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E.8 】 悬浮微生》物的检测
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E.8.》。1 ?悬浮微生物的采样装!置有以下两类
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?1 采用》无,源采样装置如培【养,皿
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2 【 采用有源采样装】。置,如撞击采样器、离心!采样器、《过,滤采样器
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《E.8.2 空气!洁净环境中悬浮【微生物的静态或空态!检,测前应对各》类表面进行擦拭【消,毒但不?得对室内《。空气进行熏》。蒸、喷洒之类—的消毒动态检测均】不得对表面和空气】进行:消毒
】E.8.3 【。沉降菌检测应符合】下列要求
】
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1 《使,用直径90mm(Φ!90:)的培养皿采—样当:采用其他《直径培养皿时应使】其总面积和Φ—90皿总面积—相当
2! 培?养皿中灌《注胰蛋白酶大豆琼】。脂,培养基?必须:留样:作,阴性对照
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3 【培养皿表面》应,经,。适,当消毒清洁处理后】。布置在有代表性【。的地点和气流扰【动极小的地点—在乱流洁净室内【培养:皿不应布置在送风】口正:下方
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4 】当用户没有特定要】求时培养皿》应布置?在地面及其以上0】。.8:m之内的《任意高度
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5: 每一间洁—净室或?每一个控制区应设】1个阴性对照—皿
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6 动》态监测时也可协【商布点位置》和高度
【。
7 培—养,皿数应不少》于微粒计数浓度【的测点数如工艺无特!殊要求应大》于等:于表E.8.3【中的最少培养—皿数另外各加—1个:对照皿
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:。8 ?当延长沉降时—。间时可按比例减少】最少培养皿数—为,防止脱水最长—沉降时间《不宜超?过1:h,当所需沉降时间超过!1h:可重叠多皿》连续:采样除非《经过:验证证明《更长的沉降时间【可以基?本按比例增加菌落】数
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9 培养皿应】从内向外布》置从外向内收皿【
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10 【每布置?完1个皿皿盖—只允:许斜放在《皿边上对《照皿盖?挪开即盖上
】
11 — 布:皿前和收皿后均应用!双层包装保护培养皿!以防污染
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12? 收皿后》皿应倒?。置摆放并应及时放】入培养?箱,培养在培养箱外时间!不宜超过2》h如无专业标准规】定对于检测细—菌总数培养温—度采用(35~37!)℃:。培养时?间,为(2?4~48)h;对】于检测真菌培养温】度(27~》29)℃培养时【。间3d
》
13 布!皿和收皿的》检测人员必须穿无】菌,服但不得《穿大褂头、手均【。不得裸露《裤管应塞在袜套【内并不?得穿拖鞋
》
14【 对培养后的皿上!菌落计数时应采用】5~10倍放—大镜查看《若,有,2,个或更多的》菌落重叠可分辨时则!以2个或多个—菌落计数《
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15《 当单皿》菌落数太大受到质】疑,。时可按?以下原则之一—进行处理
》
1)作】为,坏点:剔除;
《
2)重测!如结果仍大》以两次平均值为【准;如结果很小【可再:重测;
】
3)重测》该处微粒浓度参【考此:结果作出《判断
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所—有上述?处理方法均应—记录在案《
》
16 》每皿平均菌》落数取?。到小数点后1位【
17】 动态监测时每点!叠放:多,个平:皿或采用可自—动切换的仪器每点应!采满4h以上每皿可!采3:0,min当只放1【个皿时?可少于4h但不可少!于1:h
》
E?.8.4 浮【游菌采样应符合【下列要求
【
1 使用】单级或多《。。级,撞,击式采样器、离心】采样器或《过滤采样器采样必】。。须按:所用仪器说明书的】步骤:进行特别要注意【检,测之前对仪器—消毒火菌并》对培养皿或培—养基条做阴性对照
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2》 采样点数应【。不少于?微粒计数浓度—测点数?
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3《 采样点应在离】地,0.8m高平面【上均匀布置或经【委托方(用》户,)与:检测方协商确定【乱流洁净室内不得】。。在送风口《正下:。方布点静态或空态】检,测前对室内各种表】面应作擦拭消毒
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4 每点采样1!次如工艺无特殊要】。求每次采样量应大】于等于表E》.8.?4推荐的浮游—。菌最小采样量
【
》
每次】采样时间《不宜超过15min!。不应超过30min!
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《当洁:。净度很高《或预期?含菌浓度可能很【低时采样《量应大于最小—采样量很《多以满足减少计数】误差的要《求
5 ! 采样器应用支架】固定采样《时检测人员应退【出,手,持离心式《采样器除外检测人员!的穿:戴同本附录E—.8.3条第15款!。必须手持采样器时】应将手臂伸》直站于下风向—
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》6,。 采?。样后宜在2h之内将!采样器中的培养皿】或培养基《条送入培养箱—。中培养
【
7 每—点平:均值取?到小数点《后1位
《
8— 动态监测的测】点位置、数量和【高,度由工?艺并经协商确定每】间洁净室或每—一个独?立受控环境》。中各点总采样—量不分级别》均应大于1》m3:每点:可用多台采样器
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9 — 单点菌落数—太大时应按附录E.!8.3条《第15款《的原则处理》
《。
E.8.5 !。。表,面染菌?密度检测应符合【下列要求
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1 对于!洁净:室内围护结》构、设?。备等表面的微生物】采样应采用》无菌棉拭子擦抹【法当表面很大—硬且平时也》可采用接触皿—法
2】 用规格板标定出!面积:为2:5cm2的区块对】于围护结《构每面结构不少【于4块对于设备每】。件不少于2块—取样地?。点均协商确定
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3 《 将无菌棉拭—于,含1:0mL稀释液试管】中浸湿于管》。壁上挤干后对一区】块擦抹采《样横竖往返8次【每一区?。块使用1根无菌棉拭!采样:。后,以无菌操作方式将】棉拭采?样端剪入原稀释液试!管中经电动混匀【器震荡20s—或在手掌《振打200次
【
4— , 取含菌液体—1.0?mL以琼脂》灌注法接种平—。皿每个样本》接,种2个平皿》于,(35~37—),℃培养?箱中培养(》24~48)h后】计数
5! 必须将本—。次检测所用》的稀释液、》棉拭子、培养基等留!样作阴性比照
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6》 具体事》项遵照卫生部消【毒技术规范执行
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7 【。 ,对,于适用接《。触皿采样的表面以无!菌操作方《式,先将:培,养基注入《硬,质或软?质,Φ,55平皿《使培养基表面高【出培养皿周》边测试时将培养皿】倒过来使培养基表】面均匀?牢固地按《压住整个区域5s不!得,有环形或线性—的运动
】
,8 对于围护【结构每?。面结构应用不少【于4个培养皿按【压对于设备每件用】不少于?2个培养《。皿按压?
—9 按压取—样后:的培养皿应在2h】之内于?(35~37—)℃培养箱中培养】(,24~48)h后计!数
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10 菌数【平均数?取到小数点后1【。位
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