附录A（—规范性附录） 【陆，生植物？生长试验 — A》.1 受试物信息 ！。    】 受试物信息包括】但不限于水溶—性、蒸汽压、—结构式、有机溶【剂中的？溶，。解度、正辛醇—/水的分配系数、吸！收行为、纯度、在】水和光中《的稳定性、生物【降解试验的结果 ！ A.2【 试验简介 — 《 A.2.1 试】验目的 【 ，    《 用于评《价在一？次性施用后土壤中】固态和液态》的化：学物质对植物幼苗和！早期生？。长，的潜在？毒性效应 【 ？A.2.2 试验】原理 》 ： ， ， ， ， 本附录《用于评价在土—壤中：（或其他《。合，适的土壤基质）施用！供试品后对出—。苗和较高植》物早期生长的影响】种子种入供试品处】理过土壤中在对【照组出苗率达到【50％后的》14d？～21d内》进行评价终点测【。量是可见《的出苗？率、苗干重（也【。可为鲜重）》某些情况下》。。为苗高也要评价植物！不同部位《上可见的《有害的影响》这些：测量和观察与未【处理的对照进—行比较 【     根【据，可能的暴露途径供试！品混入土壤（或可】能的人工《土壤基？质）或？喷洒在？土壤表面这》些途：径要尽可能》。正确代表化》学品：潜，在的暴露途径土【壤混合？。时先进行大量散【土的混合然后再【装入盆中将所—选植物种子》种入土壤中表面【施药时先将土壤装】入盆中将种子种好然！。。后，再喷药试验》体系（对照和处理土！壤及种子）放—。。在适合植物生长的环！境中 【  ：   本附录—可根据研究目的测定！剂量-反应曲—。。线或单剂《量/比率作》为限：。。度试验如《果单剂量/比—率试验？超出一定的毒性【水，平（：。例如观察到的效应高！。于x：％）要进《。行范围筛选试验测定！毒性高？限和：低，限再进行多剂量【试验产生剂》量-反应曲》线适当的统》计分析方法分析获得！最敏感参数的—作用浓度《ECx或有效施用率！。ERx（《如EC？25、ER2—5、EC50、【ER：。50）同《样无作用浓度（N】OEC）和最低作】用浓度（LO—EC）？也能计算出来 】 A.2.】3 参比物 】  《   定期进行参考！物，质试验以确认随着】时间的推移》试验性能和特定植】物的反应和》。试验条？件没有明显改变【可选的方法还有实】验室用以往的—对照组生物量测定或！生长测量来评价【试验系统《的，性能可以作为实验】室内：部质量？控制 — A.2.—4 限度 】   《  ：本附录不能给出由】受，试物蒸发所造成的可！能伤：。害结果也未测定【由于直接接触植物所！产生的？伤害 】A.3 设备与【材，料 》     人工】生长箱、温室或【植物生长箱生长容】器，应为塑料《器皿或瓷《。盆钵 】A.4 试验操作】 》。 A.4.1 【准备自？然土/人工基质【  【 ，  可用《含1：.，5％以上有机—碳（有机《质约3％）的沙壤土！。、壤质沙《土或沙质黏壤土装】入花盆？种入植物含1.5％！以上有机碳的—商业盆栽土或合成】混合土均可》用如果供试品黏【土有：很高的亲和》力则不可用黏土耕地！土应：过，2mm？筛使：之，均一：并去除粗糙颗粒最】终准备土壤的—类型和？构造、？。有，机碳、pH、盐含】量和电？导率应报告土壤应巴！氏消毒或热处理消】毒以减少土壤病菌】的影响 —   》  由于物》。理/化学特征和微生！物群落的改变—自然土可《能使：结，果的解释《复杂化？。增加变？异性这些变异依【次为土壤持水能【力，、化学结《合能力、《通风、营养》和微量元素含量【除，。了物理因素的变异】外在化学特性上【的变异如pH和氧】化还原电位》可以影响供试品【的生物？可用性 —  《   为尽可—能减少自然土—的变异性对试验带来！的误差当受试物【不，是植物保护产品【。