E.8 !悬浮微生物的检测
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》E.:8.1 悬浮微】生物:的采样?装置有以下两类
】。
1— 采用无》源,采样装置如培养皿】
2 】 采用有源采样装置!。如撞击采样器、离心!采样器、过滤—采样器
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E.8.【2 : 空气?洁净环境中悬浮微生!物的静态或空态检测!前应对各类表—面进行擦拭消毒但不!得对室内《空气进行熏蒸、喷洒!之类的消毒动态检】测均不得对》表面和空气进行消】毒
E】.8.3《。 沉降菌检测【应符合下列》要求:
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1 【使用直径90mm(!Φ9:0)的培养皿采【样当采用《其他直径《培养皿时应使其总】面积和?Φ,90皿总面积相【当
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2 培养皿中!灌注:胰蛋白?酶大:豆琼:脂培养基必须留样作!阴性对照
【
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3 》培养皿表面》应经适当消毒清洁处!理后布置在有代【表性的地《。点和气流扰》动极小的地点在乱】流洁净室内培—养皿不应布置在【送风口正下方
【。
《
4 当用户没】有特定要求时—培养皿应布置在地】面及其以上0.【8m之内的》任意高度
》
5 每!一间洁净室》。或每一?个控制区应设1【个阴性对照皿
【
《
6 动态监测】时也可?协商布点《位置和高度
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,。
7《 培养皿数应【不少于微粒计—数浓度的测点数如】工,艺无特殊要求应大】于等于表E.8【.3中的最少培养皿!数另外各加1—个对:照皿
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《
8 —。 ,当延长沉降》时间时可按》比例减少《最少培养皿数为【防止脱水《最长沉降时间不【宜超过1h》当所需沉《降时:间,超过1h可重叠多皿!连续采样除非经过验!证,证,明更长?的沉降时间可以基本!按比例增加》菌落数
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9 培养皿!应从内向外布—置从外向内收—皿
1】。0 每布置完1】个皿皿盖只允许斜】放在皿边上对照【皿盖:挪,开即盖?上
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11 布皿【前和收皿后均应用双!层包:装保护?培养皿以防污—染
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12 】 收:皿后皿应《倒置摆放并应—及,时放入培养箱培养】在培养箱外》时间不宜超过2【h如:无专:。业标准规定对于检】测细菌总数》。培,养温度采用》(35~3》7)℃培养时间为】。(24~48—)h;对于检测【真菌培养温度(【27~29)—℃培养时间》3d
1!3 布皿和收皿】的检测人员》必须穿无《菌服但不《得穿大褂《头、手均不得裸【露裤:管应塞在袜套内并不!得穿拖鞋
】
:14 对培养后】的皿上菌落》计数:时应采用《5~10倍放大镜】查看:若有2?个或更多的》菌落重叠可》分辨时则以2—个或多个《菌落计数
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15 》当单:皿菌落?数太大受《到质疑?时可按以下原则之一!进行处理《。
—1)作为坏点剔除】;
【2):重测:如,结果:仍大以两次平均值】为准;如结》果很小可再重测;】
3)】重测该处微粒—浓度参考此结果作】出判断?
所有上!述处理?方法均?应记:录在案
《
《
,。16 每皿平均】菌落数取《到小:数点:后1位
】
1:。7 ?动态监测时每点叠放!。多个平?皿,或,采用可自动切换【的仪器每点》应,采满4h以》。。上每皿可采30【。min当只放1个】皿时可少于》4h但不可少于1h!
《
:E.:。8,。.4 浮》。游菌采样应符合下列!要求
》
1 使用单!级或:。多级撞击式采样器、!离心:。采样器或过滤采样】器,采样必须按所用仪】器说明书的步骤进】行特:别要注意检测之【前,对仪:器消毒火菌并对培】养,皿或培养基条做【阴性对?照
《
2《。。 采样点数应不少!于微粒?计数浓度测点数
】
3— 采样点应在离地!。0.:8m高平面上均匀】布置或经《委托方?(,用户)与检测—方协商确定乱流【洁净:室,内不得在送》风口正下方布点静】态或空态检测前对室!内各种表面应作擦】拭消毒
】
4 每点采样1!次如工艺无特殊【要求每次采样—量应大于等于表【。。E.:8.4推荐的浮游菌!最小采?样,量
》
》
每次》采样时间不宜超过1!5mi?n不应超过3—0,min
》
,
当洁净度【很高或预期含菌浓度!。可能很?低时采样量应大于最!小采样量很》多以满足《减少计数《误差的要求》
5 !采样:器应用支架》固定采样《时检测人员》应,。退出:手持离心式采—。样器除外检》测人员的穿戴同本附!录E.8.3条第】15:款必须手持》采样器?时应将手臂伸直【站于下风向》
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6 】采样后宜在2h之】内将采样《器中的?培养:皿或培养基条送【入,培养箱中培养
】
7 每点!平均值?取到小数点后1【位,
—8 动态》监测的测点位—。置,、数量和高度—。。由工艺?并经协商确定每间洁!净,。室,。或每:一个独立受控环境中!各点总采样量不【分级别均《。应,。大于1?m3每点可用—多台采样器
【
9》 单点菌落数太】大时:应按附录E.8【.3条?第1:。5款的原则处理
】
E.8.!5 表面染菌密】度检测应符合下列要!求
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:1 对《于洁净室内围—护结构、设备—等表面的《微生物采样应采【用无菌棉拭子擦抹法!当表面很大硬—且平时也《可采:用接:触皿法
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2 《用规:格板标定出面—积,为2:5cm2的区块对】于围护结构每面结】构不少于《4块:对于设备《每件不?少于2块取样地【点,均协商确定
】
?。3 :。 将无菌棉拭于含】10mL稀释—液试管中浸》湿于管壁上挤干后对!一区块擦《抹采样横《竖往返8次》每一区块使用—1根无菌棉拭采【。。样后以无菌操—作方式将棉拭采样端!剪,入,原,稀释液试管中—经电动混匀》器震荡?20s或在手掌【振打200次
【
》4 ?取含菌液体1.【0m:L,以琼:脂灌注法接种平【皿每个样本接—。种2个?平皿于?(35~37)℃培!养,箱中培养(24【~48)h》后计数
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《5 必须将本次】检,测所用的稀释—液、棉拭子、—培,养基等留样作阴性】比照
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6》 具体《事项:遵照卫生部》消毒技术规范执行
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7 对【于适用接触皿采【样的表面以》无菌操?作方式?先将培?养基注入硬质或软】质Φ55平皿使【培养:基,表面高出培养皿【周边测试时将培养皿!倒过来使培养—基表面均匀牢—固地按压住整—个区域5s不得【有环形或线性的运】动
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8》 对于围》护,结构每面结构应【用,不,。少于4?个培养皿《按压:对于设备每件—用不少于2个培【。养皿:按压
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9 按压取】样后的培养皿—应在2h之内—于(3?5~37)℃培养】箱中培养《(,24~48)h【后计数
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10 —。菌数平均数取到小】数点后1位
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