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E.?8 悬浮微生【物的检测
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E.【8.1 悬浮【微生物的《采样装?置有以下两类
【
》1 采用无源采样!装置如培养皿—。
2 !采用有源采》样装置如撞击采样】器、离心采样器、过!滤采样器《
《
E.8.2【。 :。空气洁净环境中【悬浮微生《物的静态《或空态检测前应【对各:类表面进《行擦拭消毒但—。不,得对室内《空气进行熏蒸、喷】洒之类的消毒动【态检测均不得—对表面?和空气进行消—毒
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E.【8,.3 ? 沉降菌检》测应符合下列—要,求
【1 ?使用直径9》0mm(Φ》90)?的培养皿采样当【采,用其他直径培养皿时!应使其总面积和【Φ90?。皿总面积相当
【
2 培!养皿中灌注胰蛋【白酶大?豆琼脂培养基必须留!样,作阴性对照
!。
3 》培养皿表面应经【适,当消:毒清:洁处理后布置在有】代表性的地》点和气?流扰:动极小的地点在【乱流洁净室内—培养皿不应布—置在送风口正下【方
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4 — 当用户没有—。特,定要求时培养皿【。应布置在地面及其】以上0.8m之内的!任意:高度
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5 每》一间洁净室或—每一个控制区应设】1个阴性《对照皿
】
6 动态监测时!也可协商布点位【。置和高度《
《
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7 ? 培养皿数应—。不少于?微粒计数浓度—的测点数如工艺无】特殊要求《应大于等于表E.8!.,。3中的最少培—养皿数?另外各?加1个?。对照:皿
】
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8 当延长】沉降:时间时可按》比例减少最》少培养?皿数为防止脱水【最长沉降时间—。不,宜超过1《h当所?。需沉降时间超—过1:h可重?叠多:皿连:。。续采样除非经过【验,证,证明更长《。。的沉降时间可—以基本按比例增加】菌落数?
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,9 培养皿应【从内向外布置—从外向内收皿
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10— 每布置》完,1个皿皿盖》只允许斜放在皿【边上:对照皿?盖挪开即盖上
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1—1 布皿前和【收皿后均应用双层包!装保护培养》皿,以防污染《
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12 收皿!。。。后皿:应,倒,置摆放并应及—时放入培养箱培养】在培养箱外》时间不宜超》过2h如无专业【标准规定对于检测】细菌总?数培养温《度采用(35~37!)℃培养时间—为(24~4—8,)h;对于检测真菌!培养温度(2—7,~29)℃培养【时间3d《
1【3 布皿和—。收皿的检测》人员必须《穿无菌服《但不得穿《大褂头、手均不得】裸露:裤管应塞《在袜套?内并不得《。穿拖鞋
【
14《 对培养后的【皿上菌落《计数时应采用5~】10倍?放大镜查看若有2个!或更:多的菌落重》叠可分辨《时则以2《个,或多个菌落计数【
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15 当!单皿菌落数太大受到!质疑时可《按以下原则之一【进行处理
】
1?)作为坏点》剔除:;
》。
2)重测—如结:果仍大?以,两次平均值为—准;如结《果很小?。可再重测;
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3)重测该处】微粒浓度参考此结果!作,出判断
《
《
所有上述处理方】法均应记录在案
】
16【 :每皿:平,均菌落数取到—小数点后《1位
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17 》动态监测时每点叠】放多个平皿或采【用可自动切换的【仪器每点《应,采满4h以》上每皿可《采30min当只】放1个皿时可—少于4h但不可少】于1h
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E.8.4 ! 浮游菌采样应符】合下列要求》。
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《
,1 使用单级或】多级撞?击式采样器、离【心采样器或》过滤采样器采样必须!按所用仪器说明书】的步骤进行特别要注!意检测之前》对仪器?。消毒火?菌并对培《养,皿或培养基》条做:阴性对照
》
2 】采样点数应不少【于微粒计数》浓度测点数》
3 】 采样?点应在离《地0:.8m高平面上均】匀布置或经》委,托方(用户)与检测!方协商确定乱流洁净!室内不得在送—风,。口正:下方:布点静态或空态检】测前对室内各种表】面应作擦拭消毒【
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4 每点】采样1次如工艺无】特殊要求每》次采样量应》大,于等于表《E.8.4》推荐:的浮游菌最小—采,样量
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每【次采样?时间不宜超》过15min不应超!过30?min
》
当洁净度】很高或预《期含菌浓度可能【很低时?采样量应大于最【小采样量很多以满足!减少计数误差—的要求
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5 采样】器应用?支,架固定采样时检测人!员应退出手持离【心式采样《器除外检测人员的】穿戴同本《附录E.8.3条】第15款必须—手持采样器时应将手!臂伸:直站:。于下风向
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6 》 采样后宜在2h】。之内:将采样器中的—培养皿或培养基条送!入培养箱中培养
】
》7 ?每点平均值取到小】数点后?1位
8! :动态监测的测—点位置、《数,量和高度由》工艺并经协商确定每!间洁净室《或每一个独立—受,。控环境中各点总【采样量?不分:级别均应《大于:1m3每《点可用多台采样器】
9 !单,点菌:落数太大时应按附】录E.8.3—条,第15款《的原则处理
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E.【。8.5 表面【染菌密度检测应符合!下列要求
】
1 对于洁】净,室内围护《结构、设《备等表面的》微生物采样应采用】无菌棉拭《子擦抹法当》表面很?大硬且?平时也可采用接【触皿法
《
2— 用规格》板,标定出面积为2【。5c:m2的区块对—于围护结《构每面结构不—少于4?块对于设备每—。。件不少于2块—取样地点均》。协商确定《
3 】 将无菌棉拭于含】10mL稀释液【试管中浸湿于—管壁上?挤干:后对一区块》擦抹采样横竖往返8!次每一区块使用【1根无菌棉拭采样】后以无菌《。操作方?式将棉拭采》样端剪入原稀释液】试管中经电》动混匀器《。震荡20s或—在手:掌振打200次
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4 — 取含菌液体1【。.0mL以》琼,脂灌注法《接种平皿每》个样本接《种2个平《皿于(35~37)!℃培养?箱中培养《。(24~4》8)h后《。计数
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5: :必须将本次检—测所用的稀释液【、棉:拭子、?培养:基等留样《作阴性?比照
】6 具体事项遵】照卫生部消》毒技术规范执—行
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7 对于适】用接触皿采样的【表面以无菌》操,。作方式先将培—。养基:注入硬质或软质Φ】。55平皿使》培养基?表面高出培养皿周边!。测试时将培》养皿:。倒过来使《培养基表《面均匀牢固地—按压住整个区域5】s不得?有环形或线性—的,运动
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《8 对于围护【结,构每面结构应用【不少于4个》培养皿按压对—于设备每件用不少】于2个培养皿按压】
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9 《 按压取样后—的培养皿《应在2?h之内?于(3?5~37)℃培【。养箱中培《养(24~4—8):h后计数
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10? , 菌数平均数取到】。小数点后1位
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