时可用人工基质代】替自然？土进行试《验所用基质应包含惰！。。性物质减少与供试】品、溶剂《载体或两者的—。相互反应用》酸洗过？的石英砂、矿物丝和！玻璃珠（《如直径0.35mm！～0.？8，5mm）是合—适的惰性物》质可减少对供试【品的吸收保证供【试，品最大？可能地经根吸收达到！。幼苗不适合》的基质包括蛭—石、珍珠岩或其他】高吸收性的材—。料应提供植物—生长所需的营—。养，以保证植物没—。有，营养缺乏的压力【可，。。通过化？学分：析或对照植》物，。的可见评价进—。行评价 【 ：A.4.2 供试】。植物 》     选择！植物：的种类应考虑—。其在植物《界中分类学上的多】样性、分《布特征？、种的特定生活史和！自然界分布地区【差异具体包》括下列特《征   ！  ：有均一的种子从可】靠的标准种子来源】获得能产生持续、】可靠：和一致？的萌芽以《及一致的幼》苗生长； — ？     植物应适！于在实验室进行试】验在实验室内及【。实验室之间能够得】出可靠和可》再，现的结？果，； 》。。     所用】种的敏感性应与环境！。暴露中的植物—反应一致； ！     —所选种已用以—。往的一些毒》性试验它们在—如，除草：剂生物测定、重【金属筛选、盐度或】矿物：压力试验或植物相】。克研究中的》使用表明对》。宽泛多？样性刺激存在敏感】度； 【  ：   能够适—应试验方法中的【生长条件；》  【   符合试验有】效性标？准 《     试】验所用的种类数量】根，据相关的管理要求决！定附录C中的植物】测试试验用物种供】参考 》 A《.4.3 供试【品的施入 】    》 供试品应添加到】适当：的载体上（如水【、丙酮、乙》醇、聚？。乙二醇？、阿：拉伯树？胶、砂）也》可用包含有效成分和！。各种助剂的制剂【进行试验 ！ A：.4.4 与土壤】/人工基质的混合 ！ ， ，     溶】于水：或，可悬：浮在：水中的？物质可以直》接配成水溶液然后将！水溶液？。与土在适当》的，容器中混合此种【类，型试验适合化学【。品通过土壤》或土壤毛《细，水吸收涉《及根的吸收》供试品添《加量不应超过—。土壤持水力每个浓度！添加的溶液量应一致！但要注意避免土壤】结块 《     水！溶性低的物质—。应先溶入适》当的挥？发性溶剂中（—如丙酮、乙醇）并与！沙混合？用气流将溶剂—。从沙中去除》处，理的沙子与试验土】。。壤混：合设置只加沙子和】溶剂的溶《剂，对照各处理和溶剂对！照应加等量的混入溶！剂并已去除溶剂的沙！子对于固体和—不溶于？水的供试品直接和】干土混合此后—将土加入容》器中并立《即种入种子 —。 ？ ：    用》。人工基质代替土壤时！在试验开始前—可直接将溶于水的化！学品溶解到营养液中！不溶于水但可以【。通，过溶剂载《体悬浮？于水中的可》加入载体再溶于营养！液中不溶于水但没有！无毒的水溶性—载体可先《溶于适当《的挥发？性溶：剂溶液与《沙子或玻璃珠混【合在旋转蒸发仪上蒸！发使化学《。品均匀地覆着在沙粒！或珠子上在分装【之前取一部分称【重的玻璃珠用—等，量溶剂提取》进行化学分析 【 》A.4.5 表【面施：用 》     对【于，作物保？护产：品通常用土壤表面】喷洒试验溶液—。的方法进行施药【进行试验操》作的所有设》备，包括准？备和喷洒供试品的】。。。设备：都应使试验以精确】的方式进行能够产】生可重现《性覆盖覆盖应—均一分布在土—壤表面应避免化学品！被设备吸收或与【设备：反，应，的可能（如塑料管与！亲脂性化学品—易反应或某些—化学品对钢材质设】备有腐蚀性）模【仿典型的喷雾器【将供试品《喷洒在土壤表面通】常喷洒？量，应，在正常？