，考虑物？质的物？理/化学特性对作】物保护产《品而言需要考虑物理！/，化学特？性、供试品》的使用模式、—最大浓度或施—用比率、每》个生长季节》施用次数《和，/，或试用？。品的持久性》为，测定：一般化学品是否有植！物毒素特性通常【以1000mg/】。kg干？土作为最大剂量 ！ A》.4.？8.3 《预试验 】 ，    进》。行正式的《多浓度的剂量反应】研究前需《先进行预试验确定】剂量：。范围预试验的—浓度间距应较—宽（如0.1m【g/kg《、1：.0mg/kg、1！0mg/kg、10！0mg/k》g和100》0mg/《kg干土）作物【保护产品的浓度应】根据推？。荐或最大使》用，浓度或施用》比率确定如》推荐/最大浓度【。。或施用比率》。。的1/100、1】/10和1》。/1 》。 ？A.4.8.4【 多浓度/》比率试验 】    》 多浓度《/比率试验的—目，的是建？立剂量反应》关，系和测定《萌芽率？。、生物量的ECx】或ERx值和/【或与未给药的对照组！比较的可观察效【应 《  《  ： 试：验浓度/比率的数量！。和，。间，距应足够产》生可信的剂量反【应关系和回》归线性方程并能【得出估计的ECx或！ERx值《所选浓度《数量：至少五个几何级【数，。并加上对照相邻的】两个浓度梯》度不应超过3个几何！级每个处理和对照均！至少：有四个平行总的种子！数应至少20—粒对某些萌》芽率低的植物—或多样化的》生，长特：征的植物增加平行数！提高统计效力 】 A》。.4.8.5 观】察，   】  在观《察期内即对照—（溶剂对《照）出？。苗率达到《50％后的14【d～21d内定期】（，。至少1周若可能每日！）观察植物是否【出，苗和可见的》植物中毒死亡在试】验结束时记录出苗】率、存活植物的生物！量和植物《不同：部位可见的毒害效应！后者包括已出幼苗形！态上的？异常、生长》迟缓、？枯萎、变色》、死亡？和植物发《育上的影响最—终生物量通过测定最！终存活植《株的平？均苗干重完成—收，割土壤表面以上的植！株在60℃烘—干至恒定《的质量？也，可选择以鲜重作为】最终生物量》如有特殊《要，求苗高可作》为另一个重》点指标可用一个【统一的评分系统【。对可见的伤害—进，行评分来评价可观察！的毒性反应 — 》A.5 质量—控，制  】 ，。 ， 为保证试验的有】效性对照应符合【。下，列形态标准 ！     出【苗率至少70—％；： — ，   幼苗没有可】见的植？物毒素影《响（如变色病、【坏死病、枯萎—、叶子和茎的畸【形）个别《种类的植株在生长】和形态上只有正常】。变异； —     试】验期间？对照组幼苗平均【存活率应高》于90％； ！     特定】种类的环境条件【。应一样生长介质包含！。等量的人工》土壤基？质、：支持介？质，或同样来《源的物？质， A【.6 数据和报告】 《。 A.6.1 】数据处理 】 A.6.1【.1 单《浓度/比率试验 】     ！每个植物种的数据】都应用适当的—。统计：。方法进行《。分析报？告试验？浓度/比率产—生的效应水平或试验！浓度/比率下未见效！应（如在y浓度或比！率观：察的效应＜x％【）， ：。 ： A？.6.1.》2 ：多，浓度/比率试—验， ， ，    【 根据回《归方程剂量-反应关！系可用不同的模【型如出苗率》等计数型数据ECx！或ERx（如EC】2，5、E？。R25？、EC？50或ER50【）和置？信限的估算可用【逻，辑回归法、概—率法：、韦博法、寇氏法】进行统计；幼苗生长！（，质量和？高度）等连续型【终点指标E》Cx或ERx和【可信：限的估算《可用适当《的回归分析（—如Bru《ce-？。Versteeg】非线性？回归：分析）如果可能R2！值为0？.7或再高些对多】数敏感种《来说所设浓度/比率！包，含，20％？和，80％效应如果要求！NOEC要求—有更强大《的分析性试验并且要！在数据分布基础【上，选择 《 《A.：6.：。2 试？验报告 —  《。  ： 试验报《告应包括《试验结果、》试验条件的详细描】述、结果的全—面讨：论、数据《的分析和《结，果分析提供结果【图表和摘要通常【包括下列内容 】    【 a）供试品 】     】化学鉴定数据相关物！质特性（如可能正辛！醇/水的分配—系数1gP》。ow、水溶解度【、蒸汽压《、环境归宿和—行为的信息》）；  ！   试验溶液的制！备细节和试验浓度】的验证 — ：     b）试】验植：物种  ！   试验生物的】详，细资料种/》亚种、所属植—物科、学名和—通用名、尽》可能详细《的来源和历史—（即：。提供者的名称、萌】芽率、种子尺寸级别！、批号？、产种年或选—择的生长季节—、萌芽期《等级）、《。生存力等《。；  】   所试验的单子！叶和双子叶》种的数量； ！     选【。择此种的理由； 】   【  种子《贮存、处理和维护】的，描述： 》     c）试】验条件 ！    试验—设施（？如，生长箱？、人工？气候：箱和室温）； ！     试】验系统的描述（【如容器直径、—容器材料和土—壤，量）；？ ： ？ ，  ：  土壤《特性：（，土壤质地或类型土】壤颗粒分布和—分级、物理》化学特征包括有机物！含量、有机碳—含量和pH值—）； — ，    《 试验前土壤/基】质（如土壤、—人工土壤《、沙子和《其他）的制备—。。； ？   —。  若用营养液配】方描述； 】 ，     供试【品的施？。用施用方法、设备】、暴露承载》量和体积（》。包括化学验证—、校准方法）、施】药期间环境条件【的描：述； 【 ，    生长条件照！度、光周期、最【高，/最低温度、浇【水时间表和方法【、施肥； 》   【  每？个容器内的种子数】量、每个剂量植株数！、每：个暴露率的重—复数； — ， ：    对照的类】型和数量（》阴性对？照和/或《阳性：对照、溶剂对—照）； 】  ：   试验周期 】    】 ，d，。）结果 】     每个重复！、试验浓度/比率】和，种子的所有终点【数据表； 》。 ？ ，     与对照比！较的萌？芽数：。量和萌芽率； 】     植！株生物量《（植株干重或鲜重】），测定值与对照比率】； ？    【 若测量植株高【度与对？照的比率《；  】   与对》照比较的《由，供试品引发》的可见？的伤害率和可见的】定性定量描》述（黄化《、坏死、枯萎—、叶和茎的》畸形和缺乏症）； ！。。     ！如，果，提供可见伤害评分标！准判断可见伤害【描述； —。 ， ，     对于单】剂量试验应报告伤害！率； 】。    EC—x或E？Rx（如EC5【0、E？。R50、EC—25、E《R2：5）：。值和相关置信限如】果有回归分析提供】回归方程标准偏【。差单个参数估计标】准偏差（如斜率、】截距）？； ：。 ？     若【计，算NOEC（—和L：OEC）值； 】     统！计过程和假设—检验的？描述； 【  ？   数据表—和试：验种的剂量-反【应关系？图 ： ，   —  试？验过程中《与方：法的偏离和试—验中不可预见的情】况的描述 —