农用量的范围内【用量（水的量—等，）应报告选择喷嘴】类型以保证》均一的土壤表面【覆盖量？如果应用溶剂和载】体应设置溶》。剂/载体对》照不必试验》作物保护产品的【制剂 】A.4.6 供【试品浓度/比率的验！证， ：  》。   浓度应—经适当的《分，析，方法验证对于可溶】性物质所有浓度【的验证？可以通过分析—用于逐级《稀释：的最高浓度来确【认用校准设备（如】校，准分析用《。玻璃器具、校准【喷雾设备）》进行逐级稀释对【于不溶于《水的物质分析添加到！土中的量如果要证】明供试？品在土壤中的—均一性有必要进行】。土，。壤分析 ！A.4.7 试验条！件 《     【试，验条件应与》。试验种和变种—的正：常生长条件》。相似出苗的植物应放！在可控的气候培【养箱、？人工气候箱或温【室中进行《园艺操？作维持？正常生长采用—生长设？备时：应保证植物正常【生长并与对照组对照！；应记录《包括条？件控制和足够频率】（如每日）的—温，度、相？对湿度、二氧化碳】浓度：。、光（照度、波【长、光合有效—辐射）/《光周期、平均灌【溉量等参数温室温度！通过通风《、升温和/或—制冷系？。统来控制下列条【件通常为温室试【验的：推荐条件《  【   温度（—22±10》），℃； 】  ：  相对湿》度（70《±25）％； 【   【 ， 光周期最少16h！。光照；？ ？     照】度（24850±3！55：0）lx《如果：照度降到14200！ l：x，以下波长400nm！～700nm除某些！种需减少《照度外需补充光照】  【  ： 试验？期间应监《。测和记录环境条【件试验所用容器应为！无孔塑料或玻—璃，容，器容器下面应垫上托！盘或碟子《容器应定期》重新摆放以减少【植物的生长差—异（因为生长设施的！试验条件不同）容】器应足？够大以保证正常【生长 】。   ？ 为维持《。好的植物《活力可？以添加土壤营养液通！过观察对照》植物判断《添加营养《液的需要和时—机，推荐从试《验容器底《部浇水（如用玻璃】纤，维丝） 《 ？ ， ， ，   对试验植【物，种和供试品来说【特定的生长条件是适！合的（参见附录D】）对照和试验组植】物应放置在》一样的？试验环？境条件？下然而应采取—必要：的措施防止》不同处理间及对【照与供？试品间的交叉污【染（：如挥发物质） ！ A.4—.8 试验操作 】 ？ ， A.4.8.【1 试验《设计 【。 ，    同样种类】的种子种《植于容器中》每个容器中》种，入的种子数》目应根据植物种【类、容？器大：小和试验周期决【。定试验期间给—植物提供充》分的生？长，条，件，。避免过于拥挤根据种！子大小最大的植株】密度为3粒/—100c《m2～？1，0粒/？100c《m2例？如每个直径为1【5cm的容器—内可种？1株：～2：株玉米、大豆、【西红柿、黄瓜—或甜菜；可种—3株油菜或豌豆；】可种5株～10【株洋葱、小麦或【其他小粒《种子种子数量—和重复容器（一个】重复指一《个，。容，器容：。器内的植《物不：是重复）应足以采用！理想的统计分—析方法进《行统计每个重复【用很：少的大种子》比每个重《。复用小种《子时：变异会较大应—标记：可以通过每个容器内！同样数量的种—子降低变异 】  《   设置对照组】保证观察到的效应与！暴露的供试品有关或！由供试品引起—除了：不暴露于《供试品？外适当的对》照组应？与试验组在各方面都！一，样所：有被试？植物包括对照均应来！。自同一来《源为避免偏离对照】和试验组植》物应随机分布—  【   应避免使【用杀虫剂《或杀菌剂《。包被：的种子（即“包衣】”种子？）特殊情况》下允许使用某些【非内吸？性接触杀菌剂（如】克菌丹、福美双）】如果有？种生病菌可》以把种？子在5？％，次氯酸盐中浸一下】然后在流水下漂洗再！晒干允许其》他作：物保护产品的非治疗！性处理？ ？ A《.4：.8.2 单浓【度/比率《试验： ： ？    《 进行单浓度试验（！。限度试验）时未【确定适？当供试品《浓度需要考虑很多】因素对一《般化学品《。来说应考虑物质的】物理/化学特性对】作物保护产品而言需！。要考虑？物理/化学特性、】供试品的使用模【式、最大浓》度或施用比率—、每：。个生长季节施—用，次数和/或》试用品的持久性为】。测，定一般化学品—。是，否有植物毒素特性】通常以？1000《。mg/k《g干土作为最大剂】量 ： A.4】.8.3 预试验 ！    】 进行？正式的？多浓度的《剂量反应《研究前需《。先进行预《试验：。确定剂？量范围预试验的浓度！间距应较宽（如0】.1mg/》。kg：、1.0mg/k】g、10mg/k】g、100》mg/kg和10】00m？g/：k，g干土）《作物保？护，产品的浓《度应根据《推荐或最大使用浓度！或施用比率确—定如推荐《/最大浓度或—施用比率的1/10！0、1/10—和1/1 】 A.4.8.4！ 多浓度/比—率，试验 — ，     多浓【度/比率试验—的目的是建立剂量反！应关系和测》定萌芽率、生物【量的：。ECx或ERx值】和/或与《未给药的对照组【比较的可观察—。效应 —     试验浓！度/比率的数—量和间距应》足，够产生可信的剂量反！应，关系和？回归线性方程并能得！出估计的EC—x或ER《x值所选浓度—数量至少五个—几何级数并加—。上对：照相邻的两个—。浓度梯度不》应超过3个几—何，级每个处《。理和对照均至—少有四？个平行总的》种子数应至少2【。0，粒对某些萌芽—率低的植物或多样化！的，生长特征的植物增加！平行数提《高统计效力 ！ A.4.8.5！ 观察 ！  ：  在观察期内即】对照（溶剂对照【）出苗率达到50％！后的1？4，d，～，21d？内定期（至少1周若！。可，能每日）观察植【物，是否出？苗，和可见的植物中毒死！亡在试验结束时记录！出苗：率、存活植物的生物！。量，和植物不同》部位：。可，见的：毒害效应后者—包括已？出幼苗形态上—的异：常、生长迟缓、【枯，萎、：变色、死《亡和：植物发育上的影响】最终生物量通—过测定最终存活【植株：的平均苗干重完成收！割土壤表《。面以上的植》株在60℃烘—干至恒定的质量也可！选择以？鲜重作为最》终生物量如有—特殊要求苗高可作为！另一个重点指标可用！一个统一《的评分系统对可【。见的伤害进行评分来！。评价：可观察的《毒性反应 ！ ，A.5 质量控制 ！ 《     为保证】试验的有效性—对照应符合下列【形态：。标准 》     【出，苗率至？少70？％，；   ！  幼苗没有可见的！植物毒素影》响，。（如变色病》、，坏死病、枯萎、叶】子和茎的畸形）【。个别种？类的植株在生长【和形态上只有正【。常，变异：； ？。 ？     试验【期间对照组》幼苗平？均存活率应》高于90％》； 《     特】定种类？的环境条件应一样】生长介质包含等量】的人工土壤基质【、支持介质》或同样来源的—物质 — A？.6 数据和报告】。 《 A.6.1 数！据处：理 A.！6.1.1 单【浓度/？比，率试验 《 》    每个植物种！。的数：据都应用适当的统计！方法：进行分析《。报告试验浓度/比率！产生的效应水—平或试验浓》度/比率下》未见效应《（如在y浓度或比率！观察的效应＜x【％，）， ： A.6.1！.2 多浓度/比率！试验 》     【。根据回归《方程：。剂量-反应关系可】用不同？的模型如出苗率等】计数型数《据ECx或ERx（！如E：C2：。。5、ER2》5、EC50或【E，R50）和置信限的！估算可用逻》辑回归？法、概率《法、韦博法、—。寇氏法进行统计【；幼：苗生长（质量—和高度）《等连：。续型终点指标E【Cx或ER》x和可？信限：的估算可用适当的回！归分析（如Br【uce-Vers】teeg非》。线性回归分析）如】果可能R《。2值：为0.7或》再高些对多数—敏感种？来说：所设浓？度/比率包含20】％，和80？。％效：应如果要《求NOEC》。要，。求有更强大的分【析性试验并且要在数！据分布基《础上选？择， A【.6.2 试—验报告？   】。 ， 试验？报告应包括试—验结：。果，。、试验？条，。件的详？细描述？、结果的全面讨论、！数据的？分析和结果分—。析提供结果图—表和摘要通常—包括：下列内容 ！     a—）供试品 】     —化学鉴定数据相关】物质特性（如可能】正，辛醇/水《的，分配系数1gPo】w、水溶《解度、蒸汽压、环】境归：宿和行为的》信息：），； 》   《 ， 试验溶液的制备细！节，和试验？浓，度的验证 ！。     b—）试验？植物种 ！。    试验生【。物，。的，详细资料种/亚种】、所属？植物科？、学名和通用—名、尽可能详细的】来源和？历史（即提供者的名！称、萌芽率、—种子尺寸级别、批号！、产种年或》选择的生长季—节，。、萌芽期等级）【、生存力等； 【 ，。  》   所《试验的单子叶—。和双子叶种》的数量；《   】  选择此种—的，理由； 》 ， ？    《种子贮存、处理【和维：护的描述 】 ，     c）【试验条件 】     试验】设施（如生长箱、人！工气候箱和室—温）； 】。     》试验系统《的描述（如容—器直：径、容器材料和土】壤量）； 》 》  ：  土壤特性（土壤！质地或类型土—壤颗粒分布》和分级、物理化【学特征？包，括有：机物含量、有机碳】含量和p《。H值）； 【     试】验前土壤/基质【（如：土壤、人工》土壤、沙子和其【他）的？制备；？    ！。 若用营养液配方】描述；？ ，     ！供试品的施》用施用方法、—设备、暴露》承，载量和体积（包括】化学验证、校—准方法）、施药【期间环境条》件的描述； ！     生长条！件照度、《光周期、最高/【最低：温度、浇水》时间表和方》。法、施肥《；   ！  每？个容器内的种子数量！、每个剂量植株数】。、每：个暴：露率的重复数； ！     对！照的类型和数量（】阴性对照和》/或阳性对》照、溶剂对》照）； 《  —   试验》周期 》 ，     —d）结果 — ，。     每】个重：复，、试验浓度/比率和！种子的所有终点数】据表； 】     与对【照比较的萌》芽数量和萌芽率；】  【   植株生物量（！植株干重或鲜—重）测定值与对照】比率； ！  ： ， 若测量植》株高度？与对：照的：比率； ！    与对照【比较：的由供试品引发的可！见的伤？害率和可《见的定性定量描述】（黄：化、坏死、枯—萎、叶？和茎的畸形和缺乏】症）； 《 ：     如果！提供可见伤》害评分标准判—断可见伤害描—述，； 《 ？ ，   ？。对于单剂量试验【应报告伤害率—；  】   ECx—或ERx（如—EC：50、E《R50、EC—25、？ER2？5）值和相关置信限！如，。。果有：回归分析提》供回归？。方程标准《偏差单个参数估计】标准偏差《（如斜率、截距）；！ 》   ？  若计算NOEC！（和LO《EC）值； — 《   ？  统计过程和假】设检验的描述； 】。 》    数据表【和试验种《的剂量？-反应关《系图 】 ，。  ： 试验过程中—与方法的偏》。离和试？验中不可预见的【情况的描《述 ？